致谢 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-44页 |
第一章 植物转录因子功能研究方法与WRKY研究进展 | 第16-44页 |
前言 | 第16-17页 |
1 转录因子的结构与类型 | 第17页 |
2 研究转录因子功能的方法 | 第17-29页 |
·转录因子功能域的研究方法. | 第19-23页 |
·DNA与蛋白的相互作用 | 第19-22页 |
凝胶电泳迁移分析 | 第20页 |
足迹技术 | 第20-21页 |
随机结合位点选择 | 第21-22页 |
·转录调控区的确定 | 第22页 |
·核定位信号区的鉴定 | 第22-23页 |
·利用突变体和转基因的功能分析方法 | 第23-29页 |
·基因功能缺失突变体 | 第23-25页 |
·功能获得突变体 | 第25-29页 |
3 WRKY转录因子的结构与功能 | 第29-42页 |
·WRKY的结构域 | 第29-31页 |
·WRKY域与W盒 | 第31-33页 |
·WRKY的其它结构域 | 第33-34页 |
·WRKY基因的起源与进化 | 第34-36页 |
·WRKY蛋白的功能 | 第36-42页 |
·WRKY基因的表达模式 | 第36-38页 |
·WRKY蛋白参与植物对病原的防御反应及其信号途径 | 第38-40页 |
·WRKY蛋白参与植物发育与代谢过程 | 第40-41页 |
·用功能获得和功能丧失突变体鉴定WRKY蛋白的功能 | 第41页 |
·WRKY蛋白的目的基因 | 第41-42页 |
4 本项目的目的与意义 | 第42-44页 |
第二部分 研究内容 | 第44-127页 |
前言 | 第45-47页 |
第二章 OsWRKY89基因的分离与功能研究 | 第47-94页 |
1 材料与方法 | 第47-56页 |
·材料 | 第47页 |
生物材料 | 第47页 |
酶、化学试剂 | 第47页 |
·方法 | 第47-56页 |
·OsWRKY89 cDNA的分离 | 第48-49页 |
·序列分析 | 第49页 |
·OsWRKY89及其缺失突变体的原核表达 | 第49-50页 |
·OsWRKY89及其缺失突变体与W盒元件的结合 | 第50页 |
·酵母双杂交 | 第50-51页 |
·OsWRKY89的亚细胞定位 | 第51-52页 |
·OsWRKY89转录激活的分析和激活域的确定 | 第52-53页 |
·Northern分析 | 第53-54页 |
水稻培养 | 第53页 |
水稻苗处理 | 第53-54页 |
RNA提取与Northern分析 | 第54页 |
·OsWRKY89的水稻转化 | 第54-55页 |
·OsWRKY89超表达植株的表型分析 | 第55页 |
·OsWRKY89超表达植株抗UV-B分析 | 第55-56页 |
2 结果 | 第56-63页 |
·OsWRKY89 cDNA的分离 | 第56-57页 |
·OsWRKY89及其N端缺失突变体的原核表达 | 第57-58页 |
·OsWRKY89与W盒结合 | 第58页 |
·OsWRKY89的同源相互作用 | 第58-59页 |
·OsWRKY89的核定位 | 第59页 |
·OsWRKY89转录激活分析及其转录激活域的确定 | 第59-60页 |
·OsWRKY89在水稻植株中的表达 | 第60页 |
·OsWRKY89在激素处理、生物或非生物胁迫下的表达 | 第60-61页 |
·OsWRKY89的水稻转化 | 第61页 |
·OsWRKY89超表达水稻苗的表型观察 | 第61-62页 |
·OsWRKY89超表达水稻苗抗UV-B分析 | 第62页 |
·OsBBPI在OsWRKY89超表达植株中组成性表达 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63-94页 |
·OsWRKY89是一个新的WRKY成员 | 第63-64页 |
·N端亮氨酸拉链样结构增强OsWRKY89与W盒结合 | 第64-66页 |
·C端酸性区负责OsWRKY89的转录激活 | 第66-67页 |
·OsWRKY89受多种激素和胁迫诱导 | 第67-68页 |
·OsWRKY89超表达植株抗UV-B可能与JA信号途径有关 | 第68-94页 |
第三章 OsWRKY52基因的分离与功能研究 | 第94-127页 |
1 材料与方法 | 第94-98页 |
·材料 | 第94页 |
生物材料 | 第94页 |
酶、化学试剂 | 第94页 |
·方法 | 第94-98页 |
·OsWRKY52cDNA的分离 | 第94页 |
·序列分析 | 第94-95页 |
·OsWRKY52的原核表达 | 第95页 |
·OsWRKY52与W盒元件的结合 | 第95-96页 |
·OsWRKY52的亚细胞定位 | 第96页 |
·OsWRKY52转录激活的分析和激活域的确定 | 第96-97页 |
·RNA提取与Northern分析 | 第97页 |
·OsWRKY52的水稻转化 | 第97页 |
·OsWRKY52超表达植株抗冷试验 | 第97-98页 |
2 结果 | 第98-103页 |
·OsWRKY52cDNA的分离 | 第98-99页 |
·OsWRKY52与含W盒的DNA结合 | 第99页 |
·OsWRKY52转录激活活性与转录激活结构域的分析 | 第99-100页 |
·OsWRKY52的亚细胞定位 | 第100页 |
·OsWRKY52在植株中的表达 | 第100-101页 |
·光照对OsWRKY52表达的影响 | 第101页 |
·OsWRKY52在接种稻瘟菌后的表达 | 第101页 |
·OsWRKY52在非生物胁迫和激素处理下的表达 | 第101-102页 |
·OsWRKY52转基因苗的表型和抗冷分析 | 第102-103页 |
3 讨论 | 第103-127页 |
·OsWRKY52是叶绿体或其它质体中的转录调节蛋白 | 第103-105页 |
·OsWRKY52可能参与植物抗病防御反应 | 第105-106页 |
·OsWRKY52对不同的非生物胁迫有应答 | 第106-127页 |
全文小结 | 第127-129页 |
发表论文 | 第129-130页 |
参考文献 | 第130-150页 |