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呼吸道合胞病毒重组蛋白抗原免疫应答平衡调控研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-13页
第一章 前言第13-30页
   ·RSV 病毒和RSV 疫苗第13-16页
     ·RSV 病毒第13页
     ·RSV 疫苗的研制第13-16页
   ·蛋白转导结构域第16-20页
     ·蛋白转导结构域的跨膜转导机制第17页
     ·蛋白转导结构域在抗原交叉提呈中的应用第17-20页
       ·HIV-Tat第17-18页
       ·果蝇触足肽(Antp)第18-19页
       ·多聚阳离子氨基酸第19页
       ·其他蛋白转导结构域第19-20页
     ·蛋白转导结构域在抗原提呈中的作用机制第20页
   ·热休克蛋白(HSPS)第20-22页
     ·HSPs 仅作为抗原的载体,而不是抗原的一部分第20-21页
     ·HSPs 在抗原提呈和交叉提呈中的作用第21-22页
       ·MHC Ⅰ型提呈中的胞浆HSPs第21-22页
       ·外源抗原交叉提呈中的HSPs第22页
   ·课题思路第22-23页
 参考文献第23-30页
第二章 表达载体的构建及重组融合蛋白的表达纯化第30-62页
   ·实验仪器与材料第31-34页
     ·实验仪器第31页
     ·菌株和质粒第31页
     ·试剂第31-32页
     ·引物第32页
     ·主要溶液的配制第32-34页
   ·实验方法第34-43页
     ·pET-Javelin-G1F/M2 表达质粒的构建第34-38页
     ·pET-TAT-G1F/M2 表达质粒的构建第38-39页
     ·重组质粒的转化及融合蛋白的诱导表达第39-40页
     ·Javelin-G1F/M2 诱导表达条件的初步优化第40页
     ·Western-Blot 鉴定重组蛋白的抗原活性第40-41页
     ·重组融合蛋白的大量表达第41页
     ·菌体裂解及层析上样样品制备第41-42页
     ·重组融合蛋白的亲和层析纯化第42-43页
     ·Bradford 法测定蛋白浓度第43页
   ·实验结果第43-58页
     ·pET- Javelin-G1F/M2 表达载体的构建第43-46页
       ·Javelin-G1F/M2 基因片段的PCR 扩增第43-44页
       ·pET- Javelin-G1F/M2 表达载体构建第44-45页
       ·重组质粒pET- Javelin-G1F/M2 的鉴定第45-46页
     ·重组融合蛋白Javelin-G1F/M 的表达纯化第46-52页
       ·Javelin -G1F/M 的诱导表达第46-48页
       ·Javelin -G1F/M 诱导表达条件的优化第48-51页
       ·Western 印迹分析第51页
       ·Javelin -G1F/M 的亲和层析纯化第51-52页
     ·pET-TAT-G1F/M2 表达载体的构建第52-55页
       ·TAT-G1F/M2 基因片段的 PCR 扩增第52-53页
       ·pET-TAT-G1F/M2 表达载体构建及鉴定第53-55页
     ·重组融合蛋白TAT-G1F/M2 的表达纯化第55-58页
       ·TAT-G1F/M2 的诱导表达第55-57页
       ·Western 印迹分析第57页
       ·TAT-G1F/M 的亲和层析纯化第57-58页
   ·讨论第58-60页
 参考文献第60-62页
第三章 HSP:JAVELIN-G1F/M2 复合物的免疫原性和保护性研究第62-84页
   ·实验仪器与材料第63-65页
     ·实验仪器第63页
     ·菌株、病毒和实验动物第63页
     ·试剂第63-64页
     ·主要溶液的配制第64-65页
   ·实验方法第65-70页
     ·Hep-2 细胞培养第65页
     ·RSV 病毒培养第65-66页
     ·RSV 病毒滴度测定第66页
     ·HSP:Javelin-G1F/M2 复合物构建第66-67页
     ·动物免疫第67页
     ·动物样品采集第67页
     ·抗体滴度ELISA 测定第67-68页
     ·CTL 活性测定第68-69页
     ·中和抗体测定第69-70页
     ·肺组织切片第70页
   ·实验结果第70-80页
   ·讨论第80-81页
 参考文献第81-84页
第四章 重组融合蛋白 TAT-G1F/M2 的免疫原性和保护性研究第84-97页
   ·实验仪器与材料第85页
   ·实验方法第85页
     ·动物免疫第85页
     ·其他方法同第三章第85页
   ·实验结果第85-93页
   ·讨论第93-94页
 参考文献第94-97页
全文总结第97-100页
 1、主要研究工作和结果第97-98页
 2、研究工作的创新性第98-99页
 3、存在的问题和展望第99-100页
致谢第100-101页
个人简历第101-102页

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