摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-29页 |
·鸡贫血病毒(Chicken Infection Anaemia Virus,CIAV) | 第13-18页 |
·CIAV 的发现、命名及分布情况 | 第13-14页 |
·CIAV 的形态学及理化特性 | 第14-15页 |
·病毒基因组及编码蛋白 | 第15页 |
·CIAV 组织病理学 | 第15-16页 |
·诊断方法 | 第16-17页 |
·临床症状 | 第16页 |
·依据病理剖检变化进行诊断 | 第16页 |
·病原学诊断 | 第16页 |
·血清学诊断 | 第16-17页 |
·分子生物学诊断 | 第17页 |
·CIAV 的预防和防制 | 第17-18页 |
·猪圆环病毒(Porcine Circovirus,PCV) | 第18-25页 |
·病原学 | 第18-19页 |
·病毒分类与形态 | 第18页 |
·病毒理化特性 | 第18-19页 |
·分子生物学特征 | 第19-20页 |
·病毒基因组结构 | 第19页 |
·病毒编码的蛋白 | 第19-20页 |
·流行病学 | 第20-21页 |
·PCV 致病机理 | 第21-22页 |
·PCV2 的组织嗜性和靶细胞 | 第21页 |
·PCV2 的致病机制 | 第21-22页 |
·PCV2 感染后的特异性抗体变化 | 第22页 |
·PCV2 发生的诱导因素 | 第22页 |
·诊断方法 | 第22-24页 |
·病原学方法 | 第22-23页 |
·血清学方法 | 第23-24页 |
·PCV 的的预防控制 | 第24-25页 |
·鸭圆环病毒(Duck Circovirus, DuCV) | 第25-29页 |
·DuCV 的病原学 | 第25页 |
·鸭圆环病毒的基因组 | 第25-27页 |
·鸭圆环病毒的基因组 | 第27页 |
·鸭圆环病毒的流行病学 | 第27页 |
·鸭圆环病毒的致病机理 | 第27-28页 |
·鸭圆环病毒的诊断 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-55页 |
·鸭圆环病毒ORF3 基因克隆测序及序列分析 | 第29-36页 |
·材料 | 第29-30页 |
·病料、菌种和克隆载体 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29-30页 |
·试验方法 | 第30-36页 |
·病毒基因组DNA 的提取 | 第30页 |
·鸭圆环病毒(DuCV)ORF3 基因 PCR 扩增 | 第30-31页 |
·电泳检测 | 第31页 |
·目的核苷酸克隆测序 | 第31-34页 |
·鸭圆环病毒(DuCV)ORF3 基因序列分析 | 第34-36页 |
·鸭圆环病毒 FJ0601 株 ORF3 蛋白的原核表达及功能验证 | 第36-44页 |
·材料 | 第36-37页 |
·载体与受体菌 | 第36页 |
·仪器与试剂 | 第36-37页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试剂 | 第37页 |
·试验方法 | 第37-44页 |
·引物设计与合成 | 第37-38页 |
·鸭圆环病毒(DuCV)ORF3 基因原核表达载体的构建 | 第38-41页 |
·pET-32a-C3 重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第41-44页 |
·鸭圆环病毒ORF3 基因的真核表达 | 第44-55页 |
·材料 | 第44-46页 |
·质粒、细胞、受体菌及细胞培养基 | 第44-45页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·培养基及主要试剂的配制方法 | 第45-46页 |
·主要仪器及设备 | 第46页 |
·试验方法 | 第46-55页 |
·引物设计及合成 | 第47页 |
·DuCV ORF3 基因重组杆状病毒转移载体的构建 | 第47-50页 |
·重组质粒的转座(即重组Bacmid 的构建) | 第50-51页 |
·重组Bacmid DNA 的提取及鉴定 | 第51-52页 |
·重组杆状病毒的获得与病毒扩增 | 第52-53页 |
·ORF3 蛋白在sf9 昆虫细胞中的表达与检测 | 第53-55页 |
3 结果与分析 | 第55-66页 |
·克隆测序结果分析 | 第55-60页 |
·PCR 扩增及序列分析 | 第55页 |
·克隆与酶切鉴定 | 第55-56页 |
·ORF3 基因同源性分析和进化树的构建 | 第56-60页 |
·原核表达及抗血清制备 | 第60-62页 |
·DuCV ORF-C3 基因的 PCR 扩增结果 | 第60页 |
·pET-32a-ORF3 重组质粒的筛选和酶切鉴定 | 第60-61页 |
·重组菌菌体裂解物的凝胶电泳结果 | 第61-62页 |
·原核表达 DuCV ORF3 蛋白的 Western-blotting 检测 | 第62页 |
·制备抗DuCV ORF3 蛋白的抗血清 | 第62页 |
·Ⅱ型DuCV-ORF3 基因的真核表达 | 第62-66页 |
·DuCV ORF3 基因的 PCR 扩增结果 | 第62-63页 |
·pFastBac HTA-C3 重组质粒的筛选和酶切鉴定 | 第63页 |
·重组Bacmid DNA 的鉴定 | 第63-64页 |
·真核表达基因2 型DuCV ORF3 蛋白的Western-blotting 检测结果 | 第64页 |
·IFA 鉴定结果 | 第64-66页 |
4 讨论 | 第66-70页 |
5 结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
硕士学位论文内容简介及自评 | 第80页 |