中文摘要 | 第1-3页 |
英文摘要 | 第3-7页 |
第一部分 前言 | 第7-14页 |
1 研究背景 | 第7页 |
2 国内外研究动态 | 第7-13页 |
·关于β-甘露聚糖酶 | 第7-10页 |
·β-甘露聚糖酶的发现及其研究动态 | 第7页 |
·β-甘露聚糖酶的特征 | 第7-9页 |
·β-甘露聚糖酶的应用 | 第9-10页 |
·关于猪肠道菌群 | 第10-13页 |
·猪肠道菌群的发现及其研究动态 | 第10页 |
·猪肠道菌群的特征 | 第10-12页 |
·猪肠道正常菌群的数量分布情况 | 第10-11页 |
·猪肠道正常菌群分类及定植机制 | 第11-12页 |
·猪肠道菌群的作用 | 第12-13页 |
3 实验目的与主要内容 | 第13-14页 |
第二部分 猪肠道部分定植菌群的分离与鉴定 | 第14-24页 |
1 材料与方法 | 第14-19页 |
·材料 | 第14-16页 |
·实验用猪肠道 | 第14页 |
·培养基 | 第14-15页 |
·试剂 | 第15-16页 |
·仪器 | 第16页 |
·方法 | 第16-19页 |
·菌种分离 | 第16-17页 |
·纯化保存 | 第17页 |
·形态观察 | 第17页 |
·菌落形态 | 第17页 |
·革兰氏染色 | 第17页 |
·菌种鉴定 | 第17-19页 |
·大肠杆菌菌种鉴定 | 第17-18页 |
·乳酸杆菌菌种鉴定 | 第18-19页 |
2 结果与讨论 | 第19-24页 |
·结果 | 第19-24页 |
·菌落形态观察 | 第19-20页 |
·革兰氏染色和镜检 | 第20页 |
·生理生化测试结果 | 第20-24页 |
·讨论 | 第24页 |
第三部分 野生大肠杆菌与工程菌表达性能的比较研究 | 第24-34页 |
1 材料与方法 | 第24-29页 |
·材料 | 第24-25页 |
·质粒载体 | 第24页 |
·菌种 | 第24页 |
·诱导物 | 第24-25页 |
·试剂 | 第25页 |
·培养基 | 第25页 |
·仪器 | 第25页 |
·方法 | 第25-29页 |
·转化 | 第25-27页 |
·YS-PUC18-GFP 和BL21-PUC18-GFP 表达对比 | 第27页 |
·YS-PUC18-GFP 和BL21-PUC18-GFP 生长情况 | 第27页 |
·目测表达量 | 第27页 |
·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 表达对比 | 第27-29页 |
·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 生长情况 | 第27-29页 |
·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和 YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 在各类培养基中表达情况 | 第29页 |
2 结果与讨论 | 第29-34页 |
·质粒提取结果 | 第30页 |
·转化鉴定 | 第30页 |
·YS-PUC18-GFP 和BL21-PUC18-GFP 的表达量对比 | 第30-31页 |
·YS-PUC18-GFP 和BL21-PUC18-GFP 的生长对比 | 第30-31页 |
·目测表达量 | 第31页 |
·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 的表达对比 | 第31-34页 |
·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 的生长情况 | 第31-32页 |
·菌落PCR 筛选结果 | 第32-33页 |
·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和 YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 在各类培养基中表达情况 | 第33-34页 |
第四部分 转基因大肠杆菌在猪肠道中的表达 | 第34-41页 |
1 材料与方法 | 第34-39页 |
·材料 | 第34-35页 |
·试剂 | 第34页 |
·发酵用菌种 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
·培养基 | 第34页 |
·猪瘘管手术所需药品与器械 | 第34-35页 |
·猪只及饲料配方 | 第35页 |
·方法 | 第35-39页 |
·猪十二指肠和回肠瘘 | 第35页 |
·10L 发酵罐培养 | 第35-37页 |
·微胶囊化 | 第37页 |
·灌注与采样 | 第37-38页 |
·制备灌注液 | 第37-38页 |
·灌注 | 第38页 |
·采样 | 第38页 |
·检测 | 第38-39页 |
·样品前处理 | 第38页 |
·菌落PCR | 第38页 |
·ELISA 双抗夹心法检测转β-甘露聚糖酶大肠杆菌的表达产物 | 第38-39页 |
2 结果与讨论 | 第39-41页 |
·猪瘘管 | 第39页 |
·10L 发酵罐培养 | 第39-40页 |
·菌落PCR 结果 | 第40页 |
·ELISA 双抗夹心法检测 | 第40-41页 |
第五部分 结束语 | 第41-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
作者简介 | 第49页 |