中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一部分 前言 | 第7-22页 |
1 SARS-CoY的病毒学特征 | 第7-14页 |
2 严重急性呼吸道综合症(SARS)的检测 | 第14-18页 |
3 SARS-CoV病毒的疫苗研究 | 第18-22页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第22-38页 |
1 实验材料 | 第22-29页 |
·菌株和试剂 | 第22-23页 |
·载体图谱 | 第23-25页 |
·常用试剂的配制 | 第25-29页 |
2 实验方法 | 第29-37页 |
·实验方案 | 第29-30页 |
·重组质粒构建示意图 | 第30页 |
·引物设计 | 第30-31页 |
·重组质粒的构建和筛选 | 第31-33页 |
·重组蛋白的表达与纯化 | 第33-34页 |
·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第34-35页 |
·DNA疫苗的免疫 | 第35页 |
·ELISA检测 | 第35-37页 |
3 主要仪器和设备 | 第37-38页 |
第三部分 结果与讨论 | 第38-42页 |
1 重组表达载体的构建 | 第38-41页 |
·引物使用以及对应质粒的名称及融合蛋白的表达情况表 | 第38页 |
·重组表达质粒pM15b、pM22b和核酸疫苗pSecM的构建 | 第38-39页 |
·重组原核表达质粒pETS1、pETS2和真核DNA疫苗pSecS的构建 | 第39-40页 |
·重组表达质粒pQEN和核酸疫苗pSecN的构建 | 第40-41页 |
·重组质粒pEl5b核酸疫苗pSecE的构建 | 第41-42页 |
2.融合蛋白的表达与纯化 | 第42-44页 |
·重组M蛋白的表达和纯化 | 第42页 |
·重组S分段蛋白的表达和纯化 | 第42-43页 |
·重组N蛋白的表达和纯化 | 第43-44页 |
·重组E蛋白的表达和纯化 | 第44页 |
3 ELISA检测结果 | 第44-46页 |
·重组M蛋白作为抗原的检测结果 | 第44-45页 |
·重组S作为抗原的检测结果 | 第45页 |
·重组N蛋白作为抗原的检测结果 | 第45-46页 |
·重组E蛋白作为抗原的检测结果 | 第46页 |
4 讨论 | 第46-50页 |
·质粒构建情况讨论 | 第46-47页 |
·融合蛋白的表达情况分析 | 第47页 |
·蛋白纯化中遇到的问题 | 第47-48页 |
·ELISA结果分析 | 第48-50页 |
第四部分 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
附录1 发表的论文 | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |