| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-34页 |
| 第一章 转基因鸡的研究概况 | 第10-22页 |
| 1 转基因动物的培育方法 | 第10-11页 |
| 2 转基因动物的研究现状 | 第11-18页 |
| ·鸡胚的受精和早期发育 | 第11页 |
| ·供外源基因导入的靶细胞或组织 | 第11-14页 |
| ·转基因方法 | 第14-18页 |
| 3 转基因动物的应用 | 第18-21页 |
| 4 问题与展望 | 第21-22页 |
| 第二章 鸡输卵管生物反应器的研究进展 | 第22-30页 |
| 1 转基因家禽输卵管生物反应器的优势 | 第22-25页 |
| 2 鸡输卵管生物反应器的基本原理 | 第25-27页 |
| ·卵清蛋白基因结构 | 第25-26页 |
| ·卵清蛋白基因的表达调控 | 第26-27页 |
| 3 鸡输卵管上皮细胞体外培养 | 第27-28页 |
| ·鸡输卵管上皮细胞体外培养的研究历程 | 第27页 |
| ·鸡输卵管上皮细胞生物学特性及鉴定方法 | 第27-28页 |
| 4 输卵管生物反应器的载体构建 | 第28-30页 |
| ·通过输卵管细胞研究卵清蛋白调控区 | 第28页 |
| ·输卵管特异表达载体的构建 | 第28-30页 |
| 第三章 人组织型纤溶酶原激活剂的研究进展 | 第30-34页 |
| 1 t-PA的结构功能特点 | 第30-31页 |
| 2 t-PA的活性中心结构域 | 第31-34页 |
| 第二部分 实验研究 | 第34-60页 |
| 第四章 鸡卵清蛋白基因调控序列的克隆及序列分析 | 第34-41页 |
| 1 材料与方法 | 第34-36页 |
| ·菌种及试剂 | 第34页 |
| ·试验鸡 | 第34页 |
| ·鸡血液基因组DNA的制备 | 第34-35页 |
| ·PCR扩增 | 第35页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·PCR产物的克隆及序列分析 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-39页 |
| ·鸡卵清蛋白基因调控区的扩增 | 第36-37页 |
| ·序列分析 | 第37-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第五章 鸡输卵管特异表达载体的构建及其在鸡原代输卵管上皮细胞及3T3细胞的表达 | 第41-51页 |
| 1 材料与方法 | 第41-46页 |
| ·菌种及试剂 | 第41页 |
| ·输卵管特异表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·鸡输卵管上皮细胞的原代培养 | 第42-43页 |
| ·3T3细胞的培养 | 第43-45页 |
| ·细胞转染 | 第45-46页 |
| 2 结果 | 第46-48页 |
| ·鸡输卵管特异表达载体的构建与鉴定 | 第46页 |
| ·鸡输卵管上皮细胞的原代培养 | 第46-48页 |
| ·3T3细胞的生长情况 | 第48页 |
| ·pL-OV2.8t-PAGFP质粒在输卵管上皮细胞的瞬时表达 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| 第六章 表达人组织型纤溶酶原激活剂的鸡输卵管瞬时生物反应器的建立 | 第51-60页 |
| 1 材料与方法 | 第51-55页 |
| ·试剂与仪器 | 第51页 |
| ·实验动物 | 第51-52页 |
| ·质粒复合物的制备 | 第52页 |
| ·产蛋鸡的重组载体注射 | 第52页 |
| ·蛋白的初步纯化 | 第52页 |
| ·western blot | 第52-53页 |
| ·t-PA活性检测 | 第53页 |
| ·冰冻切片的制作 | 第53-55页 |
| 2 结果 | 第55-57页 |
| ·western blot检测 | 第55页 |
| ·t-PA活性的检测 | 第55-56页 |
| ·冰冻切片 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-60页 |
| 全文结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
