| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-13页 |
| 研究内容 | 第13页 |
| 第一部分 Kluyveromyces cicerisporus CBS4857 营养缺陷型基因KcURA 和KcHIS3的克隆 | 第13-36页 |
| 摘要 | 第13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 材料方法 | 第14-21页 |
| 结果 | 第21-32页 |
| 一、K．cicerisporusCBS4857菌株基因文库构建 | 第21-23页 |
| 二、KcURA3基因克隆 | 第23-28页 |
| 三、 KcHIS3基因克隆 | 第28-32页 |
| 讨论 | 第32-35页 |
| 一、基因文库的构建 | 第32-33页 |
| 二、选择性标记基因的克隆 | 第33-35页 |
| 小结 | 第35-36页 |
| 第二部分 Kluyveromyces cicerisporus CBS4857转化系统构建 | 第36-65页 |
| 摘要 | 第36页 |
| 引言 | 第36-38页 |
| 材料方法 | 第38-43页 |
| 结果 | 第43-60页 |
| 一、 Y179ura3菌株筛选 | 第43-44页 |
| 二、 载体构建 | 第44-48页 |
| 三、 转化方法建立 | 第48-51页 |
| 四、转化子鉴定 | 第51-53页 |
| 五、 对Y179转化系统的完善－pUKD载体的优化 | 第53-57页 |
| 六、 以KcHIS3基因为选择性标记的宿主－载体系统构建 | 第57-60页 |
| 讨论 | 第60-64页 |
| 一、 转化方法 | 第60-62页 |
| 二、 载体 | 第62页 |
| 三、 营养缺陷型菌株构建 | 第62-64页 |
| 小结 | 第64-65页 |
| 第三部分 K．cicerisporus CBS4857表达系统构建及乙肝表面抗原融合基因和干扰素α2b基因的表达 | 第65-97页 |
| 摘要 | 第65页 |
| 引言 | 第65-67页 |
| 材料方法 | 第67-74页 |
| 结果 | 第74-91页 |
| 一、 菊粉酶基因启动子和终止子的扩增 | 第74-75页 |
| 二、 乙肝表面抗原融合基因表达 | 第75-81页 |
| 三、 干扰素α2b基因的分泌表达 | 第81-91页 |
| 讨论 | 第91-96页 |
| 一、K．cicerisporus表达系统中存在的问题及解决方案 | 第92-94页 |
| 二、K．cicerisporus表达系统优化工作 | 第94-96页 |
| 小结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-105页 |
| 综述：非常规酵母基因工程表达系统研究进展 | 第105-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
| 在校期间研究成果 | 第119-120页 |
