中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第1章 综述 | 第14-27页 |
·辣椒素的相关研究 | 第14-18页 |
·辣椒素的化学结构、理化性质及分布 | 第14-16页 |
·辣椒素的生物合成 | 第16-17页 |
·辣椒素的降解和代谢 | 第17页 |
·辣椒素生理作用及应用前景 | 第17-18页 |
·RNA 干扰技术 | 第18-22页 |
·RNAi 发现 | 第18页 |
·RNAi 机制 | 第18-20页 |
·RNAi 应用 | 第20-22页 |
·农杆菌介导的辣椒遗传转化 | 第22-24页 |
·遗传转化方法概述 | 第22页 |
·农杆菌介导法 | 第22-24页 |
·辣椒离体培养 | 第24-25页 |
·本研究技术路线、目的与意义 | 第25-27页 |
第2章 载体构建及农杆菌制备 | 第27-70页 |
·实验材料及药品 | 第27-30页 |
·植物材料 | 第27页 |
·实验药品与试剂 | 第27页 |
·菌株与载体 | 第27-28页 |
·仪器 | 第28页 |
·相关试剂配制 | 第28-29页 |
·PCR 扩增相关引物 | 第29页 |
·实验用抗生素配制 | 第29页 |
·相关培养基配制 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-51页 |
·CTAB 法提取番茄及辣椒基因组 DNA | 第30-31页 |
·辣椒总 RNA 提取及 cDNA 模板的制备 | 第31-32页 |
·辣椒 POD 基因的 DNA 序列克隆 | 第32-37页 |
·辣椒 POD 基因 cDNA 全长的克隆 | 第37-39页 |
·构建 RNAi 载体的正义片段和反义片段的克隆 | 第39-41页 |
·内含子片段的克隆 | 第41-43页 |
·番茄特异性启动子 2A12 启动子的克隆 | 第43-45页 |
·中间载体 p3301-2A12 的构建 | 第45-46页 |
·中间载体 p3301-2A12-Kas 的构建 | 第46-47页 |
·中间载体 p3301-2A12-Kas-Pod2 的构建 | 第47-48页 |
·载体 p3301-2A12-Pod1-Kas-Pod2 的构建 | 第48-50页 |
·载体转化农杆菌 EHA105 | 第50-51页 |
·实验结果 | 第51-68页 |
·辣椒 cDNA 模板的制备 | 第51-52页 |
·POD 基因全长 DNA 序列的克隆 | 第52-54页 |
·POD 全长 cDNA 序列克隆 | 第54-58页 |
·正义片段克隆 | 第58-59页 |
·反义片段克隆 | 第59-60页 |
·内含子克隆 | 第60-62页 |
·2A12 启动子克隆 | 第62-63页 |
·中间载体 p3301-2A12 的鉴定 | 第63-64页 |
·中间载体 p3301-2A12-Kas 的鉴定 | 第64-65页 |
·中间载体 p3301-2A12-Kas-Pod2 的鉴定 | 第65-66页 |
·载体 p3301-2A12-Pod1-Kas-Pod2 的鉴定 | 第66-67页 |
·农杆菌阳性菌的鉴定 | 第67-68页 |
·本章总结 | 第68-70页 |
第3章 辣椒离体培养体系的优化 | 第70-80页 |
·实验材料及药品 | 第70-72页 |
·植物材料 | 第70页 |
·实验药品 | 第70-71页 |
·仪器设备 | 第71页 |
·激素及生长因子溶液配制 | 第71-72页 |
·实验方法 | 第72-73页 |
·无菌苗的获得 | 第72页 |
·不定芽的诱导分化 | 第72-73页 |
·不定芽的伸长 | 第73页 |
·再生苗的生根与移栽 | 第73页 |
·实验结果 | 第73-78页 |
·播种培养基的优化 | 第73-74页 |
·苗龄及外植体类型的优化 | 第74-76页 |
·诱导分化培养基的优化 | 第76-78页 |
·讨论 | 第78-79页 |
·辣椒基因型 | 第78页 |
·外植体 | 第78页 |
·苗龄 | 第78页 |
·培养基 | 第78-79页 |
·培养条件 | 第79页 |
·本章总结 | 第79-80页 |
第4章 辣椒遗传转化体系的优化 | 第80-88页 |
·材料及药品 | 第80-81页 |
·植物材料 | 第80页 |
·药品 | 第80页 |
·菌体培养 | 第80页 |
·仪器设备 | 第80-81页 |
·试剂配制 | 第81页 |
·实验方法 | 第81-83页 |
·无菌苗的获得 | 第81页 |
·预培养 | 第81页 |
·菌体准备与侵染 | 第81-82页 |
·农杆菌与外植体的共培养 | 第82页 |
·外植体对 PPT 敏感度的确定 | 第82页 |
·外植体的诱导筛选培养 | 第82页 |
·不定芽的伸长培养 | 第82页 |
·生根与移栽 | 第82-83页 |
·实验结果 | 第83-86页 |
·PPT 浓度的筛选 | 第83-84页 |
·再生苗的生根与移栽 | 第84-85页 |
·阳性植株的 PCR 鉴定 | 第85-86页 |
·讨论 | 第86-87页 |
·PPT 浓度的影响 | 第86页 |
·AS 对转化效率的影响 | 第86页 |
·遗传转化方法的影响 | 第86-87页 |
·共培养时间对转化的影响 | 第87页 |
·本章总结 | 第87-88页 |
第5章 全文结论 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-98页 |
作者简介及科研成果 | 第98-99页 |
致谢 | 第99页 |