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耐辐射球菌抗氧化相关调控子及紫外辐射后转录组的研究

致谢第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-13页
主要缩略词第13-17页
1 文献综述第17-50页
   ·耐辐射球菌的研究进展第17-32页
     ·耐辐射球菌的分类、生长特性和形态结构第17-20页
     ·耐辐射球菌的基因组第20-21页
     ·耐辐射球菌的电离辐射抗性机制第21-28页
     ·耐辐射球菌氧化抗性机制第28-32页
   ·OxyR的研究进展第32-38页
     ·OxyR的结构及作用第32-33页
     ·OxyR调节子的组成第33页
     ·OxyR调节子的作用第33-35页
     ·OxyR调控作用的分子机制第35-38页
   ·参考文献第38-50页
2 耐辐射球菌DRA0336的生物信息学分析以及突变株和相关第50-70页
   ·引言第50-51页
   ·实验材料与方法第51-57页
     ·试剂与仪器第51页
     ·生物信息学分析第51-52页
     ·菌株,质粒与生长条件第52-54页
     ·基因缺失突变株的构建方法第54-55页
     ·突变体的功能补偿株的构建第55页
     ·DRA0336 C_(228),C_(272)和C_(290)位点的定点突变第55-57页
   ·结果与分析第57-66页
     ·DRA0336的生物信息学分析第57-62页
     ·DRA0336缺失突变株的构建第62-63页
     ·DRA0336和DR0615缺失的双突变株的构建第63-64页
     ·D.radiodurans OxyR同源物的敲除突变株对过氧化氢敏感第64-66页
   ·讨论第66-67页
   ·参考文献第67-70页
3 耐辐射球菌MOxyR_2突变株和补偿株的特性分析第70-89页
   ·引言第70页
   ·材料与方法第70-76页
     ·试剂与仪器第70页
     ·菌株及生长条件第70-72页
     ·过氧化氢处理后耐辐射球菌细胞存活率分析第72页
     ·~(60)Co电离辐射处理后耐辐射球菌细胞存活率分析第72页
     ·蛋白溶液中过氧化氢酶总活性的测定第72-73页
     ·细胞内活性氧(ROS)积累量的测定第73-74页
     ·耐辐射球菌DRA0336补偿大肠杆菌OxyR突变株GS09的菌株构建第74页
     ·大肠杆菌的过氧化氢敏感性实验第74-75页
     ·实时定量PCR第75-76页
   ·结果与分析第76-85页
     ·oxyR_2基因的敲除导致突变株对过氧化氢氧化胁迫很敏感第76-77页
     ·双突变株对过氧化氢处理更敏感第77-78页
     ·oxyR_2基因的敲除导致突变株细胞内积累更多的活性氧(ROS)第78-79页
     ·oxyR_2基因的敲除削弱过氧化氢酶的总活性第79-80页
     ·耐辐射球菌OxyR_2的C_(228)是一个关键位点第80-82页
     ·耐辐射球菌OxyR_2不能补偿E coli的OxyR突变株GS09第82-83页
     ·突变株MOxyR_2和MOxyR不伴随oxyR和oxyR2转录水平的补偿第83-85页
   ·讨论第85-87页
   ·参考文献第87-89页
4 耐辐射球菌DRA0336突变株的转录谱的分析第89-107页
   ·引言第89-90页
   ·实验材料与方法第90-95页
     ·基因芯片和实时定量PCR所需的试剂和仪器第90-91页
     ·细菌培养和处理第91页
     ·耐辐射球菌总RNA的抽提,质检和浓度测定第91-92页
     ·耐辐射球菌寡核苷酸芯片的制备第92页
     ·杂交探针的制备第92-93页
     ·寡核苷酸芯片的预杂交,杂交和清洗第93页
     ·数据分析第93-95页
     ·实时定量PCR(quantitative real-time PCR,QRT-PCR)第95页
   ·结果与分析第95-102页
     ·突变株转录谱明显改变第95-101页
     ·QRT-PCR方法验证芯片数据第101-102页
   ·讨论第102-105页
   ·参考文献第105-107页
5 耐辐射球菌紫外辐射后的转录组研究第107-123页
   ·引言第107-108页
   ·实验材料与方法第108-109页
     ·试剂与仪器第108页
     ·细菌培养和紫外辐照处理第108页
     ·耐辐射球菌UV辐射的存活率测定第108页
     ·RNA提取,芯片杂交和数据分析第108-109页
     ·实时定量PCR第109页
   ·结果和讨论第109-120页
     ·指数期耐辐射球菌UV辐射后的存活率第109-110页
     ·耐辐射球菌紫外辐射后的生长曲线第110页
     ·紫外辐射后的转录组变化第110-119页
     ·QRT-PCR方法验证芯片数据第119-120页
   ·参考文献第120-123页
6 小结第123-126页
攻读博士学位期间发表的论文第126页

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