| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| Results | 第10-12页 |
| 第一部分 小鼠内脏脂肪组织成纤维细胞系的建立 | 第12-35页 |
| 1 前言 | 第12-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-20页 |
| 2．1 主要材料 | 第14-15页 |
| 2．2 主要仪器 | 第15页 |
| 2．3 VAFC细胞系建立 | 第15-16页 |
| 2．4 原子力显微镜(AFM)观察 | 第16页 |
| 2．5 透射电子显微镜(TEM)观察 | 第16页 |
| 2．6 生长特性和染色体分析 | 第16页 |
| 2．7 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第16-17页 |
| 2．8 免疫荧光细胞化学染色分析 | 第17页 |
| 2．9 VAFC条件培养基(VAFC CM) | 第17-19页 |
| 2．10 吞噬试验 | 第19页 |
| 2．11 VAFC CM对 BMCs凋亡的影响 | 第19页 |
| 2．12 VAFC CM对淋巴细胞增殖的影响 | 第19-20页 |
| 2．13 统计学处理 | 第20页 |
| 3 结果与分析 | 第20-32页 |
| 3．1 建立VAFC细胞系 | 第20-21页 |
| 3．2 形态学分析 | 第21-24页 |
| 3．3 生长特征和染色体分析 | 第24-25页 |
| 3．4 基因表达分析 | 第25-27页 |
| 3．5 VAFC CM对巨噬细胞发育的影响 | 第27-29页 |
| 3．6 VAFC CM对 BMCs凋亡的影响 | 第29-30页 |
| 3．7 VAFC CM对淋巴细胞增殖的影响 | 第30-32页 |
| 4 讨论 | 第32-35页 |
| 第二部分 小鼠 C/EBPAА，PPARG和PREF-1原核表达以及多克隆抗体制备 | 第35-47页 |
| 1 前言 | 第35-38页 |
| 1．1 肥胖 | 第35页 |
| 1．2 脂肪细胞分化与发育 | 第35页 |
| 1．3 脂肪细胞分化的调控因素 | 第35-36页 |
| 1．4 C/EBP家族 | 第36-37页 |
| 1．5 PPAR家族 | 第37页 |
| 1．6 Preadipocyte factor-1(pref-1) | 第37-38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-41页 |
| 2．1 主要材料和试剂 | 第38-39页 |
| 2．2 总 RNA抽提 | 第39页 |
| 2．3 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第39-40页 |
| 2．4 构建原核表达质粒 | 第40页 |
| 2．5 融合蛋白表达，纯化及鉴定 | 第40-41页 |
| 2．6 抗血清制备及鉴定 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-46页 |
| 3．1 RT-PCR扩增C/EBPα，PPARγ和 Pref-1 cDNA片段 | 第41-42页 |
| 3．2 菌落 PCR鉴定重组质粒 | 第42-44页 |
| 3．3 重组质粒 DNA序列测定 | 第44页 |
| 3．4 融合蛋白表达，纯化及鉴定 | 第44-45页 |
| 3．5 抗血清鉴定 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 总结 | 第53-54页 |
| 论文发表 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
