| 摘 要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| ·抗菌肽的一般特征及抗菌机理 | 第9-11页 |
| ·抗菌肽一般特征 | 第9页 |
| ·抗菌肽抑(杀)菌模型 | 第9-11页 |
| ·抗菌肽对病毒、肿瘤及原核动物的抗性 | 第11页 |
| ·天蚕素的结构特征及抗菌活性 | 第11-12页 |
| ·天蚕素结构特征 | 第11-12页 |
| ·天蚕素主要生理活性及作用机理 | 第12页 |
| ·蛋白分子建模 | 第12-14页 |
| ·蛋白建模的概况与发展历史 | 第12-13页 |
| ·蛋白建模方法 | 第13页 |
| ·蛋白建模分析工具 | 第13-14页 |
| ·立题背景、意义 | 第14-16页 |
| ·蛋白建模/模拟的优越性 | 第14-15页 |
| ·抗菌肽建模/模拟的特点 | 第15页 |
| ·DNA重组技术表达生物活性肽的优势 | 第15-16页 |
| ·本课题的研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 抗菌肽的筛选及设计 | 第17-32页 |
| ·引言 | 第17-18页 |
| ·材料与方法 | 第18-19页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-19页 |
| ·天蚕素的收集 | 第18页 |
| ·保守序列的发现及多肽组合 | 第18页 |
| ·组合多肽的物理化学特性分析 | 第18-19页 |
| ·二级结构分析 | 第19页 |
| ·静电场分布分析 | 第19页 |
| ·跨膜预测 | 第19页 |
| ·抗菌模型的建立 | 第19页 |
| ·结果与分析 | 第19-29页 |
| ·天蚕素的收集 | 第19-22页 |
| ·保守序列发现及多肽组合 | 第22-26页 |
| ·组合多肽的物理化学特性分析 | 第26页 |
| ·二级结构分析 | 第26页 |
| ·静电场分布分析 | 第26-27页 |
| ·跨膜预测 | 第27页 |
| ·抗菌模型的建立 | 第27-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 抗菌肽基因的设计、PCR扩增及其在JM109中的克隆转化 | 第32-40页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·抗菌肽基因的的设计 | 第32-35页 |
| ·材料与方法 | 第32-33页 |
| ·设计工具 | 第32-33页 |
| ·表达肽的设计 | 第33页 |
| ·表达基因的设计 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-35页 |
| ·表达肽的设计 | 第33页 |
| ·表达基因的设计 | 第33-35页 |
| ·工程菌的构建 | 第35-38页 |
| ·材料与仪器 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| ·引物片段合成 | 第35-36页 |
| ·抗菌肽全基因的PCR合成 | 第36页 |
| ·质粒构建、转化 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-38页 |
| ·抗菌肽全基因的PCR合成 | 第37-38页 |
| ·质粒构建、转化 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第四章 基因工程菌的发酵及表达肽的提取、鉴定 | 第40-47页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·JM109_ Cec的发酵表达 | 第41页 |
| ·菌体破碎 | 第41页 |
| ·包涵体的洗涤 | 第41-42页 |
| ·包涵体的溶解 | 第42页 |
| ·表达肽的鉴定 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-45页 |
| ·JM109_ Cec的发酵表达 | 第42页 |
| ·菌体破碎 | 第42-43页 |
| ·包涵体的洗涤 | 第43页 |
| ·包涵体的溶解 | 第43-44页 |
| ·表达肽的鉴定 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45页 |
| ·本章小结 | 第45-47页 |
| 第五章 表达肽的活性研究 | 第47-53页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料与方法 | 第47-49页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·试验方法 | 第48-49页 |
| ·细菌的培养 | 第48页 |
| ·真菌的培养 | 第48页 |
| ·抗菌肽的制备 | 第48-49页 |
| ·表达肽的抗菌活性检测－抑菌圈法 | 第49页 |
| ·表达肽最小抑菌浓度的测定 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-51页 |
| ·表达肽对细菌的抗菌活性检测－抑菌圈法 | 第49-50页 |
| ·表达肽最小抑菌浓度的测定 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·本章小节 | 第52-53页 |
| 结 论 | 第53页 |
| 展 望 | 第53-54页 |
| 参 考 文 献 | 第54-59页 |
| 附录一 43种抗菌肽的28个特征变量统计表 | 第59-61页 |
| 附录二 5条互为模板引物的DNA片段 | 第61-62页 |
| 附录三 pUC19物理图谱 | 第62-63页 |
| 附录四 重组质粒pUC19_Cec DNA测序图 | 第63-65页 |
| 硕士期间发表论文清单 | 第65-66页 |
| 致 谢 | 第66页 |