| 第一章 前言 | 第1-15页 |
| ·野油菜黄单胞菌(XANTHOMONAS CAMPESTRIS)概况 | 第9-11页 |
| ·野油菜黄单胞菌简介 | 第9页 |
| ·野油菜黄单胞菌一些重要的致病因子和致病相关基因 | 第9-11页 |
| ·细菌的锌代谢平衡机制 | 第11-14页 |
| ·细菌的锌离子转运系统 | 第11-12页 |
| ·锌吸收调控蛋白 | 第12-14页 |
| ·本工作的目的与内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-31页 |
| ·材料 | 第15-20页 |
| ·本实验所用的菌株和质粒见表 | 第15-16页 |
| ·培养基及生长条件 | 第16-18页 |
| ·抗生素及其贮存、使用浓度 | 第18页 |
| ·溶液与缓冲液 | 第18-20页 |
| ·方法 | 第20-31页 |
| ·常规PCR反应 | 第20-21页 |
| ·反转录PCR | 第21-22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第22页 |
| ·质粒的提取 | 第22-23页 |
| ·总DNA的提取 | 第23页 |
| ·总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第24页 |
| ·DNA连接 | 第24页 |
| ·电脉冲感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·三亲本接合 | 第25-26页 |
| ·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建 | 第26页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第26-28页 |
| ·胞外酶的检测 | 第28页 |
| ·植株的致病性试验 | 第28页 |
| ·过敏性反应 | 第28-29页 |
| ·细菌在寄主中的生长繁殖的测定 | 第29页 |
| ·锌敏感性实验 | 第29页 |
| ·菌体内的锌含量测定 | 第29页 |
| ·GUS(β-葡糖苷酸酶)活性检测 | 第29-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-54页 |
| ·野油菜黄单胞菌中存在与大肠杆菌ZUR基因同源的基因 | 第31页 |
| ·XC1430突变体的构建 | 第31-34页 |
| ·XC1430内部片段的PCR扩增 | 第32页 |
| ·将内部片段克隆到载体pK18mob上 | 第32-33页 |
| ·突变体的筛选及验证 | 第33-34页 |
| ·XC1430突变体互补菌的构建 | 第34-36页 |
| ·XC1430全基因的扩增 | 第34-35页 |
| ·将XC1430全基因克隆到载体pLAFR6上 | 第35页 |
| ·互补菌的获得 | 第35-36页 |
| ·突变体的生长特性 | 第36-38页 |
| ·突变体在完全培养基中的生长测定 | 第36页 |
| ·突变体在基本培养基中的生长测定 | 第36-38页 |
| ·XC1430编码的产物是锌吸收调控蛋白 | 第38-39页 |
| ·突变体在不同锌浓度下的生长 | 第38-39页 |
| ·菌体内的锌含量测定 | 第39页 |
| ·XC1430与黄单胞菌致病相关 | 第39-40页 |
| ·XC1430是黄单胞菌在叶内生长必需的 | 第40-41页 |
| ·突变体的过敏性(HR)反应 | 第41-42页 |
| ·XC1430与EPS产量相关 | 第42-47页 |
| ·突变体的胞外蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶检测 | 第42-43页 |
| ·突变体的EPS产量测定 | 第43-44页 |
| ·XC1430不调控已知的EPS合成相关基因 | 第44-47页 |
| ·XC1430与XC1429分别属于不同的转录子 | 第47-49页 |
| ·XC1430可能存在两个不同的启动子 | 第49-54页 |
| ·不同长度片断互补菌的构建 | 第49-50页 |
| ·不同长度片段互补菌的锌敏感性检测 | 第50-51页 |
| ·不同长度片段互补菌的EPS产量测定 | 第51-52页 |
| ·不同长度片段互补菌的致病性检测 | 第52-54页 |
| 第四章 讨论 | 第54-57页 |
| ·XC1430编码锌吸收调控蛋白 | 第54页 |
| ·XC1430与致病性相关 | 第54-55页 |
| ·XC1430的转录 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 研究生阶段论文发表情况 | 第61页 |