英文缩略词表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
前言 | 第14-17页 |
第一章 材料与方法 | 第17-29页 |
一、实验材料 | 第17-19页 |
1. 实验仪器设备 | 第17-18页 |
2. 试剂与药品 | 第18-19页 |
二、动物模型与分组 | 第19-20页 |
1. 实验动物 | 第19页 |
2. 动物模型复制 | 第19-20页 |
3. 实验分组 | 第20页 |
三、标本取材与处理 | 第20页 |
四、实验方法 | 第20-28页 |
1. 脾脏组织光镜观察 | 第20页 |
2. 脾脏组织免疫组化标记-foxp3、TGF-β | 第20-21页 |
3. 脾脏组织免疫荧光标记-CD11c | 第21页 |
4. 脾脏组织免疫荧光双标记 | 第21页 |
5. 脾脏组织PD-L1、PD-1的Real-timePCR检测 | 第21-23页 |
6. 脾脏组织匀浆、血清及细胞分泌的组织细胞因子的ELISA检测 | 第23页 |
7. 细胞凋亡的原位检测(TUNEL) | 第23-24页 |
8. 小鼠脾脏树突状细胞的提取和功能检测方法 | 第24-26页 |
9. 小鼠脾脏T 淋巴细胞的分离及检测 | 第26-28页 |
五、统计学分析 | 第28-29页 |
第二章 结果 | 第29-67页 |
一、酵母多糖致MODS 小鼠症状与体征 | 第29页 |
二、实验小鼠脾脏的病理变化 | 第29-34页 |
1. 脾脏组织病理学改变 | 第29-30页 |
2. 各实验组脾脏白髓面积 | 第30页 |
3. 各实验组脾脏树突状细胞(CD11c)免疫荧光标记 | 第30-31页 |
4. 脾脏组织内细胞凋亡的检测 | 第31-32页 |
5. 脾脏组织内TGF-β表达的变化 | 第32-33页 |
6. 脾脏表达PD-L1及受体PD-1的检测 | 第33-34页 |
三、脾脏DC 表面分子的表达及功能检测 | 第34-41页 |
1. 脾脏DCPD-L1、PD-1的免疫荧光双标记 | 第34页 |
2. DC表达PD-L1的流式细胞检测结果 | 第34-36页 |
3. DC表达PD-1的流式细胞检测结果 | 第36-37页 |
4. DC表达MHC-II(I-Ab)的流式细胞检测结果 | 第37-38页 |
5. DC表达MHC-II的免疫荧光标记CD11c(PE/)MHC-II(FITC) | 第38页 |
6. DC表达CD86的流式细胞检测结果 | 第38-39页 |
7. DC表达PIR-B的流式细胞检测结果 | 第39-40页 |
8. DC表面分子的表达变化情况 | 第40-41页 |
9. DC表面CD86/PD-L1比值的变化 | 第41页 |
四、脾脏T 细胞增殖与亚群紊乱 | 第41-50页 |
1. CD4~+T细胞PD-L1的表达 | 第41-42页 |
2. CD8~~+T细胞PD-L1的表达 | 第42-43页 |
3. 脾脏CD4~+T细胞PD-1的表达 | 第43-44页 |
4. 脾脏CD8~+T细胞PD-1的表达 | 第44-45页 |
5. DC、CD4~+T、CD8~+T对PD-L1表达的比较 | 第45-46页 |
6. DC表达PD-L1与CD4~+T细胞表达PD-1的变化趋势比较 | 第46页 |
7. 脾脏CD4~+/CD8~+T比值的变化 | 第46页 |
8. 小鼠脾脏调节性T细胞(Treg)的变化 | 第46-48页 |
9. T细胞增殖活性 | 第48-49页 |
10. 小鼠淋巴细胞分泌IL-2的检测 | 第49-50页 |
五、MODS 小鼠脾脏DC 激活淋巴细胞免疫功能的检测 | 第50-55页 |
1. MODS小鼠脾脏DC对T细胞功能的影响 | 第50-51页 |
2. DC-T细胞培养液中IL-2的ELISA检测结果 | 第51-52页 |
3. MODS小鼠脾脏DC与T细胞液中IL-10的含量 | 第52-53页 |
4. MODS小鼠脾脏DC与T细胞混合培养液中IL-12p70的含量 | 第53-54页 |
5. MODS小鼠脾脏DC与T细胞混合培养液中IL-12p40的含量 | 第54-55页 |
六、DC 孵育液中IL-12、IL-10 的检测结果 | 第55-58页 |
1. 脾脏DC孵育液中IL-12p70的检测 | 第55-56页 |
2. 脾脏DC孵育液中IL-10检测 | 第56-57页 |
3. 脾脏DC孵育液中IL-12p40检测 | 第57-58页 |
七、脾脏组织匀浆IL-12 及IL-10 的变化 | 第58-61页 |
1. 脾脏组织匀浆IL-12p70的检测结果 | 第58-59页 |
2. 脾脏组织匀浆IL-10的变化 | 第59-60页 |
3. 脾脏组织匀浆IL-12p40的检测结果 | 第60-61页 |
八、外周血炎症因子及细胞因子的ELISA 检测 | 第61-67页 |
1. 小鼠血清炎症因子TNF-α的变化 | 第61-62页 |
2. 小鼠血清炎症因子IL-1β的变化 | 第62-63页 |
3. 血清晚期炎症因子HMGB1的变化 | 第63-64页 |
4. 小鼠血清IL-12p70的变化 | 第64-65页 |
5. 小鼠血清IL-10的ELISA检测结果 | 第65-66页 |
6. 小鼠血清IL-12p40的变化 | 第66-67页 |
第三章 讨论 | 第67-77页 |
一、关于小鼠MODS 模型的复制与评价 | 第67-68页 |
二、MODS 脾脏DC 的耐受作用 | 第68-73页 |
1、MODS 晚期脾脏 DC 低表达 CD86 和 MHC-II 是 DC 免疫活性下降的表型特征 | 第69-70页 |
2、MODS晚期脾脏DC高表达PIR-B是耐受性DC的标志 | 第70页 |
3、MODS晚期脾脏DC 对PD-L1的高表达体现了DC的免疫耐受作用 | 第70-73页 |
三、耐受性DC 对机体免疫功能的负向免疫调节作用 | 第73-75页 |
1、耐受性DC分泌抑制性细胞因子影响机体免疫功能 | 第73-74页 |
2、耐受性DC活化PD-L1/PD-1通路抑制T淋巴细胞功能 | 第74-75页 |
3. DC高表达PD-L1诱导CD4~+CD25~+foxp3~+Treg转化 | 第75页 |
四、阻断PD-L1/PD-1 通路对机体免疫功能的调节作用 | 第75-77页 |
第四章 结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-83页 |
论著1 | 第83-90页 |
论著2 | 第90-98页 |
综述 | 第98-104页 |
个人简历 | 第104-105页 |
致谢 | 第105页 |