| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-27页 |
| 1 鸡球虫的免疫机理研究进展 | 第11-16页 |
| ·鸡球虫病免疫学研究历史回顾 | 第11页 |
| ·鸡球虫病免疫机理 | 第11-16页 |
| 2 球虫抗原基因的研究进展 | 第16-20页 |
| ·球虫表面抗原基因 | 第17-18页 |
| ·球虫细胞器阶段的抗原基因 | 第18-20页 |
| 3 DNA 疫苗研究进展 | 第20-25页 |
| ·DNA 疫苗概述 | 第20-21页 |
| ·DNA 疫苗免疫接种的方法与途径 | 第21-22页 |
| ·DNA 疫苗的作用机制 | 第22-23页 |
| ·DNA 疫苗的安全性 | 第23-24页 |
| ·DNA 疫苗在鸡球虫病方面的应用 | 第24-25页 |
| ·展望 | 第25页 |
| 4 存在的问题 | 第25-26页 |
| 5 本实验的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 堆型艾美耳球虫DNA 质粒pcDNA3-3-1E 在雏鸡体内的组织分布 | 第27-34页 |
| 1 引言 | 第27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-31页 |
| ·质粒 | 第27页 |
| ·引物 | 第27页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第27-28页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·实验动物的饲养条件 | 第28页 |
| ·质粒疫苗的制备 | 第28-29页 |
| ·质粒的浓度的测定 | 第29页 |
| ·免疫接种 | 第29页 |
| ·临床观察 | 第29页 |
| ·样品采集 | 第29-30页 |
| ·各组织总DNA 的提取 | 第30页 |
| ·鸡体内各种组织中3-1E 基因的检测 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-33页 |
| ·质粒DNA 纯度和浓度的测定 | 第31页 |
| ·临床观察结果 | 第31页 |
| ·总基因组DNA 琼脂糖凝胶电泳结果 | 第31页 |
| ·pcDNA3-1E 在雏鸡各组织中的分布情况 | 第31-32页 |
| ·pcDNA3-1E 在检测的组织器官中的阳性分布率 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 堆型艾美耳球虫DNA 质粒pcDNA3-3-1E 的生物安全性 | 第34-42页 |
| 1 引言 | 第34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-38页 |
| ·质粒 | 第34页 |
| ·引物 | 第34页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第34-35页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·实验动物的饲养条件 | 第35-36页 |
| ·质粒疫苗的制备 | 第36页 |
| ·质粒疫苗的浓度的测定 | 第36页 |
| ·免疫接种 | 第36页 |
| ·样品采集与处理 | 第36页 |
| ·各组织总DNA 的提取 | 第36页 |
| ·PCR 灵敏度的检测 | 第36-37页 |
| ·DNA 的分离、纯化及回收 | 第37页 |
| ·pcDNA3-1E 与雏鸡细胞基因组整合情况 | 第37页 |
| ·pcDNA3-1E 环境转移和扩散情况 | 第37-38页 |
| ·急性毒性试验 | 第38页 |
| 3 统计方法 | 第38页 |
| 4 结果 | 第38-40页 |
| ·PCR 系统灵敏度的评价 | 第38页 |
| ·pcDNA3-1E 与雏鸡细胞基因组整合情况结果 | 第38-39页 |
| ·pcDNA3-1E 环境转移和扩散情况结果 | 第39-40页 |
| ·急毒试验的观察结果 | 第40页 |
| ·体内生化指标检查结果 | 第40页 |
| 5 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 堆型艾美耳球虫DNA 质粒PCDNA3-3-IE 的免疫原性研究 | 第42-50页 |
| 1 引言 | 第42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-45页 |
| ·质粒 | 第42-43页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第43页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43-44页 |
| ·实验动物的饲养条件 | 第44页 |
| ·质粒疫苗的制备 | 第44页 |
| ·质粒疫苗的浓度的测定 | 第44页 |
| ·雏鸡分组与免疫 | 第44页 |
| ·间接ELISA 检测血清中 IgG 含量 | 第44-45页 |
| ·雏鸡血液淋巴细胞增殖试验 | 第45页 |
| ·外周血中细胞因子检测 | 第45页 |
| 3 统计方法 | 第45页 |
| 4 结果 | 第45-47页 |
| ·血清中IgG 含量变化结果 | 第45-46页 |
| ·外周血T 淋巴细胞增殖情况 | 第46页 |
| ·外周血中IL-2 动态变化结果 | 第46-47页 |
| ·外周血中IFN-γ动态变化结果 | 第47页 |
| 5 讨论 | 第47-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-62页 |
| 附录 | 第62-68页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
