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水稻WRKY89和WRKY52基因的分离与功能研究

致谢第1-10页
摘要第10-12页
Abstract第12-15页
第一部分 文献综述第15-44页
 第一章 植物转录因子功能研究方法与WRKY研究进展第16-44页
  前言第16-17页
  1 转录因子的结构与类型第17页
  2 研究转录因子功能的方法第17-29页
   ·转录因子功能域的研究方法.第19-23页
     ·DNA与蛋白的相互作用第19-22页
     凝胶电泳迁移分析第20页
     足迹技术第20-21页
     随机结合位点选择第21-22页
     ·转录调控区的确定第22页
     ·核定位信号区的鉴定第22-23页
   ·利用突变体和转基因的功能分析方法第23-29页
     ·基因功能缺失突变体第23-25页
     ·功能获得突变体第25-29页
  3 WRKY转录因子的结构与功能第29-42页
   ·WRKY的结构域第29-31页
   ·WRKY域与W盒第31-33页
   ·WRKY的其它结构域第33-34页
   ·WRKY基因的起源与进化第34-36页
   ·WRKY蛋白的功能第36-42页
     ·WRKY基因的表达模式第36-38页
     ·WRKY蛋白参与植物对病原的防御反应及其信号途径第38-40页
     ·WRKY蛋白参与植物发育与代谢过程第40-41页
     ·用功能获得和功能丧失突变体鉴定WRKY蛋白的功能第41页
     ·WRKY蛋白的目的基因第41-42页
  4 本项目的目的与意义第42-44页
第二部分 研究内容第44-127页
 前言第45-47页
 第二章 OsWRKY89基因的分离与功能研究第47-94页
  1 材料与方法第47-56页
   ·材料第47页
    生物材料第47页
    酶、化学试剂第47页
   ·方法第47-56页
     ·OsWRKY89 cDNA的分离第48-49页
     ·序列分析第49页
     ·OsWRKY89及其缺失突变体的原核表达第49-50页
     ·OsWRKY89及其缺失突变体与W盒元件的结合第50页
     ·酵母双杂交第50-51页
     ·OsWRKY89的亚细胞定位第51-52页
     ·OsWRKY89转录激活的分析和激活域的确定第52-53页
     ·Northern分析第53-54页
     水稻培养第53页
     水稻苗处理第53-54页
     RNA提取与Northern分析第54页
     ·OsWRKY89的水稻转化第54-55页
     ·OsWRKY89超表达植株的表型分析第55页
     ·OsWRKY89超表达植株抗UV-B分析第55-56页
  2 结果第56-63页
   ·OsWRKY89 cDNA的分离第56-57页
   ·OsWRKY89及其N端缺失突变体的原核表达第57-58页
   ·OsWRKY89与W盒结合第58页
   ·OsWRKY89的同源相互作用第58-59页
   ·OsWRKY89的核定位第59页
   ·OsWRKY89转录激活分析及其转录激活域的确定第59-60页
   ·OsWRKY89在水稻植株中的表达第60页
   ·OsWRKY89在激素处理、生物或非生物胁迫下的表达第60-61页
   ·OsWRKY89的水稻转化第61页
   ·OsWRKY89超表达水稻苗的表型观察第61-62页
   ·OsWRKY89超表达水稻苗抗UV-B分析第62页
   ·OsBBPI在OsWRKY89超表达植株中组成性表达第62-63页
  3 讨论第63-94页
   ·OsWRKY89是一个新的WRKY成员第63-64页
   ·N端亮氨酸拉链样结构增强OsWRKY89与W盒结合第64-66页
   ·C端酸性区负责OsWRKY89的转录激活第66-67页
   ·OsWRKY89受多种激素和胁迫诱导第67-68页
   ·OsWRKY89超表达植株抗UV-B可能与JA信号途径有关第68-94页
 第三章 OsWRKY52基因的分离与功能研究第94-127页
  1 材料与方法第94-98页
   ·材料第94页
    生物材料第94页
    酶、化学试剂第94页
   ·方法第94-98页
     ·OsWRKY52cDNA的分离第94页
     ·序列分析第94-95页
     ·OsWRKY52的原核表达第95页
     ·OsWRKY52与W盒元件的结合第95-96页
     ·OsWRKY52的亚细胞定位第96页
     ·OsWRKY52转录激活的分析和激活域的确定第96-97页
     ·RNA提取与Northern分析第97页
     ·OsWRKY52的水稻转化第97页
     ·OsWRKY52超表达植株抗冷试验第97-98页
  2 结果第98-103页
   ·OsWRKY52cDNA的分离第98-99页
   ·OsWRKY52与含W盒的DNA结合第99页
   ·OsWRKY52转录激活活性与转录激活结构域的分析第99-100页
   ·OsWRKY52的亚细胞定位第100页
   ·OsWRKY52在植株中的表达第100-101页
   ·光照对OsWRKY52表达的影响第101页
   ·OsWRKY52在接种稻瘟菌后的表达第101页
   ·OsWRKY52在非生物胁迫和激素处理下的表达第101-102页
   ·OsWRKY52转基因苗的表型和抗冷分析第102-103页
  3 讨论第103-127页
   ·OsWRKY52是叶绿体或其它质体中的转录调节蛋白第103-105页
   ·OsWRKY52可能参与植物抗病防御反应第105-106页
   ·OsWRKY52对不同的非生物胁迫有应答第106-127页
全文小结第127-129页
发表论文第129-130页
参考文献第130-150页

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