摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一部分 人类心脏发育候选基因ZNF382 | 第12-43页 |
第一章 心脏发育及其相关基因 | 第12-28页 |
·心脏发育过程 | 第12-13页 |
·调控果蝇心脏发育的基因 | 第13-15页 |
·tin基因的功能及表达 | 第13-14页 |
·wg及其相关的基因 | 第14-15页 |
·调控脊椎动物心脏发育的基因 | 第15-17页 |
·同源盒基因(homeoboxgenes) | 第15-16页 |
·Hand1和Hand2基因 | 第16页 |
·GATA基因 | 第16-17页 |
·MEF-2基因 | 第17页 |
·MYL2基因家族 | 第17-18页 |
·骨骼肌发育 | 第18-23页 |
·MyoD家族生肌调节因子 | 第18-19页 |
·肌肉增强子结合因子和生肌调节因子 | 第19-20页 |
·生肌调节因子与其它因子的相互作用 | 第20-21页 |
·生肌调节因子和肌肉增强子在成肌不同阶段的作用 | 第21-22页 |
·成肌细胞的最后分化 | 第22-23页 |
·小结 | 第23页 |
·Zinc Finger基因家族 | 第23-24页 |
·酵母双杂交技术 | 第24-28页 |
第二章 心脏发育候选基因ZNF382的功能研究 | 第28-41页 |
·材料和方法 | 第28-34页 |
·PCR获得ZNF382 cDNA全长 | 第28-29页 |
·载体构建 | 第29页 |
·酵母双杂交 | 第29-31页 |
·细胞的培养和转化 | 第31页 |
·SDS-PAGE | 第31-32页 |
·免疫印迹 | 第32页 |
·免疫共沉淀 | 第32-33页 |
·荧光报告基因分析 | 第33-34页 |
·亚细胞定位 | 第34页 |
·实验结果 | 第34-41页 |
·酵母双杂交筛选ZNF382相互作用蛋白 | 第34-35页 |
·MYL2的功能 | 第35-36页 |
·ZNF382蛋白与MYL2蛋白的相互作用研究 | 第36-38页 |
·ZNF382的初步功能研究 | 第38-39页 |
·荧光素酶报告基因分析 | 第39-41页 |
第三章 总结 | 第41-42页 |
第四章 讨论 | 第42-43页 |
第二部分 人类基因CXXC5的功能研究 | 第43-61页 |
第一章 前言 | 第43-45页 |
第二章 材料与方法 | 第45-49页 |
·获得CXXC5全长及生物信息学分析 | 第45页 |
·RNA提取和RT-PCR | 第45-46页 |
·质粒的构建 | 第46页 |
·RNAi的分析 | 第46-47页 |
·TUNEL法检测细胞凋亡 | 第47页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第47-48页 |
·caspase-8和caspase-3酶活性测定 | 第48页 |
·Western blot分析 | 第48-49页 |
第三章 结果 | 第49-60页 |
·分子特性和进化保护人类CXXC5 | 第49-50页 |
·CXXC5表达分布 | 第50-51页 |
·CXXC5蛋白的亚细胞定位 | 第51-52页 |
·CXXC5诱导细胞凋亡 | 第52-54页 |
·CXXC5激活TNF-a转录的活性 | 第54-59页 |
·CXXC5激活caspase-8和caspase-3的蛋白 | 第59-60页 |
第四章 讨论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
附录:中英文缩写词简表 | 第68-70页 |
致谢 | 第70-71页 |