| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 英文缩写与中文对照 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-36页 |
| 一 胚胎干细胞研究概况 | 第12-23页 |
| ·胚胎干细胞的概念及研究进展 | 第12-15页 |
| ·胚胎干细胞的概念 | 第12页 |
| ·胚胎干细胞的研究进展 | 第12-15页 |
| ·哺乳动物胚胎干细胞的研究进展 | 第15-20页 |
| ·小鼠胚胎干细胞的研究进展 | 第16-18页 |
| ·山羊和绵羊胚胎干细胞的研究进展 | 第18-19页 |
| ·人类胚胎干细胞的研究进展 | 第19-20页 |
| ·胚胎干细胞的生物学特性 | 第20-23页 |
| ·ES 细胞的全能性和多能性 | 第20-22页 |
| ·ES 细胞的形态特征 | 第22页 |
| ·ES 细胞的可操作性 | 第22页 |
| ·ES 细胞具有种系传递功能 | 第22页 |
| ·ES 细胞的体外增殖 | 第22-23页 |
| ·ES 细胞多能性维持和自我更新的分子机制 | 第23页 |
| 二 胚胎干细胞系的建立 | 第23-31页 |
| ·胚胎干细胞原代分离和培养方法 | 第23-25页 |
| ·全胚培养法 | 第23页 |
| ·ICM 培养法 | 第23-24页 |
| ·原始生殖细胞培养法 | 第24-25页 |
| ·胚胎干细胞传代方法 | 第25-26页 |
| ·机械法 | 第25页 |
| ·酶消化法 | 第25页 |
| ·机械法与酶消化法相结合 | 第25-26页 |
| ·影响胚胎干细胞分离和培养的因素 | 第26-29页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·饲养层 | 第26-27页 |
| ·血清成分 | 第27-28页 |
| ·生长因子 | 第28页 |
| ·传代方法 | 第28-29页 |
| ·胚胎干细胞的鉴定 | 第29-31页 |
| ·形态学鉴定 | 第29页 |
| ·碱性磷酸酶活性（AKP） | 第29页 |
| ·胚胎阶段特异性表面抗原的检测 | 第29-30页 |
| ·全能性基因的检测 | 第30页 |
| ·核型分析 | 第30页 |
| ·体内分化实验 | 第30页 |
| ·体外分化实验 | 第30-31页 |
| ·嵌合体制备 | 第31页 |
| 三 胚胎干细胞应用前景及所面临的挑战 | 第31-36页 |
| ·胚胎干细胞的应用前景 | 第31-34页 |
| ·生产克隆动物 | 第31-32页 |
| ·生产转基因动物 | 第32页 |
| ·研究真核基因的表达和调控 | 第32-33页 |
| ·细胞、组织和器官的修复和移植治疗 | 第33页 |
| ·发育生物学研究的理想体外模型 | 第33页 |
| ·高效新型药的发现，筛选动物和人类疾病的模型 | 第33-34页 |
| ·胚胎干细胞研究所面临的挑战 | 第34-36页 |
| 实验部分 | 第36-66页 |
| 实验一 小鼠胚胎干细胞的分离与培养 | 第36-56页 |
| 前言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-43页 |
| ·实验材料 | 第36-40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-51页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞的生长形态 | 第43-44页 |
| ·两种冻存液冷冻MEF 的效果 | 第44-45页 |
| ·解冻后MEF 的生长情况 | 第45页 |
| ·小鼠胚胎的形态及囊胚贴壁情况 | 第45-47页 |
| ·不同因素对小鼠ES 细胞分离培养与传代的影响 | 第47-49页 |
| ·小鼠ES 细胞的鉴定结果 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-56页 |
| ·两种冻存液的冷冻效果比较 | 第51页 |
| ·不同发育阶段的小鼠胚胎对贴壁率及ICM 增殖率的影响 | 第51-52页 |
| ·血清含量对小鼠ICM、ESCs 分离与培养的影响 | 第52-54页 |
| ·生长因子对小鼠ICM、ESCs 分离与培养的影响 | 第54-55页 |
| ·传代方法对小鼠ESCs 分离与培养的影响 | 第55-56页 |
| 实验二 山羊胚胎干细胞的分离与培养 | 第56-66页 |
| 前言 | 第56页 |
| ·材料与方法 | 第56-59页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-63页 |
| ·山羊超排结果 | 第59页 |
| ·饲养层及生长因子对山羊ES 细胞分离与培养的影响 | 第59-61页 |
| ·山羊ES 细胞的鉴定结果 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-66页 |
| ·饲养层对山羊ES 细胞的影响 | 第63-64页 |
| ·生长因子对山羊ES 细胞的影响 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第76页 |
