| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 缩略语 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| 1 涡虫—发育生物学和再生生物学模式生物 | 第9-11页 |
| 2.涡虫的分子生物学研究 | 第11-17页 |
| ·涡虫与发育相关基因 | 第12-14页 |
| ·涡虫的Neoblast及再生相关基因 | 第14-17页 |
| 3.SPARC研究进展 | 第17-21页 |
| ·SPARC的发现 | 第17页 |
| ·SPARC的分子结构特征 | 第17-18页 |
| ·SPARC的功能 | 第18-20页 |
| ·SPARC的医疗应用 | 第20页 |
| ·展望 | 第20-21页 |
| 4.本论文的主要内容及技术路线 | 第21-23页 |
| 第二章 东亚三角涡虫DJSPARC-LIKE基因的克隆及生物信息学分析 | 第23-35页 |
| 1.前言 | 第23页 |
| 2.材料和方法 | 第23-28页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·东亚三角涡虫cDNA文库的构建与测序 | 第24-25页 |
| ·DjSparc-like与pcDNA3载体的连接 | 第25-28页 |
| ·序列比较与系统进化分析 | 第28页 |
| 3.结果 | 第28-34页 |
| ·DjSparc-like与pcDNA3载体的连接 | 第28-29页 |
| ·东亚三角涡虫DjSparc-like基因的序列分析 | 第29-33页 |
| ·东亚三角涡虫DJSparc-like基因的进化树分析 | 第33-34页 |
| 4.讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 涡虫DJSPARC-LIKE基因的克隆及表达分析 | 第35-48页 |
| 1.前言 | 第35页 |
| 2.材料和方法 | 第35-43页 |
| ·材料 | 第35-37页 |
| ·实验方法 | 第37-43页 |
| ·Northern杂交 | 第37-41页 |
| ·涡虫DjSparc-like基因的整体原位杂交 | 第41-43页 |
| 3.结果 | 第43-47页 |
| ·涡虫DjSparc-like基因Northern杂交 | 第43-46页 |
| ·整体原位杂交技术检测DjSparc-like基因在涡虫不同发育时期的时空表达 | 第46-47页 |
| 4.讨论 | 第47-48页 |
| 第四章 涡虫DJSPARC-LIKE基因再生中的表达及实时定量分析 | 第48-55页 |
| 1.前言 | 第48页 |
| 2.材料和方法 | 第48-50页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-50页 |
| ·RNA探针的合成和标记效率检测 | 第49页 |
| ·再生涡虫中DjSparc-like基因的整体原位杂交 | 第49页 |
| ·相对定量检测再生不同时期涡虫DjSparc-like基因表达 | 第49-50页 |
| 3.结果 | 第50-53页 |
| ·整体原位杂交技术检测DjSparc-like基因在涡虫不同再生阶段的时空表达 | 第51页 |
| ·相对定量检测DjSparc-like基因在涡虫不同再生阶段的表达 | 第51-53页 |
| 4.讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 涡虫DJSPARC-LIKE基因再生中的干扰及实时定量分析 | 第55-65页 |
| 1.前言 | 第55页 |
| 2.材料和方法 | 第55-60页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-60页 |
| ·干扰载体的构建 | 第56-59页 |
| ·含L4440-Sparc的干扰载体的大肠杆菌L4440(DE3)中的诱导表达 | 第59页 |
| ·含有DjSparc-like基因的dSRNA对切割后涡虫再生的影响 | 第59页 |
| ·相对定量检测再生过程中干扰不同时期涡虫DjSparc-like基因表达 | 第59-60页 |
| 3.结果 | 第60-63页 |
| ·L4440-Sparc干扰载体的构建 | 第60-61页 |
| ·相对定量检测DjSparc-like基因干扰后在涡虫不同再生阶段的表达 | 第61-62页 |
| ·重组质粒L4440-Sparc在大肠杆菌中的表达以及喂食涡虫 | 第62-63页 |
| 4.讨论 | 第63-65页 |
| 总结与展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-77页 |
