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猪伪狂犬病毒冀A株gD基因的克隆、表达及检测

1 引言第1-15页
   ·伪狂犬病病毒粒子结构第8页
   ·伪狂犬病毒的分子生物学研究进展第8-15页
     ·基因组DNA第8-9页
     ·病毒囊膜与糖蛋白第9-10页
     ·病毒自身所编码的酶第10-11页
     ·PRV的溶细胞性复制第11-12页
     ·PRV的疫苗研究进展第12-15页
2 材料与方法第15-27页
   ·材料第15-18页
     ·毒株与细胞第15页
     ·细胞培养所需主要试剂第15页
     ·DNA提取所需主要试剂第15页
     ·聚合酶链式反应(PCR)所需主要试剂第15页
     ·菌种与质粒载体第15-16页
     ·目的基因的克隆及其表达所需主要试剂第16页
     ·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)所需主要试剂第16页
     ·Western-blotting的所需的主要试剂第16-17页
     ·主要试剂的配制方法第17-18页
     ·主要仪器第18页
   ·方法第18-27页
     ·伪狂犬病毒(PRV)冀A株的增殖第18页
     ·伪狂犬病毒基因组DNA的提取第18-19页
     ·PCR扩增反应第19页
     ·PCR产物的纯化第19-20页
     ·PCR产物与pUC18克隆载体的连接与转化第20-23页
     ·重组质粒的鉴定第23页
     ·序列测定与序列分析第23页
     ·原核表达质粒的构建第23-24页
     ·目的蛋白的SDS-PAGE分析第24-25页
     ·Western-blotting检测表达产物第25-27页
3 结果与分析第27-34页
   ·PRV冀A株gD基因的PCR扩增结果第27页
   ·重组克隆质粒的鉴定第27-28页
     ·重组质粒的PCR鉴定第27-28页
     ·重组克隆质粒的双酶切鉴定第28页
   ·序列测定与序列同源性分析第28-31页
   ·系统发育分析第31页
   ·重组表达质粒(pGgD)的酶切鉴定第31-32页
   ·诱导gD基因的表达第32-33页
   ·Western-blotting杂交检测表达的目的蛋白第33-34页
4 讨论第34-35页
5 结论第35-36页
参考文献第36-40页
在读期间发表的学术论文第40-41页
作者简历第41-42页
致谢第42-43页
附录1第43-50页
附 发表文章第50-53页

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