| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 一、前言 | 第10-17页 |
| 1 治疗性疫苗 | 第10-12页 |
| 2 OX40L | 第12-13页 |
| 3 调节性T细胞 | 第13-15页 |
| 4 绿色荧光蛋白(GREEN FLUORESCENT PROTEIN,GFP) | 第15页 |
| 5 本课题的研究目的和意义 | 第15页 |
| 6 本课题的技术路线 | 第15-17页 |
| 二、实验材料与设备 | 第17-20页 |
| 1 主要仪器和设备 | 第17-18页 |
| 2 主要试剂和材料 | 第18-19页 |
| 3 本实验中所用主要试剂配制方法见附录Ⅰ | 第19-20页 |
| 三、实验方法与步骤 | 第20-31页 |
| 1 C57BL/6小鼠脾脏总RNA抽提及cDNA合成 | 第20-21页 |
| 2 小鼠OX40L基因的真核表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 3 小鼠OX40L重组质粒的真核表达 | 第22页 |
| 4 小鼠OX40L重组质粒真核表达产物活性测定 | 第22-24页 |
| 5 小鼠OX40L重组质粒体内表达分析 | 第24-25页 |
| 6 小鼠OX40L基因的真核表达载体的构建(PEGFP-C3-OX40L) | 第25-26页 |
| 7 重组质粒PEGFP-C3-OX40L的真核表达 | 第26-27页 |
| 8 稳定表达EGFP的B16细胞株的构建 | 第27页 |
| 9 稳定表达EGFP的B16细胞的生物学特性 | 第27-29页 |
| 10 B16/PEGFP-C3细胞株体内成瘤实验 | 第29-30页 |
| 11 小鼠OX40L重组质粒大规模制备 | 第30-31页 |
| 四、实验结果 | 第31-50页 |
| 1 小鼠OX40L基因片段的克隆与真核表达载体的构建 | 第31页 |
| 2 小鼠OX40L基因在B16F10细胞中的表达 | 第31-33页 |
| 3 小鼠OX40L重组质粒真核表达产物体外活性分析 | 第33-35页 |
| 4 小鼠OX40L重组质粒体内表达分析 | 第35-39页 |
| 5 重组绿色荧光蛋白表达载体PEGFP-C3-OX40L的构建与鉴定 | 第39页 |
| 6 荧光显微镜观察B16细胞中OX40L-EGFP的表达 | 第39-40页 |
| 7 稳定表达EGFP转基因细胞的构建与鉴定 | 第40-43页 |
| 8 稳定表达EGFP的B16细胞的生物学特性 | 第43-47页 |
| 9 B16/EGFP细胞成瘤性分析 | 第47-50页 |
| 五、讨论 | 第50-53页 |
| 六、结论 | 第53-54页 |
| REFERENCES(参考文献) | 第54-59页 |
| 附录Ⅰ 本实验中所用主要试剂配制方法 | 第59-61页 |
| 附录Ⅱ 英文缩略词 | 第61-62页 |
| 附录Ⅲ 在校期间发表及参与研究论文情况 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
