小麦与条锈菌亲和互作的抑制性差减杂交文库构建及ESTs分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| ·小麦条锈菌研究概况 | 第11-13页 |
| ·小麦条锈病的危害与分布 | 第11页 |
| ·小麦与条锈菌互作的研究现状 | 第11-13页 |
| ·抑制性差减杂交技术 | 第13-20页 |
| ·抑制性差减杂交(SSH)技术的基本原理 | 第14页 |
| ·抑制性差减杂交(SSH)技术的基本步骤 | 第14-15页 |
| ·抑制性差减杂交(SSH)技术的技术评价 | 第15-16页 |
| ·抑制性差减杂交(SSH)技术的技术要点 | 第16页 |
| ·抑制性差减杂交(SSH)技术在植物上的应用 | 第16-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-33页 |
| ·试验材料 | 第20页 |
| ·供试菌种和小麦品种 | 第20页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-33页 |
| ·接种和培养 | 第20-21页 |
| ·总 RNA 提取与mRNA 分离纯化 | 第21-23页 |
| ·抑制差减杂交 | 第23-28页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第28页 |
| ·PCR 产物的载体连接反应 | 第28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28-29页 |
| ·文库重组率检测 | 第29页 |
| ·文库片段大小检测 | 第29页 |
| ·大规模质粒提取 | 第29-30页 |
| ·序列测定 | 第30-31页 |
| ·序列分析 | 第31页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第31-33页 |
| 第三章 结果与分析 | 第33-40页 |
| ·RNA 提取方法对比 | 第33页 |
| ·接头连接效率检测 | 第33-34页 |
| ·差减杂交后产物的第一轮、第二轮PCR 扩增结果 | 第34页 |
| ·差减效率检测 | 第34页 |
| ·SSH-cDNA 文库库容及插入片断大小检测 | 第34-35页 |
| ·测序结果 | 第35-36页 |
| ·序列分析及功能注释 | 第36-39页 |
| ·RT-PCR 检测结果 | 第39-40页 |
| 第四章 讨论 | 第40-44页 |
| ·材料处理及RNA 提取 | 第40页 |
| ·SSH-cDNA 文库构建 | 第40-41页 |
| ·小麦与条锈菌亲和互作的基因表达分析 | 第41-42页 |
| ·SSH 技术分析 | 第42-44页 |
| 第五章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 附表 | 第52-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
