| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 前言 | 第11页 |
| 1 文献综述 | 第11-30页 |
| ·病毒的归类 | 第12-14页 |
| ·病毒的分类 | 第14-17页 |
| ·形态学分类 | 第15页 |
| ·血清型分类 | 第15-16页 |
| ·基因组型分类 | 第16-17页 |
| ·病毒的变异性 | 第17页 |
| ·病毒的培养 | 第17页 |
| ·病毒宿主 | 第17-18页 |
| ·病毒的流行性 | 第18-20页 |
| ·传染源与传播途径 | 第18-19页 |
| ·临床症状 | 第19-20页 |
| ·感染率 | 第20页 |
| ·诺如病毒的检测方法 | 第20-22页 |
| ·诺如病毒衣壳蛋白的体外表达技术 | 第22-23页 |
| ·论文的研究目的 | 第23-25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-30页 |
| 2 诺如病毒阳性样品的筛选与RNA 聚合酶基因片段的分析 | 第30-50页 |
| ·实验材料 | 第31-34页 |
| ·实验样品 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·主要溶液及培养基的配制 | 第32-33页 |
| ·主要设备 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-40页 |
| ·基础实验操作 | 第34页 |
| ·样品的前处理 | 第34页 |
| ·样品中RNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第35页 |
| ·RNA 聚合酶基因片段的PCR 扩增 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·重组质粒pT-NV_1的构建 | 第37-39页 |
| ·重组质粒pT-NV_1转化大肠杆菌DH5α | 第39页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第39页 |
| ·重组质粒的提取 | 第39页 |
| ·酶切检测 | 第39-40页 |
| ·测序 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-47页 |
| ·RNA 聚合酶基因片段的PCR 扩增产物 | 第40-41页 |
| ·PCR 产物的序列分析 | 第41-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 3 诺如病毒衣壳蛋白的原核表达与鉴定 | 第50-76页 |
| ·实验材料 | 第51-54页 |
| ·实验样品 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·主要溶液及培养基的配制 | 第52-54页 |
| ·实验方法 | 第54-62页 |
| ·基础实验操作 | 第54页 |
| ·引物的设计 | 第54-57页 |
| ·衣壳蛋白基因的PCR 扩增 | 第57-58页 |
| ·重组质粒pT-NV_2的构建 | 第58页 |
| ·重组质粒pT-NV_2转化大肠杆菌DH5α | 第58页 |
| ·酶切检测 | 第58-59页 |
| ·测序与序列分析 | 第59页 |
| ·重组质粒pQE30-NV_2的构建 | 第59-60页 |
| ·大肠杆菌M15 感受态细胞的制备 | 第60页 |
| ·重组质粒pQE30-NV_2转化大肠杆菌M15 | 第60页 |
| ·酶切检测 | 第60-61页 |
| ·NV 衣壳蛋白基因的诱导表达 | 第61页 |
| ·Ni-NTA 亲和层析对表达蛋白的纯化与验证 | 第61-62页 |
| ·不同pH 值洗脱液的SDS-PAGE 电泳对Ni-NTA 纯化效果的验证 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-71页 |
| ·NV 衣壳蛋白基因序列的扩增结果 | 第62-63页 |
| ·衣壳蛋白基因核苷酸序列的分析 | 第63-70页 |
| ·NV 衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 4 诺如病毒GII 型衣壳蛋白抗血清的制备与效价的ELISA 检测 | 第76-88页 |
| ·实验材料 | 第78-80页 |
| ·实验样品 | 第78-79页 |
| ·主要试剂 | 第79页 |
| ·主要溶液的配制 | 第79页 |
| ·实验用兔 | 第79-80页 |
| ·主要仪器 | 第80页 |
| ·实验方法 | 第80-83页 |
| ·基础实验操作 | 第80页 |
| ·免疫原的制备 | 第80页 |
| ·兔抗血清的制备 | 第80-81页 |
| ·抗体的检测 | 第81-83页 |
| ·实验结果 | 第83-85页 |
| ·包被蛋白与酶标二抗的最佳反应浓度的确定 | 第83-84页 |
| ·兔抗血清效价的ELISA 检测结果 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-88页 |
| 总结 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 发表的学术论文 | 第91页 |
