目录 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
引言 | 第9-11页 |
第一部分 骨髓间质干细胞的分离培养与鉴定 | 第11-17页 |
前言 | 第11页 |
1.1 材料 | 第11页 |
1.2 方法 | 第11-13页 |
1.2.1 MSCs的分离培养及倒置相差显微镜观察 | 第11-12页 |
1.2.2 MSCs透射电镜观察 | 第12页 |
1.2.3 MSCs表面标记检测 | 第12页 |
1.2.4 描绘生长曲线 | 第12-13页 |
1.2.5 统计学方法 | 第13页 |
1.3 结果 | 第13-14页 |
1.3.1 MSCs形态学观察结果 | 第13页 |
1.3.2 MSCs表面标记检测结果 | 第13页 |
1.3.3 MSCs生长曲线分析结果 | 第13-14页 |
1.4 讨论 | 第14-16页 |
1.5 小结 | 第16-17页 |
第二部分 鹿茸多肽对兔骨髓间质干细胞体外增殖的影响 | 第17-23页 |
前言 | 第17页 |
2.1 材料 | 第17-18页 |
2.2 方法 | 第18-19页 |
2.2.1 MTT比色试验 | 第18页 |
2.2.2 流式细胞仪检测细胞周期 | 第18页 |
2.2.3 PCNA表达 | 第18-19页 |
2.2.4 统计学方法 | 第19页 |
2.3 结果 | 第19-20页 |
2.3.1 MTT比色试验结果 | 第19-20页 |
2.3.2 流式细胞仪检测结果 | 第20页 |
2.3.3 PCNA表达结果 | 第20页 |
2.4 讨论 | 第20-22页 |
2.5 小结 | 第22-23页 |
第三部分 鹿茸多肽对MSCs体外软骨表型诱导分化的影响 | 第23-30页 |
前言 | 第23页 |
3.1 材料 | 第23-24页 |
3.2 方法 | 第24-26页 |
3.2.1 MSCs的软骨诱导培养 | 第24页 |
3.2.2 H.E染色显微镜观察 | 第24页 |
3.2.3 阿力新蓝染色检测 GAG合成 | 第24页 |
3.2.4 二甲基亚甲蓝显色法测定 GAG含量 | 第24-25页 |
3.2.5 RT-PCR检测Ⅱ型胶原mRNA表达 | 第25-26页 |
3.2.6 统计学方法 | 第26页 |
3.3 结果 | 第26-27页 |
3.3.1 离心管聚集体培养的细胞团块形态学观察结果 | 第26页 |
3.3.2 硫酸GAG含量测定结果 | 第26-27页 |
3.3.3 Ⅱ型胶原mRNA表达检测结果 | 第27页 |
3.4 讨论 | 第27-29页 |
3.5 小结 | 第29-30页 |
第四部分 鹿茸多肽对软骨表型化MSCs凋亡的影响 | 第30-38页 |
前言 | 第30页 |
4.1 材料 | 第30-31页 |
4.2 方法 | 第31-33页 |
4.2.1 软骨表型化MSCs分组诱导培养 | 第31页 |
4.2.2 透射电镜观察 | 第31页 |
4.2.3 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第31页 |
4.2.4 RT-PCR检测caspase-3 mRNA表达 | 第31-33页 |
4.2.5 ELISA分析caspase-3蛋白酶活性 | 第33页 |
4.2.6 统计学方法 | 第33页 |
4.3 结果 | 第33-35页 |
4.3.1 透射电镜观察结果 | 第33页 |
4.3.2 细胞凋亡率检测结果 | 第33-34页 |
4.3.3 caspase-3 mRNA表达检测结果 | 第34页 |
4.3.4 caspase-3蛋白酶活性测定结果 | 第34-35页 |
4.4 讨论 | 第35-37页 |
4.5 小结 | 第37-38页 |
结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
附录 | 第44-69页 |
附录1 附图 | 第44-50页 |
附录2 综述 骨髓间质干细胞软骨分化生物学的影响因素 | 第50-56页 |
附录3 在校期间发表论文目录 | 第56-57页 |
附录4 在校期间发表论文(第一作者) | 第57-69页 |
附录5 个人简历 | 第69页 |