摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略词中英文对照表 | 第15-16页 |
1 引言 | 第16-18页 |
1.1 选题背景 | 第16页 |
1.2 选题目的 | 第16-17页 |
1.3 选题意义 | 第17-18页 |
2 研究综述 | 第18-41页 |
前言 | 第18-19页 |
2.1 低氧与骨骼肌萎缩的相关研究 | 第19-23页 |
2.1.1 低氧诱导骨骼肌萎缩现象的发现 | 第19-20页 |
2.1.2 骨骼肌萎缩的分子机制 | 第20-23页 |
2.2 抗阻训练刺激骨骼肌肥大的相关研究 | 第23-26页 |
2.2.1 抗阻训练对骨骼肌的影响 | 第23-25页 |
2.2.2 低氧下进行运动训练对骨骼肌的影响 | 第25-26页 |
2.3 骨骼肌蛋白合成与分解相关调控通路 | 第26-28页 |
2.4 骨骼肌蛋白分解的关键调控因子 | 第28-39页 |
2.4.1 PI3K | 第28-30页 |
2.4.2 Akt | 第30-32页 |
2.4.3 Fox O1 | 第32-36页 |
2.4.4 MuRF1和Atrogin-1 | 第36-39页 |
2.5 小结 | 第39-41页 |
3 研究设计 | 第41-44页 |
3.1 技术路线 | 第41-42页 |
3.2 本研究的重点及难点 | 第42-43页 |
3.3 本研究的创新点 | 第43页 |
3.4 研究的相关界定 | 第43-44页 |
4 研究一低氧及抗阻训练对大鼠骨骼肌的影响及Akt-Fox O1-Mu RF1/Atrogin-1 通路变化 | 第44-85页 |
4.1 研究材料 | 第46-49页 |
4.1.1 研究对象 | 第46页 |
4.1.2 实验仪器与试剂 | 第46-49页 |
4.2 研究方法 | 第49-61页 |
4.2.1 训练方案 | 第49-51页 |
4.2.2 双能X射线骨密度仪(DEXA)测试大鼠体成分 | 第51-52页 |
4.2.3 骨骼肌湿重 | 第52页 |
4.2.4 肌组织包埋及石蜡切片的制备 | 第52页 |
4.2.5 组织切片苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色 | 第52-53页 |
4.2.6 免疫荧光化学 | 第53页 |
4.2.7 Image-Pro Plus 6.0统计荧光强度 | 第53页 |
4.2.8 骨骼肌组织总RNA提取 | 第53-54页 |
4.2.9 反转录c DNA | 第54-55页 |
4.2.10 实时荧光定量PCR | 第55-56页 |
4.2.11 组织总蛋白提取 | 第56-58页 |
4.2.12 Western blot | 第58-61页 |
4.2.13 统计方法 | 第61页 |
4.3 研究结果 | 第61-74页 |
4.3.1 大鼠体成份 | 第61-63页 |
4.3.2 大鼠骨骼肌湿重 | 第63-64页 |
4.3.3 大鼠骨骼肌纤维横截面积 | 第64-65页 |
4.3.4 肌球蛋白重链(MHC) | 第65-66页 |
4.3.5 骨骼肌中Akt-Fox O1-Mu RF1/Atrogin-1 通路基因转录水平 | 第66-68页 |
4.3.6 骨骼肌中Akt-Fox O1-Mu RF1/Atrogin-1 通路基因表达情况 | 第68-71页 |
4.3.7 抗阻训练促进骨骼肌Fox O1的磷酸化 | 第71-74页 |
4.4 分析与讨论 | 第74-84页 |
4.4.1 低氧诱导大鼠骨骼肌萎缩与Akt-Fox O1-Atrogin-1/Mu RF1信号通路变化 | 第74-78页 |
4.4.2 抗阻训练缓解低氧诱导骨骼肌萎缩及Akt-Fox O1-Mu RF1/Atrogin-1 信号通路调控变化 | 第78-82页 |
4.4.3 低氧及常氧抗阻训练对骨骼肌的影响与Akt-Fox O1-Mu RF1/Atrogin-1 信号通路调控变化 | 第82-84页 |
4.5 小结 | 第84-85页 |
5 研究二、抑制及激活Akt观察模拟低氧及抗阻训练下Akt-Fox O1对肌细胞蛋白分解的调控作用 | 第85-106页 |
5.1 研究材料 | 第85-87页 |
5.1.1 研究对象 | 第85页 |
5.1.2 实验仪器与试剂 | 第85-87页 |
5.2 研究方法 | 第87-97页 |
5.2.1 L6成肌细胞的复苏、传代、冻存及分化成肌管细胞 | 第87-89页 |
5.2.2 低氧环境干预肌管细胞 | 第89页 |
5.2.3 AKT干扰质粒的定制与扩增 | 第89-90页 |
5.2.4 电转染 | 第90-92页 |
5.2.5 细胞总RNA提取 | 第92-94页 |
5.2.6 Akt激活剂的应用 | 第94-95页 |
5.2.7 细胞爬片及细胞免疫荧光 | 第95-96页 |
5.2.8 激光共聚焦显微镜的应用 | 第96页 |
5.2.9 细胞蛋白提取与Western blot | 第96-97页 |
5.2.10 统计方法 | 第97页 |
5.3 研究结果 | 第97-103页 |
5.3.1 不同低氧条件对L6细胞肌球蛋白重链(MHC)的影响 | 第97-98页 |
5.3.2 干扰Akt表达对L6细胞Fox O1-Atrogin-1/Mu RF1的影响 | 第98-100页 |
5.3.3 低氧下激活Akt对MHC及Fox O1-Atrogin-1/Mu RF1通路表达的影响 | 第100-102页 |
5.3.4 Akt对Fox O1磷酸化表达及定位的影响 | 第102-103页 |
5.4 分析与讨论 | 第103-105页 |
5.5 小结 | 第105-106页 |
6 全文总结 | 第106-107页 |
7 研究结论与建议 | 第107-109页 |
7.1 研究结论 | 第107-108页 |
7.2 研究建议 | 第108-109页 |
附录 | 第109-118页 |
附录A 动物伦理审批表 | 第109-118页 |
参考文献 | 第118-135页 |
致谢 | 第135-136页 |
个人简历 | 第136-138页 |