摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 引言 | 第13-23页 |
·核盘菌的研究进展 | 第13-14页 |
·核盘菌的危害 | 第13页 |
·核盘菌的生物学特性 | 第13页 |
·核盘菌的致病因子 | 第13-14页 |
·核盘菌的防治 | 第14页 |
·菌寄生菌的主要作用机制 | 第14-17页 |
·菌寄生作用 | 第15页 |
·菌寄生过程中产生的细胞壁降解酶 | 第15-16页 |
·产生抗生素 | 第16页 |
·竞争作用 | 第16-17页 |
·生物信息学概述 | 第17-19页 |
·生物信息学简介 | 第17-19页 |
·生物信息学的应用 | 第19页 |
·实时荧光定量PCR技术在基因监测中的应用 | 第19-20页 |
·实时荧光定量PCR的原理 | 第19页 |
·实时荧光定量PCR的应用范围 | 第19-20页 |
·RACE技术在克隆全长基因中的运用 | 第20-21页 |
·RACE技术的原理 | 第20-21页 |
·RACE技术的运用前景 | 第21页 |
·本实验技术路线 | 第21页 |
·本研究的目与意义 | 第21-23页 |
第二章 链孢粘帚霉HL-1-1 寄生核盘菌差异表达EST分析 | 第23-31页 |
·材料 | 第23页 |
·文库来源 | 第23页 |
·试剂 | 第23页 |
·实验仪器 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-24页 |
·ESTs的挑选 | 第23页 |
·ESTs 序列的测定和聚类分析 | 第23-24页 |
·ESTs序列的生物信息学分析 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-29页 |
·随机挑取克隆 | 第24页 |
·ESTs 序列的测定和聚类分析 | 第24-25页 |
·EST序列质量评价 | 第25-26页 |
·单值基因(unigenes)比对分析 | 第26页 |
·ESTs 序列的生物信息学分析 | 第26-29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
第三章 差异表达基因的定量监测 | 第31-39页 |
·材料 | 第31-32页 |
·供试菌株 | 第31页 |
·实验用到的仪器 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31页 |
·培养基及主要试剂配方 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-34页 |
·差异表达基因的诱导 | 第32页 |
·RNA的提取方法 | 第32-33页 |
·cDNA的反转录 | 第33页 |
·荧光定量PCR引物设计及特异性分析 | 第33-34页 |
·荧光定量监测基因表达量 | 第34页 |
·结果与分析 | 第34-37页 |
·RNA质量分析 | 第34-35页 |
·引物特异性分析 | 第35页 |
·差异表达基因的定量监测 | 第35-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
第四章 脂滴包被蛋白基因cDNA全长克隆和序列分析 | 第39-56页 |
·材料 | 第39页 |
·供试材料与试剂 | 第39页 |
·RACE特异性引物 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-46页 |
·链孢粘帚霉HL-1-1 总RNA的提取 | 第39页 |
·RACE实验方法 | 第39-45页 |
·全长cDNA生物信息学分析 | 第45-46页 |
·结果与分析 | 第46-55页 |
·RNA质量分析 | 第46-47页 |
·3’和5’RACE实验结果 | 第47页 |
·cDNA拼接 | 第47页 |
·全长cDNA生物信息学分析 | 第47-55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
第五章 链孢粘帚霉HL-1-1 脂滴包被蛋白基因的功能研究 | 第56-66页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·菌株 | 第56页 |
·实验仪器 | 第56页 |
·试剂及培养基 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57-61页 |
·链孢粘帚霉HL-1-1 基因组DNA的提取 | 第57-58页 |
·敲除质粒的构建 | 第58-60页 |
·PEG-CaCl_2 介导的基因敲除 | 第60-61页 |
·实验结果 | 第61-65页 |
·链孢粘帚霉HL-1-1 脂滴包被蛋白基因敲除载体构建 | 第61-63页 |
·基因敲除 | 第63-65页 |
·讨论 | 第65-66页 |
第六章 全文结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
附录 | 第73-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
作者简历 | 第77页 |