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靶向CLIC1的RNA干扰对人肺腺癌细胞生物功能的影响

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-6页
目录第6-8页
第一章 前言第8-13页
   ·肺癌的研究现状第8-9页
   ·蛋白质组学及其在肺癌研究中的应用第9-10页
   ·RNAi技术及其在肺癌研究中的应用第10-11页
   ·氯离子通道蛋白研究背景第11-13页
第二章 技术路线第13-14页
第三章 材料与方法第14-27页
   ·主要材料第14-17页
     ·细胞系和临床组织样品第14页
     ·主要试剂第14-17页
   ·主要仪器第17页
   ·实验方法第17-26页
     ·蛋白样品的裂解和提取第17-18页
     ·Bradford法蛋白浓度测定第18-19页
     ·Western blot检测过程第19页
     ·RNA干扰第19-20页
     ·qRT-PCR检测CLIC1 mRNA水平第20-22页
     ·Western blot检测蛋白水平沉默效果第22-23页
     ·细胞凋亡的检测第23-24页
     ·细胞周期的检测第24页
     ·WST-1测定细胞增殖抑制第24-25页
     ·划痕实验(Scratch assay)和Transwell实验检测细胞的侵袭能力第25-26页
   ·统计学处理第26-27页
第四章 结果第27-43页
   ·Bradford法测蛋白浓度第27-28页
   ·CLIC1在细胞系和组织样品中Western blot验证结果第28-29页
   ·RNAi结果第29-32页
     ·流式细胞术测转染效率第29页
     ·定量PCR结果第29-31页
     ·CLIC1 RNAi挑选与条件优化第31-32页
   ·细胞表型变化第32-33页
   ·细胞凋亡的分析第33-36页
     ·细胞周期与细胞凋亡的检测第33-34页
     ·DAPI染色第34-36页
     ·Caspase3 Western blot检测第36页
   ·WST-1法检测CLIC1 siRNA对A549生长抑制效应第36-37页
   ·迁徙实验第37-40页
   ·细胞侵袭实验第40-43页
第五章 讨论与结论第43-50页
   ·CLIC1在A549细胞增殖过程中的作用第46页
   ·CLIC1在A549细胞侵袭过程中的作用第46-50页
第六章 总结第50-52页
参考文献第52-56页
附录第56-58页
在学期间发表文章第58-59页
致谢第59页

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