中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
第一章 甘蓝型油菜 Cr3529正向消减文库中分部片段的序列分析 | 第9-25页 |
1. 材料和工具 | 第10页 |
1.1 消减文库及菌种 | 第10页 |
1.2 培养基 | 第10页 |
1.3 其他 | 第10页 |
2. 实验方法 | 第10-11页 |
2.1 菌种的活化 | 第10页 |
2.2 测序及测序结果的预处理 | 第10-11页 |
2.3 序列的BLASTn分析处理 | 第11页 |
2.4 序列的BLASTx分析 | 第11页 |
3. 结果和讨论 | 第11-22页 |
3.1 测序结果 | 第11-16页 |
3.2 序列分析结果及讨论 | 第16-21页 |
3.3 差异表达基因与幼叶黄化相关性的分析 | 第21-22页 |
4. 小结 | 第22-23页 |
5. 参考文献 | 第23-25页 |
第二章 甘蓝型油菜Cr3529中一个未知功能蛋白基因的cDNA克隆 | 第25-41页 |
1. 材料与方法 | 第25-31页 |
1.1 材料 | 第25-27页 |
1.2 实验方法 | 第27-31页 |
2. 结果与分析 | 第31-38页 |
2.1 叶片总RNA和mRNA的提取 | 第31-32页 |
2.2 BnCr17 cDNA5′-RACE | 第32页 |
2.3 RACE片段的克隆 | 第32页 |
2.4 cDNA全长克隆 | 第32-33页 |
2.5 全长BnCr17的序列分析 | 第33-37页 |
2.6 Northern blot结果分析 | 第37-38页 |
3. 讨论 | 第38-39页 |
4. 小结 | 第39页 |
5. 参考文献 | 第39-41页 |
第三章 文献综述 一种克隆基因全长cDNA的分子生物学方法——Rapid Amplification of cDNA Ends(RACE) | 第41-69页 |
1. RACE 技术简介 | 第42-47页 |
1.1 RACE技术产诞生的技术背景 | 第42-43页 |
1.2 RACE技术基本原理 | 第43-45页 |
1.3 RACE技术的优点 | 第45-47页 |
2. RACE技术的缺点及改进 | 第47-57页 |
2.1 克隆效率受反转录效率的限制 | 第48页 |
2.2 克隆效率受PCR反应效率的限制 | 第48-49页 |
2.3 PCR反应特异性差带来扩增背景 | 第49-50页 |
2.4 TdT酶加尾的局限性及改进方法 | 第50-57页 |
3. RACE技术的注意事项 | 第57-60页 |
3.1 3′RACE的注意事项 | 第58-59页 |
3.2 5′RACE的注意事项 | 第59-60页 |
4. RACE技术在其他方面的应用 | 第60-61页 |
4.1 用于构建cDNA文库 | 第60页 |
4.2 用于筛选cDNA文库 | 第60页 |
4.3 用于克隆已知片段的旁侧序列 | 第60-61页 |
4.4 用于定点删除序列 | 第61页 |
4.5 用于同源基因克隆 | 第61页 |
4.6 与生物信息学相结合 | 第61页 |
5. 小结 | 第61-63页 |
6. 参考文献 | 第63-69页 |
硕士期间发表论文情况 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
声明 | 第71页 |