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广谱有机磷农药单克隆抗体的制备与鉴定

摘要第1-8页
Abstract第8-13页
第一章 绪论第13-17页
   ·研究目的意义第13-14页
   ·农药免疫检测原理第14页
   ·有机磷农药酶联免疫多残留研究进展第14-17页
第二章 有机磷农药通用人工抗原的制备及鉴定第17-28页
   ·材料与仪器第17-18页
     ·主要试剂第17页
     ·主要仪器第17-18页
     ·试验动物第18页
   ·方法第18-19页
     ·活化酯(NHS-DCC)法第18页
     ·碳化二亚胺(EDC)法第18-19页
     ·混合酸酐法(MAH)第19页
   ·人工抗原的鉴定第19页
     ·紫外分光光度法第19页
     ·NMR~(31)P 谱法第19页
   ·结果与分析第19-25页
     ·紫外分光光度法鉴定人工抗原第19-20页
     ·NMR 法鉴定人工抗原第20-24页
     ·抗体鉴定第24-25页
   ·讨论第25-28页
     ·载体蛋白的选择第25页
     ·经典方法合成农药人工抗原第25-26页
     ·人工抗原的鉴定第26-28页
第三章 乙氧基磷酸酯类有机磷农药单克隆细胞株的建立第28-39页
   ·材料与仪器第28-30页
     ·主要试剂第28-29页
     ·主要仪器设备第29-30页
     ·实验动物与细胞第30页
   ·方法第30-35页
     ·小鼠免疫第30页
     ·抗血清制备及检测第30-32页
     ·细胞融合与筛选第32-35页
   ·结果与讨论第35-39页
     ·免疫小鼠多抗血清检测结果第35-36页
     ·方阵滴定法确定抗原-抗体的最适工作浓度第36页
     ·细胞克隆的形成和单克隆抗体细胞株的筛选第36-37页
     ·细胞培养上清液间接ELISA 测定结果第37-39页
第四章 单克隆抗体的制备、纯化和鉴定第39-50页
   ·材料与仪器第39-40页
     ·主要材料与试剂第39页
     ·主要仪器第39-40页
   ·方法第40-44页
     ·腹水扩大培养第40页
     ·单克隆抗体的纯化第40-41页
     ·抗原与抗体最适工作浓度的筛选第41页
     ·单抗的特性鉴定第41-44页
       ·琼脂双扩散法鉴定亚类第41-42页
       ·抗体亲和力鉴定第42页
       ·二乙基磷酸乙酸的间接竞争ELISA 试验第42-43页
       ·纯化后的抗体对其它有机磷农药的交叉反应率第43-44页
   ·结果第44-49页
     ·腹水抗体免疫球蛋白类型、亚类、亲和常数测定第44页
     ·腹水抗体中蛋白含量测定第44页
     ·棋盘法筛选抗原-抗体的最佳工作浓度第44-45页
     ·二乙基磷酸乙酸间接竞争ELISA 实验第45-46页
     ·纯化后的抗体与其它有机磷农药的交叉反应率第46-49页
   ·讨论第49-50页
第五章 本文主要结论第50-51页
参考文献第51-55页
致谢第55-56页
作者简介第56页

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