| 内容提要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 序言 | 第6-8页 |
| 第一部分 文献综述 | 第8-26页 |
| 1． 脂肪酶概述 | 第8-9页 |
| 2． 超嗜热菌(Hyperthermophile)热稳定性研究进展 | 第9-19页 |
| 2．1 简介 | 第9页 |
| 2．2 超嗜热酶生化与分子特性 | 第9-10页 |
| 2．3 超嗜热酶的工业应用 | 第10-11页 |
| 2．4 酶失活机制 | 第11-12页 |
| 2．5 蛋白质热稳定性机制 | 第12-19页 |
| 3． 蛋白质工程策略提高提高热稳定性 | 第19-24页 |
| 3．1 定点突变技术(Site-directed mutagenesis) | 第20-22页 |
| 3．2 定向进化技术 | 第22-23页 |
| 3．3 定点突变与定向进化技术的结合 | 第23-24页 |
| 4． 其它促进蛋白质热稳定性的方法 | 第24-26页 |
| 4．1 化学修饰 | 第24-25页 |
| 4．2 稳定添加剂 | 第25-26页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第26-40页 |
| 1． 材料 | 第26-28页 |
| 2． 实验方法 | 第28-40页 |
| 2．1 PEL-D92P定点突变 | 第28-33页 |
| 2．2 PEL-G98A定点突变 | 第33-34页 |
| 2．3 PEL-N148T定点突变 | 第34-36页 |
| 2．4 PEL-E113V定点突变 | 第36-37页 |
| 2．5 PEL-P163G、PEL-P163L、PEL-P163H、PEL-P163W、PEL-P163F、PEL-P163R定点突变 | 第37-40页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第40-59页 |
| 1． PEL-D92P定点突变 | 第40-45页 |
| 1．1 突变点的选择 | 第40页 |
| 1．2 突变基因D92P的获得 | 第40-41页 |
| 1．3 表达质粒pPIC3．5K-PEL-D92P的构建 | 第41-42页 |
| 1．4 突变基因在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达 | 第42-43页 |
| 1．5 PEL-D92P-GS最适反应温度和热稳定性的研究 | 第43-45页 |
| 2． PEL-G98A定点突变 | 第45-47页 |
| 2．1 突变点的选择 | 第45页 |
| 2．2 突变基因G98A的获得 | 第45-46页 |
| 2．3 突变基因在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达 | 第46-47页 |
| 3． PEL-N148T定点突变 | 第47-52页 |
| 3．1 突变点的选择 | 第47-48页 |
| 3．2 突变基因N148T的获得 | 第48-49页 |
| 3．3 突变基因在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达 | 第49-50页 |
| 3．4 PEL-N148T-S最适反应温度和热稳定性的研究 | 第50-52页 |
| 4． PEL-E113V定点突变 | 第52-56页 |
| 4．1 突变点的选择 | 第52页 |
| 4．2 突变基因E113V的获得 | 第52-53页 |
| 4．3 突变基因在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达 | 第53-54页 |
| 4．4 PEL-E113V-GS最适反应温度和热稳定性的研究 | 第54-56页 |
| 5． PEL-P163G、PEL-P163L、PEL-P163H、PEL-P163W、PEL-P163F、PEL-P163R定点突变 | 第56-59页 |
| 5．1 突变点的选择 | 第56页 |
| 5．2 突变基因P163G、P163L、P163H、P163W、P163F、P163R的获得 | 第56-57页 |
| 5．3 突变基因在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达 | 第57-59页 |
| 第四部分 小结与讨论 | 第59-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 中文摘要 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
