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拟南芥AT-hook蛋白的功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 绪论第12-23页
   ·AT-HOOK蛋白的研究进展第12-17页
   ·拟南芥的基本特性第17页
   ·拟南芥开花调控途径第17-20页
     ·光周期途径第18-19页
     ·春化途径第19页
     ·自主途径第19页
     ·赤霉素途径第19-20页
   ·拟南芥下胚轴生长的调控第20-21页
   ·本研究的研究内容和策略第21-23页
第二章 实验材料和方法第23-42页
   ·实验材料第23-24页
     ·植物材料第23页
     ·菌株及质粒第23页
     ·主要的分子生物学试剂和实验仪器第23-24页
   ·植物材料的种植和培养第24页
   ·实验方法第24-42页
     ·载体的构建第24-26页
     ·PCR产物的回收和连接反应第26页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第26页
     ·连接产物的转化第26页
     ·克隆鉴定、质粒提取和测序第26-27页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第27页
     ·农杆菌的转化及阳性克隆的鉴定第27页
     ·拟南芥的转化第27页
     ·DNA的提取第27-28页
     ·Trizol法提取RNA及纯化第28-29页
     ·cDNA第一链的合成第29页
     ·基因组和质粒PCR第29页
     ·半定量RT-PCR第29页
     ·实时荧光定量PCR第29-30页
     ·突变体的筛选与鉴定第30-31页
     ·转基因植株及突变体开花时间的表型分析第31页
     ·转基因植株及突变体下胚轴的表型分析第31页
     ·转基因植株根的表型分析第31页
     ·叶绿体的测定第31-32页
     ·化学组织染色第32页
     ·融合蛋白的表达纯化和抗体制备第32-33页
     ·SDS-PAGE电泳和蛋白杂交第33-36页
     ·植物总蛋白的提取第36-37页
     ·植物核蛋白的提取第37页
     ·蛋白的亚细胞定位第37-38页
     ·凝胶迁移滞后实验第38页
     ·本研究所应用的引物序列第38-42页
第三章 结果与分析第42-72页
   ·生物信息学分析第42-44页
     ·进化树分析第42-43页
     ·氨基酸的序列比对第43-44页
   ·突变体的筛选与鉴定第44-45页
   ·AT-HOOK蛋白对拟南芥开花时间的调控第45-52页
     ·AHL22基因过量表达植物的晚开花表型第46-48页
     ·AHL18基因过量表达延迟拟南芥开花第48页
     ·AHL27和AHL29基因过量表达延迟拟南芥的开花时间第48-50页
     ·突变体和RNAi植株的开花表型第50-52页
   ·AT-HOOK基因对下胚轴伸长的抑制第52-58页
     ·AHL22抑制下胚轴的伸长第52-53页
     ·AHL22过表达植株中光受体和下胚轴相关基因的表达第53-54页
     ·AHL18,AHL27和AHL29抑制下胚轴的伸长第54-56页
     ·双突变体和四突变体下胚轴的伸长第56-58页
   ·AHL22抑制主根的生长第58-61页
   ·AT-HOOK基因过表达对植株叶和花形态的影响第61-63页
   ·AT-HOOK基因的表达模式第63-67页
     ·利用生物信息学预测AT-hook基因在不同组织器官的表达模式第63-65页
     ·GUS组织化学染色及mRNA表达水平的检测第65-67页
       ·AHL22基因的GUS组织化学染色和mRNA表达水平的检测第65-66页
       ·AHL22在不同发育时期的表达模式第66-67页
       ·AHL27基因的启动子活性分析第67页
   ·AHL22和AHL27抗原抗体的制备第67-68页
   ·AT-HOOK蛋白的亚细胞定位第68-71页
     ·AHL22蛋白定位于细胞核第68-69页
     ·AHL27蛋白定位于细胞核第69-70页
     ·AHL18和AHL29蛋白定位于细胞核第70-71页
   ·AHL22和AHL27蛋白与富含AT碱基DNA序列的特异结合第71-72页
第四章 讨论第72-76页
   ·AHL18,AHL22,AHL27,AHL29是高度保守的AT-HOOK核定位蛋白第72页
   ·AT-HOOK基因的组织特异性表达决定它的功能第72-73页
   ·AT-HOOK蛋白对植物发育调控的功能多样性第73-74页
   ·AT-HOOK蛋白与目的基因的结合和调控作用第74-76页
第五章 全文结论第76-78页
   ·AHL18,AHL22,AHL27,AHL29四个蛋白有高度的序列相似性第76页
   ·AHL18,AHL22,AHL27,AHL29四个基因主要表达在根和花中第76页
   ·AHL18,AHL22,AHL27,AHL29四个蛋白为核定位蛋白第76页
   ·AHL18,AHL22,AHL27,AHL29调控拟南芥开花第76-77页
   ·AHL18,AHL22,AHL27,AHL29抑制下胚轴的伸长第77页
   ·AHL22抑制主根的生长第77-78页
参考文献第78-87页
致谢第87-88页
作者简历第88页

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