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辣椒POD基因RNAi载体的构建及遗传转化研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第1章 综述第14-27页
   ·辣椒素的相关研究第14-18页
     ·辣椒素的化学结构、理化性质及分布第14-16页
     ·辣椒素的生物合成第16-17页
     ·辣椒素的降解和代谢第17页
     ·辣椒素生理作用及应用前景第17-18页
   ·RNA 干扰技术第18-22页
     ·RNAi 发现第18页
     ·RNAi 机制第18-20页
     ·RNAi 应用第20-22页
   ·农杆菌介导的辣椒遗传转化第22-24页
     ·遗传转化方法概述第22页
     ·农杆菌介导法第22-24页
   ·辣椒离体培养第24-25页
   ·本研究技术路线、目的与意义第25-27页
第2章 载体构建及农杆菌制备第27-70页
   ·实验材料及药品第27-30页
     ·植物材料第27页
     ·实验药品与试剂第27页
     ·菌株与载体第27-28页
     ·仪器第28页
     ·相关试剂配制第28-29页
     ·PCR 扩增相关引物第29页
     ·实验用抗生素配制第29页
     ·相关培养基配制第29-30页
   ·实验方法第30-51页
     ·CTAB 法提取番茄及辣椒基因组 DNA第30-31页
     ·辣椒总 RNA 提取及 cDNA 模板的制备第31-32页
     ·辣椒 POD 基因的 DNA 序列克隆第32-37页
     ·辣椒 POD 基因 cDNA 全长的克隆第37-39页
     ·构建 RNAi 载体的正义片段和反义片段的克隆第39-41页
     ·内含子片段的克隆第41-43页
     ·番茄特异性启动子 2A12 启动子的克隆第43-45页
     ·中间载体 p3301-2A12 的构建第45-46页
     ·中间载体 p3301-2A12-Kas 的构建第46-47页
     ·中间载体 p3301-2A12-Kas-Pod2 的构建第47-48页
     ·载体 p3301-2A12-Pod1-Kas-Pod2 的构建第48-50页
     ·载体转化农杆菌 EHA105第50-51页
   ·实验结果第51-68页
     ·辣椒 cDNA 模板的制备第51-52页
     ·POD 基因全长 DNA 序列的克隆第52-54页
     ·POD 全长 cDNA 序列克隆第54-58页
     ·正义片段克隆第58-59页
     ·反义片段克隆第59-60页
     ·内含子克隆第60-62页
     ·2A12 启动子克隆第62-63页
     ·中间载体 p3301-2A12 的鉴定第63-64页
     ·中间载体 p3301-2A12-Kas 的鉴定第64-65页
     ·中间载体 p3301-2A12-Kas-Pod2 的鉴定第65-66页
     ·载体 p3301-2A12-Pod1-Kas-Pod2 的鉴定第66-67页
     ·农杆菌阳性菌的鉴定第67-68页
   ·本章总结第68-70页
第3章 辣椒离体培养体系的优化第70-80页
   ·实验材料及药品第70-72页
     ·植物材料第70页
     ·实验药品第70-71页
     ·仪器设备第71页
     ·激素及生长因子溶液配制第71-72页
   ·实验方法第72-73页
     ·无菌苗的获得第72页
     ·不定芽的诱导分化第72-73页
     ·不定芽的伸长第73页
     ·再生苗的生根与移栽第73页
   ·实验结果第73-78页
     ·播种培养基的优化第73-74页
     ·苗龄及外植体类型的优化第74-76页
     ·诱导分化培养基的优化第76-78页
   ·讨论第78-79页
     ·辣椒基因型第78页
     ·外植体第78页
     ·苗龄第78页
     ·培养基第78-79页
     ·培养条件第79页
   ·本章总结第79-80页
第4章 辣椒遗传转化体系的优化第80-88页
   ·材料及药品第80-81页
     ·植物材料第80页
     ·药品第80页
     ·菌体培养第80页
     ·仪器设备第80-81页
     ·试剂配制第81页
   ·实验方法第81-83页
     ·无菌苗的获得第81页
     ·预培养第81页
     ·菌体准备与侵染第81-82页
     ·农杆菌与外植体的共培养第82页
     ·外植体对 PPT 敏感度的确定第82页
     ·外植体的诱导筛选培养第82页
     ·不定芽的伸长培养第82页
     ·生根与移栽第82-83页
   ·实验结果第83-86页
     ·PPT 浓度的筛选第83-84页
     ·再生苗的生根与移栽第84-85页
     ·阳性植株的 PCR 鉴定第85-86页
   ·讨论第86-87页
     ·PPT 浓度的影响第86页
     ·AS 对转化效率的影响第86页
     ·遗传转化方法的影响第86-87页
     ·共培养时间对转化的影响第87页
   ·本章总结第87-88页
第5章 全文结论第88-89页
参考文献第89-98页
作者简介及科研成果第98-99页
致谢第99页

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