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猪肠道定植菌分离与转半纤维素酶大肠杆菌在肠道内表达

中文摘要第1-3页
英文摘要第3-7页
第一部分 前言第7-14页
 1 研究背景第7页
 2 国内外研究动态第7-13页
   ·关于β-甘露聚糖酶第7-10页
     ·β-甘露聚糖酶的发现及其研究动态第7页
     ·β-甘露聚糖酶的特征第7-9页
     ·β-甘露聚糖酶的应用第9-10页
   ·关于猪肠道菌群第10-13页
     ·猪肠道菌群的发现及其研究动态第10页
     ·猪肠道菌群的特征第10-12页
       ·猪肠道正常菌群的数量分布情况第10-11页
       ·猪肠道正常菌群分类及定植机制第11-12页
     ·猪肠道菌群的作用第12-13页
 3 实验目的与主要内容第13-14页
第二部分 猪肠道部分定植菌群的分离与鉴定第14-24页
 1 材料与方法第14-19页
   ·材料第14-16页
     ·实验用猪肠道第14页
     ·培养基第14-15页
     ·试剂第15-16页
     ·仪器第16页
   ·方法第16-19页
     ·菌种分离第16-17页
     ·纯化保存第17页
     ·形态观察第17页
       ·菌落形态第17页
       ·革兰氏染色第17页
     ·菌种鉴定第17-19页
       ·大肠杆菌菌种鉴定第17-18页
       ·乳酸杆菌菌种鉴定第18-19页
 2 结果与讨论第19-24页
   ·结果第19-24页
     ·菌落形态观察第19-20页
     ·革兰氏染色和镜检第20页
     ·生理生化测试结果第20-24页
   ·讨论第24页
第三部分 野生大肠杆菌与工程菌表达性能的比较研究第24-34页
 1 材料与方法第24-29页
   ·材料第24-25页
     ·质粒载体第24页
     ·菌种第24页
     ·诱导物第24-25页
     ·试剂第25页
     ·培养基第25页
     ·仪器第25页
   ·方法第25-29页
     ·转化第25-27页
     ·YS-PUC18-GFP 和BL21-PUC18-GFP 表达对比第27页
       ·YS-PUC18-GFP 和BL21-PUC18-GFP 生长情况第27页
       ·目测表达量第27页
     ·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 表达对比第27-29页
       ·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 生长情况第27-29页
       ·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和 YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 在各类培养基中表达情况第29页
 2 结果与讨论第29-34页
   ·质粒提取结果第30页
   ·转化鉴定第30页
   ·YS-PUC18-GFP 和BL21-PUC18-GFP 的表达量对比第30-31页
     ·YS-PUC18-GFP 和BL21-PUC18-GFP 的生长对比第30-31页
     ·目测表达量第31页
   ·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 的表达对比第31-34页
     ·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 的生长情况第31-32页
     ·菌落PCR 筛选结果第32-33页
     ·BL21-PT002-ManI/ PUC-Kil 和 YS-PT002-ManI/ PUC-Kil 在各类培养基中表达情况第33-34页
第四部分 转基因大肠杆菌在猪肠道中的表达第34-41页
 1 材料与方法第34-39页
   ·材料第34-35页
     ·试剂第34页
     ·发酵用菌种第34页
     ·主要仪器第34页
     ·培养基第34页
     ·猪瘘管手术所需药品与器械第34-35页
     ·猪只及饲料配方第35页
   ·方法第35-39页
     ·猪十二指肠和回肠瘘第35页
     ·10L 发酵罐培养第35-37页
     ·微胶囊化第37页
     ·灌注与采样第37-38页
       ·制备灌注液第37-38页
       ·灌注第38页
       ·采样第38页
     ·检测第38-39页
       ·样品前处理第38页
       ·菌落PCR第38页
       ·ELISA 双抗夹心法检测转β-甘露聚糖酶大肠杆菌的表达产物第38-39页
 2 结果与讨论第39-41页
   ·猪瘘管第39页
   ·10L 发酵罐培养第39-40页
   ·菌落PCR 结果第40页
   ·ELISA 双抗夹心法检测第40-41页
第五部分 结束语第41-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-49页
作者简介第49页

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