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多器官功能障碍综合征小鼠脾脏耐受性树突状细胞及其负向免疫调节作用的研究

英文缩略词表第1-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-14页
前言第14-17页
第一章 材料与方法第17-29页
 一、实验材料第17-19页
  1. 实验仪器设备第17-18页
  2. 试剂与药品第18-19页
 二、动物模型与分组第19-20页
  1. 实验动物第19页
  2. 动物模型复制第19-20页
  3. 实验分组第20页
 三、标本取材与处理第20页
 四、实验方法第20-28页
  1. 脾脏组织光镜观察第20页
  2. 脾脏组织免疫组化标记-foxp3、TGF-β第20-21页
  3. 脾脏组织免疫荧光标记-CD11c第21页
  4. 脾脏组织免疫荧光双标记第21页
  5. 脾脏组织PD-L1、PD-1的Real-timePCR检测第21-23页
  6. 脾脏组织匀浆、血清及细胞分泌的组织细胞因子的ELISA检测第23页
  7. 细胞凋亡的原位检测(TUNEL)第23-24页
  8. 小鼠脾脏树突状细胞的提取和功能检测方法第24-26页
  9. 小鼠脾脏T 淋巴细胞的分离及检测第26-28页
 五、统计学分析第28-29页
第二章 结果第29-67页
 一、酵母多糖致MODS 小鼠症状与体征第29页
 二、实验小鼠脾脏的病理变化第29-34页
  1. 脾脏组织病理学改变第29-30页
  2. 各实验组脾脏白髓面积第30页
  3. 各实验组脾脏树突状细胞(CD11c)免疫荧光标记第30-31页
  4. 脾脏组织内细胞凋亡的检测第31-32页
  5. 脾脏组织内TGF-β表达的变化第32-33页
  6. 脾脏表达PD-L1及受体PD-1的检测第33-34页
 三、脾脏DC 表面分子的表达及功能检测第34-41页
  1. 脾脏DCPD-L1、PD-1的免疫荧光双标记第34页
  2. DC表达PD-L1的流式细胞检测结果第34-36页
  3. DC表达PD-1的流式细胞检测结果第36-37页
  4. DC表达MHC-II(I-Ab)的流式细胞检测结果第37-38页
  5. DC表达MHC-II的免疫荧光标记CD11c(PE/)MHC-II(FITC)第38页
  6. DC表达CD86的流式细胞检测结果第38-39页
  7. DC表达PIR-B的流式细胞检测结果第39-40页
  8. DC表面分子的表达变化情况第40-41页
  9. DC表面CD86/PD-L1比值的变化第41页
 四、脾脏T 细胞增殖与亚群紊乱第41-50页
  1. CD4~+T细胞PD-L1的表达第41-42页
  2. CD8~~+T细胞PD-L1的表达第42-43页
  3. 脾脏CD4~+T细胞PD-1的表达第43-44页
  4. 脾脏CD8~+T细胞PD-1的表达第44-45页
  5. DC、CD4~+T、CD8~+T对PD-L1表达的比较第45-46页
  6. DC表达PD-L1与CD4~+T细胞表达PD-1的变化趋势比较第46页
  7. 脾脏CD4~+/CD8~+T比值的变化第46页
  8. 小鼠脾脏调节性T细胞(Treg)的变化第46-48页
  9. T细胞增殖活性第48-49页
  10. 小鼠淋巴细胞分泌IL-2的检测第49-50页
 五、MODS 小鼠脾脏DC 激活淋巴细胞免疫功能的检测第50-55页
  1. MODS小鼠脾脏DC对T细胞功能的影响第50-51页
  2. DC-T细胞培养液中IL-2的ELISA检测结果第51-52页
  3. MODS小鼠脾脏DC与T细胞液中IL-10的含量第52-53页
  4. MODS小鼠脾脏DC与T细胞混合培养液中IL-12p70的含量第53-54页
  5. MODS小鼠脾脏DC与T细胞混合培养液中IL-12p40的含量第54-55页
 六、DC 孵育液中IL-12、IL-10 的检测结果第55-58页
  1. 脾脏DC孵育液中IL-12p70的检测第55-56页
  2. 脾脏DC孵育液中IL-10检测第56-57页
  3. 脾脏DC孵育液中IL-12p40检测第57-58页
 七、脾脏组织匀浆IL-12 及IL-10 的变化第58-61页
  1. 脾脏组织匀浆IL-12p70的检测结果第58-59页
  2. 脾脏组织匀浆IL-10的变化第59-60页
  3. 脾脏组织匀浆IL-12p40的检测结果第60-61页
 八、外周血炎症因子及细胞因子的ELISA 检测第61-67页
  1. 小鼠血清炎症因子TNF-α的变化第61-62页
  2. 小鼠血清炎症因子IL-1β的变化第62-63页
  3. 血清晚期炎症因子HMGB1的变化第63-64页
  4. 小鼠血清IL-12p70的变化第64-65页
  5. 小鼠血清IL-10的ELISA检测结果第65-66页
  6. 小鼠血清IL-12p40的变化第66-67页
第三章 讨论第67-77页
 一、关于小鼠MODS 模型的复制与评价第67-68页
 二、MODS 脾脏DC 的耐受作用第68-73页
  1、MODS 晚期脾脏 DC 低表达 CD86 和 MHC-II 是 DC 免疫活性下降的表型特征第69-70页
  2、MODS晚期脾脏DC高表达PIR-B是耐受性DC的标志第70页
  3、MODS晚期脾脏DC 对PD-L1的高表达体现了DC的免疫耐受作用第70-73页
 三、耐受性DC 对机体免疫功能的负向免疫调节作用第73-75页
  1、耐受性DC分泌抑制性细胞因子影响机体免疫功能第73-74页
  2、耐受性DC活化PD-L1/PD-1通路抑制T淋巴细胞功能第74-75页
  3. DC高表达PD-L1诱导CD4~+CD25~+foxp3~+Treg转化第75页
 四、阻断PD-L1/PD-1 通路对机体免疫功能的调节作用第75-77页
第四章 结论第77-78页
参考文献第78-83页
论著1第83-90页
论著2第90-98页
综述第98-104页
个人简历第104-105页
致谢第105页

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