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粘虫类钙粘蛋白基因的克隆、表达及功能鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 绪论第12-21页
   ·Bt 抗虫基因的研究进第12-14页
     ·Bt 杀虫晶体蛋白的作用机理第12-13页
     ·Bt 在害虫防治中的应用第13-14页
   ·Bt 杀虫蛋白的受体类钙粘蛋白研究进展第14-19页
     ·类钙粘蛋白的结构特征第15-16页
     ·类钙粘蛋白的分布与定位第16页
     ·类钙粘蛋白与 Bt Cry 类杀虫蛋白的结合特性第16-17页
     ·类钙粘蛋白与 Bt 杀虫蛋白抗性的关系第17-18页
     ·昆虫类钙粘蛋白片段在害虫防治上的应用价值第18-19页
   ·研究目的和意义第19-21页
     ·研究目的第19-20页
     ·研究意义第20-21页
第二章 材料与方法第21-41页
   ·供试虫源及饲养方法第21页
   ·实验试剂及仪器第21页
   ·粘虫类钙粘蛋白基因 cDNA 全长的克隆第21-33页
     ·提取总 RNA 与合成 cDNA 第一链第22-23页
     ·粘虫类钙粘蛋白基因片段的克隆第23-28页
     ·粘虫类钙粘蛋白基因的 3′RACE 克隆第28-29页
     ·粘虫类钙粘蛋白基因的 5′RACE 克隆第29-33页
   ·粘虫类钙粘蛋白基因的定量表达第33-36页
     ·实验技术路线的设计第33页
     ·试虫处理第33页
     ·总 RNA 提取第33-34页
     ·cDNA 第一链的合成第34页
     ·定量片段的确认第34页
     ·标准曲线的制作第34-35页
     ·粘虫幼虫体内类钙粘蛋白基因表达量的检测第35页
     ·数据处理第35-36页
   ·粘虫类钙粘蛋白基因的 RNAi第36-40页
     ·dsRNA 的设计第36-37页
     ·dsRNA 的制备第37-39页
     ·试虫处理及实验方法第39页
     ·RNAi 效应的检测方法第39-40页
   ·粘虫类钙粘蛋白基因沉默后取食 Cry1Ab 的生物学测定第40-41页
第三章 结果与分析第41-62页
   ·粘虫类钙粘蛋白基因克隆和序列分析第41-50页
     ·粘虫类钙粘蛋白基因的克隆第41-44页
     ·粘虫类钙粘蛋白基因序列分析第44-50页
     ·粘虫钙粘蛋白的同源性分析第50页
   ·粘虫类钙粘蛋白基因的实时荧光定量 PCR第50-58页
     ·定量 PCR 特异性引物的筛选第50-52页
     ·基因组 DNA 的去除第52-53页
     ·基因定量片段的确认第53-54页
     ·标准曲线的制备第54-56页
     ·粘虫幼虫不同龄期类钙粘蛋白基因表达量的差异第56-57页
     ·粘虫幼虫不同组织中类钙粘蛋白基因表达量的差异第57-58页
   ·粘虫类钙粘蛋白基因的干扰效果第58-62页
     ·dsRNA 的制备第58-59页
     ·特异性 dsRNA 对粘虫类钙粘蛋白基因表达量的影响第59-60页
     ·Ms-CAD 表达量变化影响粘虫对 Cry1Ab 杀虫蛋白的敏感性第60-62页
第四章 结论与讨论第62-66页
   ·粘虫类钙粘蛋白基因克隆及分析第62-63页
   ·粘虫类钙粘蛋白基因的表达第63页
   ·粘虫类钙粘蛋白基因的 RNAi第63-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
作者简历第75页

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