| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-28页 |
| ·犬瘟热的研究进展 | 第14-20页 |
| ·犬瘟热病原 | 第14页 |
| ·犬瘟热病毒的生物学特性 | 第14-15页 |
| ·犬瘟热病毒的分子生物学特性 | 第15-18页 |
| ·犬瘟热的流行及犬瘟热病毒变异的分子基础 | 第18-20页 |
| ·犬瘟热疫苗研究进展 | 第20-24页 |
| ·常规疫苗的研究进展 | 第20-21页 |
| ·新型疫苗的研究进展 | 第21-24页 |
| ·腺病毒载体的研究进展 | 第24-27页 |
| ·非依赖型腺病毒载体构建的理论基础及策略 | 第25-26页 |
| ·犬腺病毒2 型载体的优越性 | 第26-27页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-48页 |
| ·试验材料 | 第28-33页 |
| ·细胞、毒株、血清、抗体、载体和试验动物 | 第28-29页 |
| ·主要酶类及生化试剂 | 第29页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第29-31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31-33页 |
| ·试验方法 | 第33-48页 |
| ·CDV HLJ2-07 株的增殖 | 第33页 |
| ·TCID_(50) 的测定 | 第33页 |
| ·常规分子生物学操作技术 | 第33-37页 |
| ·H 基因的克隆及序列分析 | 第37-40页 |
| ·H 蛋白的真核表达及免疫原性分析 | 第40-43页 |
| ·表达H 基因的重组犬腺病毒2 型的构建及鉴定 | 第43-48页 |
| 3 试验结果 | 第48-70页 |
| ·CDV HLJ2-07 株病毒扩增结果 | 第48页 |
| ·TCID50 的测定 | 第48-49页 |
| ·H 基因的克隆及序列分析结果 | 第49-57页 |
| ·H 基因的RT-PCR 扩增、克隆及阳性质粒pMD18-H 的鉴定 | 第49-51页 |
| ·H 蛋白基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列 | 第51-52页 |
| ·H 蛋白基因遗传进化分析 | 第52-56页 |
| ·抗原表位差异性分析 | 第56-57页 |
| ·H 蛋白的表达及免疫原性分析 | 第57-62页 |
| ·重组真核表达载体pcDNA3.1-H 的构建 | 第57页 |
| ·重组真核表达载体pcDNA3.1-H 的酶切及PCR 鉴定 | 第57-59页 |
| ·重组真核表达载体pcDNA3.1-H DNA 的提取和纯化 | 第59页 |
| ·重组真核表达载体pcDNA3.1-H 在MDCK 细胞中的表达及检测 | 第59-61页 |
| ·重组真核表达载体pcDNA3.1-H 的动物免疫原性试验 | 第61-62页 |
| ·表达H 蛋白的重组犬腺病毒2 型的构建 | 第62-70页 |
| ·转移载体pUC-2△E3-H 的构建 | 第62-63页 |
| ·转移载体pUC-2△E3-H 的大量制备和纯化 | 第63-64页 |
| ·重组病毒rCAV-△E3-EGFP 筛选和纯化 | 第64-65页 |
| ·重组病毒rCAV-△E3-EGFP 的PCR 鉴定 | 第65-66页 |
| ·重组病毒rCAV-△E3-EGFP 的形态学鉴定 | 第66页 |
| ·重组病毒rCAV-△E3-EGFP 与亲代病毒CAV-2 的TCID_(50) 比较 | 第66页 |
| ·重组病毒rCAV-△E3-EGFP 生长特性 | 第66-67页 |
| ·重组病毒rCAV-△E3-EGFP 遗传稳定性 | 第67-68页 |
| ·重组病毒rCAV-2△E3-H 的筛选和纯化 | 第68-69页 |
| ·重组病毒rCAV-2△E3-H 的PCR 鉴定 | 第69页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-74页 |
| ·H 基因的核苷酸及推导的氨基酸序列分析 | 第70-71页 |
| ·H 基因的真核表达及表达载体的选择 | 第71页 |
| ·H 蛋白的免疫原性分析 | 第71-72页 |
| ·关于基因工程活载体疫苗及犬腺病毒2 型载体的选择 | 第72-74页 |
| 5 结论 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 附录 | 第84-86页 |
| 插图与附表清单 | 第84-86页 |
| 缩略词表 | 第86-88页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第88页 |
