| 摘要(中文) | 第1-8页 |
| Abstract(English) | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-20页 |
| 一、番木瓜研究进展与现状 | 第11-12页 |
| 1.番木瓜性别分化研究 | 第11页 |
| 2.抗病番木瓜的育种 | 第11-12页 |
| 3.提高番木瓜贮藏期的研究 | 第12页 |
| 二、果实成熟软化的研究进展 | 第12-19页 |
| 1.果实成熟软化过程中细胞及细胞壁主要成分的生化变化 | 第13-14页 |
| ·果胶 | 第13页 |
| ·半纤维素 | 第13页 |
| ·纤维素 | 第13-14页 |
| ·淀粉 | 第14页 |
| 2.果胶酶的研究进展 | 第14-19页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶(PG)的研究进展 | 第14-16页 |
| ·果胶酯酶(PE)的研究进展 | 第16页 |
| ·果胶裂解酶(PL)的研究进展 | 第16-19页 |
| ·微生物中的果胶裂解酶 | 第16-17页 |
| ·植物中果胶裂解酶基因的分子生物学研究进展 | 第17-19页 |
| 三、本研究的意义、内容及技术路线 | 第19-20页 |
| 1.本研究的意义 | 第19页 |
| 2.本研究的内容 | 第19页 |
| 3.本研究的技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-35页 |
| 1.材料 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株和载体 | 第20页 |
| ·购买的试剂、酶及药品等 | 第20页 |
| ·常用溶液试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器和设备 | 第21页 |
| 2.试验方法 | 第21-35页 |
| ·番木瓜叶片基因组DNA的提取和检测 | 第21-22页 |
| ·番木瓜叶片基因组DNA的提取(改良的CTAB法) | 第21-22页 |
| ·检测所提取得DNA的质量 | 第22页 |
| ·番木瓜总RNA的提取和检测 | 第22-25页 |
| ·准备工作 | 第22页 |
| ·番木瓜总RNA的提取 | 第22-25页 |
| ·检测所提取的总RNA的质量 | 第25页 |
| ·番木瓜果胶裂解酶基因保守区cDNA序列的获得 | 第25-26页 |
| ·总RNA的逆转录反应 | 第25-26页 |
| ·PCR扩增 | 第26页 |
| ·RACE方法获得番木瓜PL基因全长 | 第26-30页 |
| ·3’RACE引物设计 | 第26页 |
| ·3’RACE试验步骤 | 第26-28页 |
| ·5’RACE试验步骤 | 第28-30页 |
| ·番木瓜果胶裂解酶基因部分DNA序列的获得 | 第30-33页 |
| ·引物的选用与合成 | 第30页 |
| ·PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·番木瓜PL基因DNA5’端部分序列的获得(染色体步移) | 第31-33页 |
| ·目的片段纯化回收 | 第33页 |
| ·回收的目的片段的克隆 | 第33-34页 |
| ·回收的目的片段与T-Vector连接 | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和连接反应物的转化 | 第34页 |
| ·阳性克隆的筛选及测序鉴定 | 第34页 |
| ·生物信息学分析 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与分析 | 第35-51页 |
| 1.番木瓜基因组DNA的提取 | 第35页 |
| 2.番木瓜总RNA的提取 | 第35-37页 |
| 3.番木瓜PL基因cDNA的获得 | 第37-40页 |
| ·番木瓜PL基因保守区cDNA序列的获得 | 第37-40页 |
| ·RACE方法获得番木瓜PL基因的结果分析 | 第40页 |
| 4.番木瓜PL DNA片段的获得 | 第40-46页 |
| ·番木瓜PL DNA中间片段的获得 | 第40-42页 |
| ·番木瓜PL DNA5’端部分序列的获得(染色体步移) | 第42-44页 |
| ·番木瓜PL DNA编码的蛋白质序列的推导 | 第44-46页 |
| 5.番木瓜PL基因编码的蛋白质生物信息学分析 | 第46-49页 |
| 6.小结 | 第49-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-55页 |
| 1.番木瓜样品材料的选择 | 第51页 |
| 2.番木瓜基因组DNA的提取 | 第51-52页 |
| 3.番木瓜总RNA的提取 | 第52-53页 |
| 4.克隆结果 | 第53页 |
| 5.蛋白质序列比较 | 第53-54页 |
| 6.后续研究方向 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录1 四个不同成熟度番木瓜果实彩照 | 第61-62页 |
| 附录2 番木瓜PL基因cDNA序列测序图谱 | 第62-63页 |
| 附录3 番木瓜PL基因DNA序列测序图谱 | 第63-64页 |
| 附录4 番木瓜PL基因5’端序列测序图谱 | 第64-65页 |
| 附录5 番木瓜PL DNA部分序列拼接结果 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
