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链孢粘帚霉HL-1-1寄生核盘菌菌核相关基因的分离鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 引言第13-23页
   ·核盘菌的研究进展第13-14页
     ·核盘菌的危害第13页
     ·核盘菌的生物学特性第13页
     ·核盘菌的致病因子第13-14页
     ·核盘菌的防治第14页
   ·菌寄生菌的主要作用机制第14-17页
     ·菌寄生作用第15页
     ·菌寄生过程中产生的细胞壁降解酶第15-16页
     ·产生抗生素第16页
     ·竞争作用第16-17页
   ·生物信息学概述第17-19页
     ·生物信息学简介第17-19页
     ·生物信息学的应用第19页
   ·实时荧光定量PCR技术在基因监测中的应用第19-20页
     ·实时荧光定量PCR的原理第19页
     ·实时荧光定量PCR的应用范围第19-20页
   ·RACE技术在克隆全长基因中的运用第20-21页
     ·RACE技术的原理第20-21页
     ·RACE技术的运用前景第21页
   ·本实验技术路线第21页
   ·本研究的目与意义第21-23页
第二章 链孢粘帚霉HL-1-1 寄生核盘菌差异表达EST分析第23-31页
   ·材料第23页
     ·文库来源第23页
     ·试剂第23页
     ·实验仪器第23页
   ·实验方法第23-24页
     ·ESTs的挑选第23页
     ·ESTs 序列的测定和聚类分析第23-24页
     ·ESTs序列的生物信息学分析第24页
   ·结果与分析第24-29页
     ·随机挑取克隆第24页
     ·ESTs 序列的测定和聚类分析第24-25页
     ·EST序列质量评价第25-26页
     ·单值基因(unigenes)比对分析第26页
     ·ESTs 序列的生物信息学分析第26-29页
   ·讨论第29-31页
第三章 差异表达基因的定量监测第31-39页
   ·材料第31-32页
     ·供试菌株第31页
     ·实验用到的仪器第31页
     ·主要试剂第31页
     ·培养基及主要试剂配方第31-32页
   ·实验方法第32-34页
     ·差异表达基因的诱导第32页
     ·RNA的提取方法第32-33页
     ·cDNA的反转录第33页
     ·荧光定量PCR引物设计及特异性分析第33-34页
     ·荧光定量监测基因表达量第34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·RNA质量分析第34-35页
     ·引物特异性分析第35页
     ·差异表达基因的定量监测第35-37页
   ·讨论第37-39页
第四章 脂滴包被蛋白基因cDNA全长克隆和序列分析第39-56页
   ·材料第39页
     ·供试材料与试剂第39页
     ·RACE特异性引物第39页
   ·实验方法第39-46页
     ·链孢粘帚霉HL-1-1 总RNA的提取第39页
     ·RACE实验方法第39-45页
     ·全长cDNA生物信息学分析第45-46页
   ·结果与分析第46-55页
     ·RNA质量分析第46-47页
     ·3’和5’RACE实验结果第47页
     ·cDNA拼接第47页
     ·全长cDNA生物信息学分析第47-55页
   ·讨论第55-56页
第五章 链孢粘帚霉HL-1-1 脂滴包被蛋白基因的功能研究第56-66页
   ·实验材料第56-57页
     ·菌株第56页
     ·实验仪器第56页
     ·试剂及培养基第56-57页
   ·实验方法第57-61页
     ·链孢粘帚霉HL-1-1 基因组DNA的提取第57-58页
     ·敲除质粒的构建第58-60页
     ·PEG-CaCl_2 介导的基因敲除第60-61页
   ·实验结果第61-65页
     ·链孢粘帚霉HL-1-1 脂滴包被蛋白基因敲除载体构建第61-63页
     ·基因敲除第63-65页
   ·讨论第65-66页
第六章 全文结论第66-67页
参考文献第67-73页
附录第73-76页
致谢第76-77页
作者简历第77页

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