摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
前言 | 第11-22页 |
1.1 农杆菌介导的遗传转化 | 第11-13页 |
1.1.1 农杆菌转化的方法 | 第11-12页 |
1.1.2 受体基因型和生长状态对转化的影响 | 第12-13页 |
1.1.3 农杆菌相关基因表达 | 第13页 |
1.2 大豆遗传转化研究 | 第13-16页 |
1.2.1 大豆遗传转化方法 | 第13-14页 |
1.2.2 菌株种类及生长状态对大豆遗传转化的影响 | 第14-15页 |
1.2.3 受体基因型和生长状态对转化影响 | 第15页 |
1.2.4 其他因素对大豆遗传转化的影响 | 第15-16页 |
1.3 景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(SBPas)研究进展 | 第16-21页 |
1.3.1 景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(SBPase)功能概述 | 第16-19页 |
1.3.2 SBPase的结构 | 第19-20页 |
1.3.3 SBPase的功能研究进展 | 第20-21页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
材料与方法 | 第22-34页 |
2.1 大豆农杆菌转化体系的优化 | 第22-23页 |
2.1.1 试验材料 | 第22页 |
2.1.2 试验培养基配制 | 第22页 |
2.1.3 大豆种子萌发 | 第22页 |
2.1.4 外植体制备与农杆菌侵染 | 第22-23页 |
2.1.5 共培养 | 第23页 |
2.1.6 丛生芽诱导及筛选 | 第23页 |
2.2 HN-ZMZ-1基因的克隆及植物表达载体的构建 | 第23-30页 |
2.2.1 试验材料 | 第23页 |
2.2.2 培养基配制 | 第23-24页 |
2.2.3 试验方法 | 第24-30页 |
2.3 农杆菌介导HN-ZMZ-1基因的大豆遗传转化 | 第30-34页 |
2.3.1 试验材料 | 第30页 |
2.3.2 培养基配制 | 第30页 |
2.3.3 大豆遗传转化 | 第30-31页 |
2.3.4 转基因植株叶片DNA提取及PCR检测 | 第31-32页 |
2.3.5 转基因植株叶片RNA提取及qPCR检测 | 第32-34页 |
结果与分析 | 第34-45页 |
3.1 大豆农杆菌转化体系的优化 | 第34-36页 |
3.1.1 农杆菌侵染方式的改变对农杆菌转化的影响 | 第34-35页 |
3.1.2 共培养光照时间对大豆子叶节抗性丛生芽的诱导 | 第35-36页 |
3.1.3 6-BA浓度对大豆子叶节抗性丛生芽的诱导 | 第36页 |
3.2 HN-ZMZ-1基因的克隆及植物表达载体的构建 | 第36-41页 |
3.2.1 大豆叶片RNA提取及cDNA检测 | 第36-37页 |
3.2.2 HN-ZMZ-1基因克隆 | 第37页 |
3.2.3 HN-ZMZ-1基因序列的生物学分析 | 第37-40页 |
3.2.4 表达载体pEarleyGate100-HN-ZMZ-1的构建 | 第40页 |
3.2.5 植物表达载体pEarleyGate100-HN-ZMZ-1转化农杆菌 | 第40-41页 |
3.3 转HN-ZMZ-1基因阳性植株的T0代获得 | 第41-45页 |
3.3.1 HN-ZMZ-1基因大豆遗传转化 | 第41-42页 |
3.3.2 T0代转HN-ZMZ-1基因阳性植株的鉴定 | 第42-45页 |
结论与讨论 | 第45-48页 |
4.1 结论 | 第45页 |
4.2 讨论 | 第45-48页 |
4.2.1 大豆遗传转化体系优化 | 第45-47页 |
4.2.2 HN-ZMZ-1基因的克隆及转基因分析 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
附录1 表-试验仪器及设备 | 第55-56页 |
附录2 表-试验药品 | 第56-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读硕士论文期间发表论文 | 第59-60页 |