0 引言 | 第1-9页 |
1 文献综述 | 第9-20页 |
1.1 我国土地盐碱化的现状及治理 | 第9页 |
1.2 植物甜菜碱和胆碱单加氧酶 | 第9-12页 |
1.2.1 甜菜碱 | 第9-10页 |
1.2.2 胆碱单加氧酶(CMO) | 第10-12页 |
1.3 盐角草生物学特性及其耐盐机制 | 第12-14页 |
1.3.1 盐角草的分布与分类 | 第12-13页 |
1.3.2 盐角草的耐盐机制 | 第13-14页 |
1.4 RACE技术在植物基因分离中的应用 | 第14-18页 |
1.4.1 RACE原理 | 第14-15页 |
1.4.2 新型的RACE | 第15-17页 |
1.4.3 RACE在植物基因克隆上的技术优势、应用现状及其发展前景 | 第17-18页 |
1.5 转基因植物的应用前景 | 第18-19页 |
1.6 研究目的及意义 | 第19-20页 |
2 盐角草胆碱单加氧酶基因的克隆 | 第20-37页 |
2.1 材料和方法 | 第20-30页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 试剂 | 第20页 |
2.1.3 RNA的提取 | 第20-21页 |
2.1.4 RNA完整性检测 | 第21页 |
2.1.5 CMO cDNA全序列的获得 | 第21-30页 |
2.2 结果与分析 | 第30-34页 |
2.2.1 RNA的完整性 | 第30-31页 |
2.2.2 CMO cDNA全序列的确定及序列分析 | 第31-34页 |
2.3 讨论 | 第34-35页 |
2.3.1 CMO cDNA的分离 | 第34-35页 |
2.3.2 CMO序列分析 | 第35页 |
2.4 小结 | 第35-37页 |
3 盐角草胆碱单加氧酶基因植物表达载体的构建 | 第37-44页 |
3.1 材料和方法 | 第37-43页 |
3.1.1 试剂 | 第37页 |
3.1.2 CMO基因编码区的克隆 | 第37-38页 |
3.1.3 CMO基因植物表达载体的构建 | 第38-43页 |
3.2 结果与分析 | 第43页 |
3.2.1 CMO编码区的克隆 | 第43页 |
3.2.2 CMO植物表达载体的构建 | 第43页 |
3.3 小结 | 第43-44页 |
4 胆碱单加氧酶基因在烟草中的表达 | 第44-51页 |
4.1 材料和方法 | 第44-46页 |
4.1.1 胆碱单加氧酶基因转化烟草 | 第44-45页 |
4.1.2 转化烟草的检测 | 第45-46页 |
4.2 结果与分析 | 第46-49页 |
4.2.1 胆碱单加氧酶基因转化烟草 | 第46-47页 |
4.2.2 转化烟草的检测 | 第47-49页 |
4.3 小结 | 第49-51页 |
5 结论与展望 | 第51-53页 |
5.1 主要结论 | 第51页 |
5.2 本论文的创新之处 | 第51页 |
5.3 有待于进一步开展的工作 | 第51-52页 |
5.4 展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
硕士期间发表论文 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
附录Ⅰ:电泳用DNA Maker | 第59页 |
附录Ⅱ:pUC19质粒图谱 | 第59-60页 |
附录Ⅲ:pMD 18-T质粒图谱 | 第60页 |
附录Ⅳ:pBI121结构 | 第60-61页 |