| 研究论文 废水处理系统中功能菌株分子标记的获得及初步检测应用 | 第1-44页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 引言 | 第9-13页 |
| 第一章 废水处理功能菌的RAPD分析及SCAR标记的转化 | 第13-34页 |
| 1 材料与方法 | 第13-24页 |
| ·实验材料 | 第13页 |
| ·菌株与质粒 | 第13-14页 |
| ·主要药品与试剂 | 第14-15页 |
| ·培养基和溶液 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-24页 |
| ·基因组总DNA提取 | 第17-18页 |
| ·CTAB提取法 | 第17页 |
| ·树脂吸附快速提取法 | 第17-18页 |
| ·RAPD的PCR扩增 | 第18-19页 |
| ·RAPD扩增条件的优化 | 第18页 |
| ·RAPD扩增温度程序 | 第18页 |
| ·RAPD产物电泳与分析 | 第18-19页 |
| ·PCR大量扩增与电泳 | 第19页 |
| ·RAPD标记的克隆及其验证与测序 | 第19-23页 |
| ·目的PCR扩增产物的回收和纯化 | 第19-20页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20页 |
| ·目的产物与T-载体连接 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌高效转化 | 第21-22页 |
| ·质粒DNA小量提取 | 第22-23页 |
| ·限制性内切酶酶切与PCR方法鉴定重组子 | 第23页 |
| ·SEAR的PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·SCAR引物设计 | 第23页 |
| ·SCAR-PCR获得SCAR标记 | 第23-24页 |
| ·SCAR标记特异性验证 | 第24页 |
| 2 结果与讨论 | 第24-34页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·RAPD-PCR条件的优化 | 第25-26页 |
| ·Mg2+浓度和模板DNA浓度 | 第25-26页 |
| ·退火温度和PCR仪 | 第26页 |
| ·RAPD分析 | 第26-27页 |
| ·引物的筛选 | 第26-27页 |
| ·条带分析 | 第27页 |
| ·RAPD标记的克隆及其验证与测序 | 第27-30页 |
| ·目的片段的回收、纯化 | 第27-28页 |
| ·目的片段的克隆及重组子的PCR、限制性内切酶酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·序列分析 | 第29-30页 |
| ·SCAR分析 | 第30-34页 |
| ·SCAR引物设计及SCAR-PCR反应条件的优化 | 第30页 |
| ·SCAR标记分析 | 第30-31页 |
| ·SCAR标记特异性验证 | 第31-34页 |
| 第二章 从活性污泥中提取总DNA并用于PCR分析的研究 | 第34-39页 |
| 1 材料和方法 | 第34-36页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·活性污泥DNA提取 | 第35页 |
| ·DNA浓度测定和电泳检测 | 第35页 |
| ·DNA纯度检测 | 第35页 |
| ·整细胞的显微计数 | 第35-36页 |
| ·标记引物扩增 | 第36页 |
| 2 结果与讨论 | 第36-39页 |
| ·不同裂解方法的有效性评价对 | 第36-37页 |
| ·获得的活性污泥DNA质量评价 | 第37页 |
| ·标记引物扩增 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 文献综述 环境中微生物群落结构及动力学监测的分子生物学方法研究进展 | 第44-70页 |
| 1 核酸探针杂交技术 | 第44-47页 |
| ·技术原理 | 第44-45页 |
| ·研究应用 | 第45页 |
| ·荧光原位杂交技术 | 第45-46页 |
| ·优点和缺点 | 第46-47页 |
| 2 PCR技术 | 第47-54页 |
| ·定量PCR技术方法 | 第47-49页 |
| ·竞争PCR | 第47-48页 |
| ·荧光定量PCR(FQ PCR) | 第48-49页 |
| ·rDNA同源性分析方法 | 第49-52页 |
| ·技术原理 | 第49-50页 |
| ·研究应用 | 第50-51页 |
| ·rDNA同源性分析相关数据资源及方法 | 第51页 |
| ·相关的技术 | 第51-52页 |
| ·变性梯度胶电泳(DGGE)技术 | 第51-52页 |
| ·扩增的rDNA限制酶切分析技术(ARDRA) | 第52页 |
| ·RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA) | 第52-54页 |
| ·技术原理 | 第52-53页 |
| ·研究应用 | 第53页 |
| ·优缺点及其改进 | 第53-54页 |
| 3 免疫学方法 | 第54-56页 |
| ·技术原理 | 第54-55页 |
| ·研究应用 | 第55页 |
| ·荧光标记蛋白 | 第55-56页 |
| ·方法的优点与缺点 | 第56页 |
| 4 其他分析方法 | 第56-57页 |
| ·编码特定蛋白的基因 | 第56页 |
| ·降解特定物质的基因 | 第56-57页 |
| ·DNA熔解(解链)及复性分析 | 第57页 |
| 5 实践问题与展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-70页 |
| 在读硕士期间发表文章情况 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 声明 | 第72页 |
