摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 引言 | 第10-18页 |
·目标细菌及鉴定方法的简要介绍 | 第10-12页 |
·基因芯片介绍 | 第12-14页 |
·探针的性质 | 第12-13页 |
·目标基因 | 第13-14页 |
·基因芯片的片基 | 第14页 |
·实验中用到的TAG-ARRAY 技术简述 | 第14-16页 |
·Tag-Array 原理 | 第14-15页 |
·ssPCR 的操作步骤 | 第15-16页 |
·研究目的与意义 | 第16-17页 |
·技术路线 | 第17-18页 |
第二章 大肠杆菌毒力基因K88 探针与报告基因的设计 | 第18-23页 |
·材料与方法 | 第18-20页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18页 |
·大肠杆菌毒力基因K88 探针的设计 | 第18-19页 |
·报告基因的设计 | 第19页 |
·报告基因成环 | 第19页 |
·报告基因反向PCR 通用引物的设计 | 第19页 |
·23S rRNA 加长探针的设计 | 第19-20页 |
·结果 | 第20-21页 |
·大肠杆菌K88 毒力基因特异性探针设计 | 第20页 |
·报告基因 | 第20页 |
·用于制备斑点杂交的探针 | 第20-21页 |
·分析与讨论 | 第21-23页 |
第三章 检测样本与斑点杂交膜片的制备 | 第23-28页 |
·材料与方法 | 第23-25页 |
·菌种 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·基因组DNA 模板的提取 | 第24页 |
·多重PCR 扩增目的片段 | 第24页 |
·杂交膜片的制备 | 第24-25页 |
·结果 | 第25-27页 |
·三重PCR 反应体系和程序的建立 | 第25-26页 |
·斑点杂交膜探针矩阵 | 第26-27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
第四章 膜斑点杂交及其性能评价 | 第28-34页 |
·材料与方法 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·膜杂交程序 | 第28-30页 |
·预杂交和杂交 | 第28-29页 |
·洗膜 | 第29页 |
·检测杂交信号 | 第29页 |
·膜斑点杂交的性能评价 | 第29-30页 |
·结果 | 第30-32页 |
·探针的特异性验证 | 第30页 |
·膜斑点杂交检测技术的灵敏度 | 第30-31页 |
·膜斑点杂交技术可以同时检测多个不同样本 | 第31页 |
·膜杂交检测技术的临床应用 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
讨论 | 第34-35页 |
结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-39页 |
在读期间发表的学术论文 | 第39-40页 |
作者简介 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |