摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
目录 | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第8-13页 |
·肺癌的研究现状 | 第8-9页 |
·蛋白质组学及其在肺癌研究中的应用 | 第9-10页 |
·RNAi技术及其在肺癌研究中的应用 | 第10-11页 |
·氯离子通道蛋白研究背景 | 第11-13页 |
第二章 技术路线 | 第13-14页 |
第三章 材料与方法 | 第14-27页 |
·主要材料 | 第14-17页 |
·细胞系和临床组织样品 | 第14页 |
·主要试剂 | 第14-17页 |
·主要仪器 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-26页 |
·蛋白样品的裂解和提取 | 第17-18页 |
·Bradford法蛋白浓度测定 | 第18-19页 |
·Western blot检测过程 | 第19页 |
·RNA干扰 | 第19-20页 |
·qRT-PCR检测CLIC1 mRNA水平 | 第20-22页 |
·Western blot检测蛋白水平沉默效果 | 第22-23页 |
·细胞凋亡的检测 | 第23-24页 |
·细胞周期的检测 | 第24页 |
·WST-1测定细胞增殖抑制 | 第24-25页 |
·划痕实验(Scratch assay)和Transwell实验检测细胞的侵袭能力 | 第25-26页 |
·统计学处理 | 第26-27页 |
第四章 结果 | 第27-43页 |
·Bradford法测蛋白浓度 | 第27-28页 |
·CLIC1在细胞系和组织样品中Western blot验证结果 | 第28-29页 |
·RNAi结果 | 第29-32页 |
·流式细胞术测转染效率 | 第29页 |
·定量PCR结果 | 第29-31页 |
·CLIC1 RNAi挑选与条件优化 | 第31-32页 |
·细胞表型变化 | 第32-33页 |
·细胞凋亡的分析 | 第33-36页 |
·细胞周期与细胞凋亡的检测 | 第33-34页 |
·DAPI染色 | 第34-36页 |
·Caspase3 Western blot检测 | 第36页 |
·WST-1法检测CLIC1 siRNA对A549生长抑制效应 | 第36-37页 |
·迁徙实验 | 第37-40页 |
·细胞侵袭实验 | 第40-43页 |
第五章 讨论与结论 | 第43-50页 |
·CLIC1在A549细胞增殖过程中的作用 | 第46页 |
·CLIC1在A549细胞侵袭过程中的作用 | 第46-50页 |
第六章 总结 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
附录 | 第56-58页 |
在学期间发表文章 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |