| 提要 | 第1-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-42页 |
| ·植物脂肪酸 | 第12-13页 |
| ·脂肪酸的生物合成 | 第13-18页 |
| ·脂肪酸从头合成 | 第14-18页 |
| ·脂肪酸生物合成acyl-coA 的来源 | 第14-15页 |
| ·脂肪酸合成酶（FAS） | 第15-18页 |
| ·脂肪酸的修饰 | 第18页 |
| ·生物素和生物素酶 | 第18-20页 |
| ·乙酰辅酶A 羧化酶 | 第20-31页 |
| ·ACCase 的类型 | 第21-23页 |
| ·异质型ACCase | 第21页 |
| ·同质型ACCase | 第21-23页 |
| ·植物中的ACCase | 第23页 |
| ·ACCase 的结构 | 第23-28页 |
| ·生物素羧化酶（BC）的结构 | 第23-25页 |
| ·羧基转移酶（CT）的结构 | 第25-27页 |
| ·生物素载体蛋白（BCCP）的结构 | 第27-28页 |
| ·ACCase 的生物学功能 | 第28-31页 |
| ·ACCase 是脂肪酸合成的关键限速酶 | 第28-29页 |
| ·植物细胞中ACCase 的功能 | 第29-30页 |
| ·动物细胞中ACCase 的功能 | 第30-31页 |
| ·化学除草剂在农业中的应用 | 第31-33页 |
| ·化学除草剂的除草机理 | 第31-32页 |
| ·化学除草剂应用中存在的主要问题 | 第32-33页 |
| ·本研究意义及实验设计 | 第33-36页 |
| ·研究意义 | 第33-35页 |
| ·实验设计 | 第35-36页 |
| ·参考文献 | 第36-42页 |
| 第二章 除草剂对大麦和黄瓜叶片脂肪酸的影响 | 第42-69页 |
| ·前言 | 第42-43页 |
| ·实验设计 | 第43-44页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·大麦（Maris otter）和黄瓜(Restina) 的栽培 | 第45页 |
| ·除草剂水溶液的配制 | 第45-46页 |
| ·大麦叶片同位素标记实验 | 第46页 |
| ·黄瓜叶片同位素标记试验 | 第46-47页 |
| ·大麦，黄瓜叶片总脂类的提取与检测 | 第47页 |
| ·大麦，黄瓜叶片脂肪酸甲酯的提取与检测 | 第47-49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-67页 |
| ·同位素标记实验条件的优化 | 第49-50页 |
| ·不同有机溶剂对脂肪酸合成的影响 | 第49页 |
| ·不同有机溶剂,不同的孵育方法对脂肪酸合成的影响 | 第49-50页 |
| ·“K3”和“Z”类型除草剂对植物脂肪酸合成的影响 | 第50-63页 |
| ·[1-~(14)C] Acetate 标记实验 | 第51-58页 |
| ·[2-~(14)C] Malonate 标记实验 | 第58-63页 |
| ·Pinoxaden 对植物脂类的影响 | 第63-67页 |
| ·[1-~(14)C] Acetate 标记实验 | 第63-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| ·参考文献 | 第68-69页 |
| 第三章 酿酒酵母ACCASE CT 功能域基因克隆、表达以及性质研究 | 第69-117页 |
| ·CT 功能域基因克隆 | 第69-95页 |
| ·引言 | 第69-70页 |
| ·实验设计 | 第70-71页 |
| ·实验材料 | 第71-74页 |
| ·主要仪器 | 第71页 |
| ·主要试剂 | 第71-72页 |
| ·实验菌株 | 第72页 |
| ·实验用质粒 | 第72页 |
| ·溶液配制 | 第72-74页 |
| ·实验方法 | 第74-85页 |
| ·酵母总RNA 提取 | 第74-76页 |
| ·酵母的培养 | 第74-75页 |
| ·酵母菌株总RNA 提取 | 第75页 |
| ·酵母总RNA 鉴定 | 第75-76页 |
| ·酵母cDNA 文库的制备—逆转录反应 | 第76页 |
| ·目的基因的扩增 | 第76-77页 |
| ·重组质粒的构建 | 第77-81页 |
| ·BH28a 重组质粒转化大肠杆菌 | 第81-82页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第82页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第82-84页 |
| ·表达条件的优化 | 第84-85页 |
| ·表达菌株的优化 | 第84页 |
| ·最佳表达温度确定 | 第84页 |
| ·IPTG 诱导条件的优化 | 第84-85页 |
| ·结果与讨论 | 第85-94页 |
| ·酵母总RNA 的提取 | 第85-86页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第86-88页 |
| ·酵母ACCase CT 功能域基因的确定 | 第86-87页 |
| ·特异性引物扩增目的基因 | 第87-88页 |
| ·酵母ACCase CT 功能域基因重组质粒的构建 | 第88-90页 |
| ·表达载体 | 第90-91页 |
| ·重组质粒表达条件的优化 | 第91-94页 |
| ·表达菌株的选择 | 第91-94页 |
| ·小结 | 第94-95页 |
| ·包涵体的溶解与复性 | 第95-115页 |
| ·前言 | 第95-97页 |
| ·实验材料 | 第97-99页 |
| ·实验方法 | 第99-105页 |
| ·细胞破碎及蛋白提取 | 第99页 |
| ·包涵体的洗涤与溶解 | 第99-100页 |
| ·NI-亲合层析纯化 | 第100-101页 |
| ·Ni-亲合层析柱处理 | 第100-101页 |
| ·Ni-亲合层析纯化 | 第101页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第101页 |
| ·包涵体的复性 | 第101-105页 |
| ·稀释复性法 | 第102页 |
| ·透析复性法 | 第102页 |
| ·系统透析复性法 | 第102-103页 |
| ·活力测定 | 第103-104页 |
| ·复性蛋白的荧光光谱分析 | 第104-105页 |
| ·复性蛋白的圆二色谱分析 | 第105页 |
| ·结果与讨论 | 第105-114页 |
| ·包涵体的洗涤与溶解 | 第105-108页 |
| ·亲合层析纯化 | 第108-109页 |
| ·包涵体的复性 | 第109-110页 |
| ·不同复性方法酶活力的比较 | 第110-111页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第111-112页 |
| ·荧光光谱测定 | 第112-113页 |
| ·圆二色谱分析 | 第113-114页 |
| ·小结 | 第114-115页 |
| ·参考文献 | 第115-117页 |
| 全文总结 | 第117-120页 |
| 1. 已取得成果 | 第117-118页 |
| 2. 研究中存在的问题 | 第118页 |
| 3. 展望 | 第118-120页 |
| ·对Acetamides 的进一步研究 | 第118-119页 |
| ·ACCase CT 功能域模型的进一步优化 | 第119-120页 |
| 博士论文期间主要成果 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 中文摘要 | 第122-125页 |
| ABSTRACT | 第125-127页 |
