摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-13页 |
第一章 前言 | 第13-30页 |
·RSV 病毒和RSV 疫苗 | 第13-16页 |
·RSV 病毒 | 第13页 |
·RSV 疫苗的研制 | 第13-16页 |
·蛋白转导结构域 | 第16-20页 |
·蛋白转导结构域的跨膜转导机制 | 第17页 |
·蛋白转导结构域在抗原交叉提呈中的应用 | 第17-20页 |
·HIV-Tat | 第17-18页 |
·果蝇触足肽(Antp) | 第18-19页 |
·多聚阳离子氨基酸 | 第19页 |
·其他蛋白转导结构域 | 第19-20页 |
·蛋白转导结构域在抗原提呈中的作用机制 | 第20页 |
·热休克蛋白(HSPS) | 第20-22页 |
·HSPs 仅作为抗原的载体,而不是抗原的一部分 | 第20-21页 |
·HSPs 在抗原提呈和交叉提呈中的作用 | 第21-22页 |
·MHC Ⅰ型提呈中的胞浆HSPs | 第21-22页 |
·外源抗原交叉提呈中的HSPs | 第22页 |
·课题思路 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-30页 |
第二章 表达载体的构建及重组融合蛋白的表达纯化 | 第30-62页 |
·实验仪器与材料 | 第31-34页 |
·实验仪器 | 第31页 |
·菌株和质粒 | 第31页 |
·试剂 | 第31-32页 |
·引物 | 第32页 |
·主要溶液的配制 | 第32-34页 |
·实验方法 | 第34-43页 |
·pET-Javelin-G1F/M2 表达质粒的构建 | 第34-38页 |
·pET-TAT-G1F/M2 表达质粒的构建 | 第38-39页 |
·重组质粒的转化及融合蛋白的诱导表达 | 第39-40页 |
·Javelin-G1F/M2 诱导表达条件的初步优化 | 第40页 |
·Western-Blot 鉴定重组蛋白的抗原活性 | 第40-41页 |
·重组融合蛋白的大量表达 | 第41页 |
·菌体裂解及层析上样样品制备 | 第41-42页 |
·重组融合蛋白的亲和层析纯化 | 第42-43页 |
·Bradford 法测定蛋白浓度 | 第43页 |
·实验结果 | 第43-58页 |
·pET- Javelin-G1F/M2 表达载体的构建 | 第43-46页 |
·Javelin-G1F/M2 基因片段的PCR 扩增 | 第43-44页 |
·pET- Javelin-G1F/M2 表达载体构建 | 第44-45页 |
·重组质粒pET- Javelin-G1F/M2 的鉴定 | 第45-46页 |
·重组融合蛋白Javelin-G1F/M 的表达纯化 | 第46-52页 |
·Javelin -G1F/M 的诱导表达 | 第46-48页 |
·Javelin -G1F/M 诱导表达条件的优化 | 第48-51页 |
·Western 印迹分析 | 第51页 |
·Javelin -G1F/M 的亲和层析纯化 | 第51-52页 |
·pET-TAT-G1F/M2 表达载体的构建 | 第52-55页 |
·TAT-G1F/M2 基因片段的 PCR 扩增 | 第52-53页 |
·pET-TAT-G1F/M2 表达载体构建及鉴定 | 第53-55页 |
·重组融合蛋白TAT-G1F/M2 的表达纯化 | 第55-58页 |
·TAT-G1F/M2 的诱导表达 | 第55-57页 |
·Western 印迹分析 | 第57页 |
·TAT-G1F/M 的亲和层析纯化 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-62页 |
第三章 HSP:JAVELIN-G1F/M2 复合物的免疫原性和保护性研究 | 第62-84页 |
·实验仪器与材料 | 第63-65页 |
·实验仪器 | 第63页 |
·菌株、病毒和实验动物 | 第63页 |
·试剂 | 第63-64页 |
·主要溶液的配制 | 第64-65页 |
·实验方法 | 第65-70页 |
·Hep-2 细胞培养 | 第65页 |
·RSV 病毒培养 | 第65-66页 |
·RSV 病毒滴度测定 | 第66页 |
·HSP:Javelin-G1F/M2 复合物构建 | 第66-67页 |
·动物免疫 | 第67页 |
·动物样品采集 | 第67页 |
·抗体滴度ELISA 测定 | 第67-68页 |
·CTL 活性测定 | 第68-69页 |
·中和抗体测定 | 第69-70页 |
·肺组织切片 | 第70页 |
·实验结果 | 第70-80页 |
·讨论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-84页 |
第四章 重组融合蛋白 TAT-G1F/M2 的免疫原性和保护性研究 | 第84-97页 |
·实验仪器与材料 | 第85页 |
·实验方法 | 第85页 |
·动物免疫 | 第85页 |
·其他方法同第三章 | 第85页 |
·实验结果 | 第85-93页 |
·讨论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-97页 |
全文总结 | 第97-100页 |
1、主要研究工作和结果 | 第97-98页 |
2、研究工作的创新性 | 第98-99页 |
3、存在的问题和展望 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
个人简历 | 第101-102页 |