摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
第1章 MHC的研究进展 | 第15-42页 |
1 MHC的发现 | 第15-16页 |
2 MHC抗原的化学结构、组织分布 | 第16-22页 |
·MHC分子结构 | 第16-20页 |
·MHC Ⅰ类分子结构 | 第16-18页 |
·MHC Ⅱ类分子结构 | 第18-20页 |
·MHC分子的分布 | 第20-21页 |
·MHC Ⅰ类分子 | 第20页 |
·MHC Ⅱ类分子 | 第20-21页 |
·MHC分子的功能 | 第21-22页 |
3 MHC与免疫应答 | 第22-24页 |
·MHC在抗原递呈中的作用 | 第22-23页 |
·MHC Ⅰ类分子的抗原递呈 | 第22页 |
·MHC Ⅱ类分子的抗原递呈 | 第22-23页 |
·TCR识别抗原的基础 | 第23页 |
·MHC限制性 | 第23页 |
·TCR识别抗原的机制 | 第23页 |
·免疫应答 | 第23-24页 |
4 MHC基因结构及遗传特点 | 第24-29页 |
·MHC基因结构 | 第24-28页 |
·HLA基因结构 | 第24-26页 |
·SLA基因结构 | 第26-28页 |
·MHC的遗传特点 | 第28-29页 |
·单倍型遗传 | 第28页 |
·高度多态性 | 第28-29页 |
·连锁不平衡 | 第29页 |
5 MHC产物与基因的分型方法 | 第29-31页 |
·HLA血清学分型 | 第29页 |
·HLA细胞学分型 | 第29-30页 |
·分子学基因分型及有关分子生物学技术 | 第30-31页 |
·PCR-RFLP技术 | 第30页 |
·PCR-SSOP技术 | 第30页 |
·基因芯片或DNA微阵列技术 | 第30-31页 |
·PCR-SSCP技术 | 第31页 |
·PCR-SSP技术 | 第31页 |
·DNA序列测定及其它分型技术 | 第31页 |
6 MHC与性状间的关系 | 第31-38页 |
·HLA与疾病的关系 | 第31-33页 |
·SLA与猪的抗病性和经济性状 | 第33-38页 |
·SLA复合体与免疫应答和抗病性 | 第33-36页 |
·SLA复合体与繁殖性状 | 第36页 |
·SLA复合体与生长和胴体性状 | 第36-38页 |
7 MHC多态与遗传多样性评估 | 第38-41页 |
8 本研究的目的意义 | 第41-42页 |
第2章 15个猪品种MHC Ⅱ类区4个基因的序列测定及分析 | 第42-96页 |
1 前言 | 第42-43页 |
2 材料与方法 | 第43-50页 |
·材料 | 第43-45页 |
·DNA样品 | 第43页 |
·培养基、酶及试剂盒 | 第43-44页 |
·菌株和质粒 | 第44页 |
·主要试剂及配制 | 第44-45页 |
·主要试剂 | 第44-45页 |
·其它试剂的配制 | 第45页 |
·主要仪器设备 | 第45页 |
·主要分子生物学软件 | 第45页 |
·方法 | 第45-50页 |
·SLA-DQA和SLA-DRA基因2-3外显子片段的获得 | 第45-46页 |
·引物设计 | 第45-46页 |
·PCR扩增 | 第46页 |
·SLA-DQB和SLA-DRB基因第2外显子的PCR扩增 | 第46-47页 |
·PCR产物的纯化、克隆 | 第47-48页 |
·从低熔点琼脂糖凝胶中回收纯化PCR产物 | 第47页 |
·PCR产物与pGEM-T载体的连接 | 第47页 |
·感受态细胞的制备 | 第47-48页 |
·连接产物的转化 | 第48页 |
·质粒提取及酶切鉴定 | 第48页 |
·DNA序列测定 | 第48-49页 |
·DNA序列分析 | 第49-50页 |
·测序峰图的判读 | 第49-50页 |
·拆分杂合子 | 第50页 |
·核苷酸序列分析 | 第50页 |
·新等位基因分析 | 第50页 |
·品种内与品种间的遗传距离分析 | 第50页 |
3 结果 | 第50-92页 |
·SLA-DRA和SLA-DQA的PCR扩增结果 | 第50-51页 |
·DRA的PCR扩增结果 | 第50-51页 |
·DQA的PCR扩增结果 | 第51页 |
·SLA-DRA 2-3外显子和SLA-DQA 2-3外显子测序结果 | 第51-53页 |
·DRA 2-3外显子PCR产物测序结果 | 第51-52页 |
·DQA 2-3外显子克隆及测序结果 | 第52-53页 |
·DQA 2-3外显子重组质粒的酶切鉴定结果 | 第52页 |
·DQA 2-3外显子测序结果 | 第52-53页 |
·SLA-DRA和SLA-DQA基因结构分析 | 第53-56页 |
·DRA基因结构分析 | 第53-54页 |
·DQA基因结构分析 | 第54-56页 |
·SLA-DRA和SLA-DQA在4个全同胞家系中的扩增结果 | 第56-57页 |
·DRA在4个全同胞家系中的扩增结果 | 第56页 |
·DQA在4个全同胞家系中的扩增结果 | 第56-57页 |
·SLA-DRA和SLA-DQA在4个家系中的序列变异分析 | 第57-62页 |
·DRA基因第2外显子序列变异分析 | 第57-59页 |
·DRA基因第2外显子在4个家系中的序列变异分析 | 第57-58页 |
·DRA基因第2外显子氨基酸编码分析 | 第58-59页 |
·DQA基因第2外显子的序列变异分析 | 第59-62页 |
·SLA-DRB第2外显子的扩增与测序结果 | 第62-70页 |
·SLA-DQB第2外显子的扩增与测序结果 | 第70-77页 |
·SLA-DRA、DQA、DRB、DQB基因在15个品种中的变异及SNPs分析 | 第77-84页 |
·DRA第2外显子和第2内含子的变异及新等位基因分析 | 第77-78页 |
·DQA第2外显子和第2内含子的变异及新等位基因的发现 | 第78-80页 |
·DRB第2外显子的变异及新等位基因的发现 | 第80-82页 |
·DQB第2外显子的变异及新等位基因的发现 | 第82-84页 |
·利用SLA-DRA、DRB、DQA、DQB的序列信息分析中外15个猪品种间的亲缘关系 | 第84-92页 |
·利用DRA的核苷酸序列信息分析中外15个猪品种间的亲缘关系 | 第84-87页 |
·DRA第2外显子 | 第84-86页 |
·DRA第2内含子 | 第86-87页 |
·利用DQA的核苷酸序列信息分析中外15个猪品种间的亲缘关系 | 第87-89页 |
·利用DRB的核苷酸序列信息分析中外15个猪品种间的亲缘关系 | 第89-90页 |
·利用DQB的核苷酸序列信息分析中外15个猪品种间的亲缘关系 | 第90-92页 |
4 讨论 | 第92-96页 |
·SLA-DRA、DQA、DRB、DQB基因第2外显子的多态性 | 第92页 |
·SLA-DRA和SLA-DQA第2内含子的变异 | 第92-93页 |
·关于SLA-DRA、DQA、DRB、DQB序列的拆分 | 第93页 |
·关于SLA-DRA的两个新等位基因 | 第93-94页 |
·关于SLA-DQA、DRB、DQB的新等位基因 | 第94页 |
·关于利用SLA-DRA、DQA、DRB、DQB第2外显子和SLA-DRA第2内含子的信息分析中外15个猪品种的亲缘关系 | 第94-96页 |
第3章 SLA-DRB、DQB第2外显子的PCR-RFLP与免疫性状的关联研究 | 第96-113页 |
1 前言 | 第96-97页 |
2 材料和方法 | 第97-101页 |
·试验动物与试验材料 | 第97-99页 |
·试验动物及DNA样品 | 第97-98页 |
·仪器与试剂 | 第98-99页 |
·主要仪器设备 | 第98页 |
·主要试剂 | 第98页 |
·主要试剂配制 | 第98-99页 |
·方法 | 第99-101页 |
·免疫性状的测定方法 | 第99-100页 |
·血清中IgG的测定 | 第99-100页 |
·红、白细胞计数等6个指标的测定 | 第100页 |
·T-淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶测定 | 第100页 |
·迟发型皮肤超敏试验 | 第100页 |
·SLA-DRB和SLA-DQB的PCR-RFLP多态检测方法 | 第100-101页 |
·DRB、DQB的PCR扩增 | 第100页 |
·DRB、DQB的PCR-RFLP | 第100-101页 |
·DRB、DQB的PCR-RFLP检测 | 第101页 |
·基因的PCR-RFLP与性状的关联分析 | 第101页 |
3 结果与分析 | 第101-110页 |
·免疫性状测定结果 | 第101-103页 |
·SLA-DRB的PCR-RFLP检测结果 | 第103-105页 |
·DRB的MspⅠ和RsaⅠ的单倍型分析 | 第103-104页 |
·DRB的MspⅠ和RsaⅠ PCR-RFLP在通城猪、长大通和大长通猪中的检测结果 | 第104-105页 |
·SLA-DQB的PCR-RFLP检测结果 | 第105-108页 |
·DQB的RsaⅠ和HaeⅢ的酶切单倍型分析 | 第105-107页 |
·DQB的RsaⅠ和HaeⅢ PCR-RFLP在通城猪、长大通和大长通猪中的检测结果 | 第107-108页 |
·SLA-DRB和SLA-DQB基因的DNA多态性与免疫性状间的关系 | 第108-110页 |
4 讨论 | 第110-113页 |
·关于免疫学性状的选择 | 第110-111页 |
·关于免疫学性状测定时间的确定和试验动物的选择 | 第111-112页 |
·关于基因与性状间关联分析结果 | 第112-113页 |
小结 | 第113-115页 |
参考文献 | 第115-123页 |
致谢 | 第123页 |