1 引言 | 第1-15页 |
·伪狂犬病病毒粒子结构 | 第8页 |
·伪狂犬病毒的分子生物学研究进展 | 第8-15页 |
·基因组DNA | 第8-9页 |
·病毒囊膜与糖蛋白 | 第9-10页 |
·病毒自身所编码的酶 | 第10-11页 |
·PRV的溶细胞性复制 | 第11-12页 |
·PRV的疫苗研究进展 | 第12-15页 |
2 材料与方法 | 第15-27页 |
·材料 | 第15-18页 |
·毒株与细胞 | 第15页 |
·细胞培养所需主要试剂 | 第15页 |
·DNA提取所需主要试剂 | 第15页 |
·聚合酶链式反应(PCR)所需主要试剂 | 第15页 |
·菌种与质粒载体 | 第15-16页 |
·目的基因的克隆及其表达所需主要试剂 | 第16页 |
·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)所需主要试剂 | 第16页 |
·Western-blotting的所需的主要试剂 | 第16-17页 |
·主要试剂的配制方法 | 第17-18页 |
·主要仪器 | 第18页 |
·方法 | 第18-27页 |
·伪狂犬病毒(PRV)冀A株的增殖 | 第18页 |
·伪狂犬病毒基因组DNA的提取 | 第18-19页 |
·PCR扩增反应 | 第19页 |
·PCR产物的纯化 | 第19-20页 |
·PCR产物与pUC18克隆载体的连接与转化 | 第20-23页 |
·重组质粒的鉴定 | 第23页 |
·序列测定与序列分析 | 第23页 |
·原核表达质粒的构建 | 第23-24页 |
·目的蛋白的SDS-PAGE分析 | 第24-25页 |
·Western-blotting检测表达产物 | 第25-27页 |
3 结果与分析 | 第27-34页 |
·PRV冀A株gD基因的PCR扩增结果 | 第27页 |
·重组克隆质粒的鉴定 | 第27-28页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第27-28页 |
·重组克隆质粒的双酶切鉴定 | 第28页 |
·序列测定与序列同源性分析 | 第28-31页 |
·系统发育分析 | 第31页 |
·重组表达质粒(pGgD)的酶切鉴定 | 第31-32页 |
·诱导gD基因的表达 | 第32-33页 |
·Western-blotting杂交检测表达的目的蛋白 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-35页 |
5 结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
在读期间发表的学术论文 | 第40-41页 |
作者简历 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
附录1 | 第43-50页 |
附 发表文章 | 第50-53页 |