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一个基于水稻T-DNA插入突变体库生成的农杆菌介导的一步转化系统的建立

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 前言及综述部分第8-34页
 1 农杆菌介导的植物基因转化的研究第9-17页
   ·农杆菌介导的基因转化机理的研究第9-12页
     ·与农杆菌转化相关的基因第9-10页
     ·Vir基因的诱导第10页
     ·T-DNA复合物的形成和跨膜运输第10-11页
     ·T-DNA在植物基因组中的整合第11-12页
   ·农杆菌介导的基因转化法在植物转基因中的应用第12页
   ·影响农杆菌转化的因素第12-17页
     ·转基因受体的影响第13-14页
     ·外源基因供体的影响第14-15页
     ·共培养条件的影响第15-16页
     ·植物培养基的影响和外植体培养条件的影响第16-17页
 2 水稻转基因技术的研究进展第17-20页
   ·直接转化法第17-19页
     ·基因枪转化法第17-18页
     ·花粉管通道法第18页
     ·电激法第18-19页
   ·农杆菌介导的水稻转化法第19-20页
     ·农杆菌介导的水稻转化系统的初步建立第19-20页
     ·农杆菌介导的水稻转化系统的优化第20页
 3 水稻功能基因组学的研究第20-32页
   ·水稻基因组序列的测定第21-25页
     ·水稻序列表达标签的测序第21-22页
     ·水稻全基因组序列的测定第22-25页
   ·水稻功能基因组学的研究第25-31页
     ·基因表达差异分析技术在水稻功能基因组研究中应用第25-26页
     ·系统基因敲除技术在水稻功能基因组研究中的应用第26-31页
   ·农杆菌介导的水稻转化法在功能基因组学研究中的应用第31-32页
 4 立题依据和意义第32-33页
 5 本实验的技术路线第33-34页
第二章 农杆菌介导的水稻一步转化方法的建立第34-47页
 1 材料与方法第34-42页
   ·材料第34-36页
     ·植物材料第34页
     ·菌株与质粒第34-35页
     ·培养基第35-36页
   ·方法第36-42页
     ·愈伤组织的诱导和继代第36页
     ·根癌农杆菌介导的水稻转化第36-37页
     ·抗性植株的再生第37页
     ·水稻总DNA的提取第37-38页
     ·转化植株的PCR分析第38-39页
     ·转基因植物的Southern分析第39-42页
 2 结果与分析第42-47页
   ·愈伤组织的诱导和继代第42页
   ·农杆菌介导的水稻转化植株的一步再生第42-44页
   ·转化植株的分子检测第44-47页
     ·PCR扩增第44-45页
     ·Southern blot检测第45-47页
第三章 基因捕捉系统检测第47-51页
 1 材料与方法第47页
   ·材料第47页
   ·GUS组织化学染色检测第47页
     ·试剂配制第47页
     ·染色方法第47页
 2 结果与分析第47-51页
第四章 激活标签在水稻突变体库构建中的可行性检测第51-58页
 1 材料与方法第51-55页
   ·材料第51-52页
     ·植物材料第51页
     ·菌株与质粒第51页
     ·试剂与仪器第51-52页
   ·方法第52-55页
     ·质粒DNA的大量提取第52-53页
     ·工程农杆菌的制备第53-54页
     ·转基因植株的获得第54页
     ·蛋白含量测定第54页
     ·GUS活性定量测定第54-55页
 2 结果与分析第55-58页
   ·质粒转化及工程农杆菌的鉴定第56页
   ·转基因植株的获得第56页
   ·GUS化学组织染色第56-57页
   ·GUS活性检测第57-58页
第五章 T-DNA插入突变的植株的获得第58-61页
第六章 结论与讨论第61-68页
 1 结论第61-62页
   ·农杆菌介导的一步转化方法的建立第61页
   ·对转基因植株的分子检测第61页
   ·基因捕捉的组织化学染色检测第61-62页
   ·激活标签的可行性检测第62页
   ·突变体植株的获得第62页
 2 讨论第62-68页
   ·水稻转化系统的建立第62-63页
   ·基因捕捉系统的检测第63-64页
   ·激活标签的可行性检测第64-65页
   ·突变体的性状分析第65-66页
   ·整个转化系统在水稻突变体库中的应用价值第66-67页
   ·实验的后继工作第67-68页
参考文献第68-76页
英文缩写词表第76-78页
致谢第78-79页

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