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野油菜黄单胞菌锌吸收调控蛋白的鉴定

第一章 前言第1-15页
   ·野油菜黄单胞菌(XANTHOMONAS CAMPESTRIS)概况第9-11页
     ·野油菜黄单胞菌简介第9页
     ·野油菜黄单胞菌一些重要的致病因子和致病相关基因第9-11页
   ·细菌的锌代谢平衡机制第11-14页
     ·细菌的锌离子转运系统第11-12页
     ·锌吸收调控蛋白第12-14页
   ·本工作的目的与内容第14-15页
第二章 材料与方法第15-31页
   ·材料第15-20页
     ·本实验所用的菌株和质粒见表第15-16页
     ·培养基及生长条件第16-18页
     ·抗生素及其贮存、使用浓度第18页
     ·溶液与缓冲液第18-20页
   ·方法第20-31页
     ·常规PCR反应第20-21页
     ·反转录PCR第21-22页
     ·琼脂糖凝胶电泳第22页
     ·PCR产物的回收与纯化第22页
     ·质粒的提取第22-23页
     ·总DNA的提取第23页
     ·总RNA的提取第23-24页
     ·限制性内切酶酶切第24页
     ·DNA连接第24页
     ·电脉冲感受态细胞的制备第24-25页
     ·转化第25页
     ·三亲本接合第25-26页
     ·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建第26页
     ·胞外多糖的检测第26-28页
     ·胞外酶的检测第28页
     ·植株的致病性试验第28页
     ·过敏性反应第28-29页
     ·细菌在寄主中的生长繁殖的测定第29页
     ·锌敏感性实验第29页
     ·菌体内的锌含量测定第29页
     ·GUS(β-葡糖苷酸酶)活性检测第29-31页
第三章 结果与分析第31-54页
   ·野油菜黄单胞菌中存在与大肠杆菌ZUR基因同源的基因第31页
   ·XC1430突变体的构建第31-34页
     ·XC1430内部片段的PCR扩增第32页
     ·将内部片段克隆到载体pK18mob上第32-33页
     ·突变体的筛选及验证第33-34页
   ·XC1430突变体互补菌的构建第34-36页
     ·XC1430全基因的扩增第34-35页
     ·将XC1430全基因克隆到载体pLAFR6上第35页
     ·互补菌的获得第35-36页
   ·突变体的生长特性第36-38页
     ·突变体在完全培养基中的生长测定第36页
     ·突变体在基本培养基中的生长测定第36-38页
   ·XC1430编码的产物是锌吸收调控蛋白第38-39页
     ·突变体在不同锌浓度下的生长第38-39页
     ·菌体内的锌含量测定第39页
   ·XC1430与黄单胞菌致病相关第39-40页
   ·XC1430是黄单胞菌在叶内生长必需的第40-41页
   ·突变体的过敏性(HR)反应第41-42页
   ·XC1430与EPS产量相关第42-47页
     ·突变体的胞外蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶检测第42-43页
     ·突变体的EPS产量测定第43-44页
     ·XC1430不调控已知的EPS合成相关基因第44-47页
   ·XC1430与XC1429分别属于不同的转录子第47-49页
   ·XC1430可能存在两个不同的启动子第49-54页
     ·不同长度片断互补菌的构建第49-50页
     ·不同长度片段互补菌的锌敏感性检测第50-51页
     ·不同长度片段互补菌的EPS产量测定第51-52页
     ·不同长度片段互补菌的致病性检测第52-54页
第四章 讨论第54-57页
   ·XC1430编码锌吸收调控蛋白第54页
   ·XC1430与致病性相关第54-55页
   ·XC1430的转录第55-57页
参考文献第57-60页
致谢第60-61页
研究生阶段论文发表情况第61页

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