摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
引言 | 第15-16页 |
第一章 实验材料和方法 | 第16-30页 |
1.1 实验材料 | 第16-18页 |
1.1.1 主要实验试剂 | 第16-17页 |
1.1.2 主要仪器 | 第17-18页 |
1.2 实验方法 | 第18-29页 |
1.2.1 动物分组与模型建立 | 第18页 |
1.2.1.1 动物分组 | 第18页 |
1.2.1.2 SAP模型的建立与处理 | 第18页 |
1.2.2 胰腺、肺组织病理切片制备及病理学评分 | 第18-21页 |
1.2.2.1 胰腺及肺组织标本留取 | 第18页 |
1.2.2.2 胰腺及肺苏木精—伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色实验步骤 | 第18-20页 |
1.2.2.3 病理学评分 | 第20-21页 |
1.2.3 ELISA法检测大鼠外周血IL-12、IL-10、TREM-1、CD68、iNOS及Arg-1的含量 | 第21-22页 |
1.2.4 实时定量PCR检测肺组织中IL-12、IL-10、TREM-1、NF-κB、PPAR-γ、CD68、iNOS及Arg-1mRNA的表达 | 第22-25页 |
1.2.4.1 总RNA的提取 | 第22-23页 |
1.2.4.2 第一链cDNA的合成 | 第23页 |
1.2.4.3 目的基因mRNA的检测 | 第23-25页 |
1.2.5 Western-Blot检测肺组织IL-12、IL-10、TREM-1、NF-κB、PPAR-γ、CD68、iNOS及Arg-1蛋白的表达水平 | 第25-27页 |
1.2.5.1 肺组织蛋白质的提取 | 第25页 |
1.2.5.2 蛋白浓度测定 | 第25-26页 |
1.2.5.3 SDS-PAGE电泳 | 第26页 |
1.2.5.4 转膜 | 第26-27页 |
1.2.5.5 蛋白检测 | 第27页 |
1.2.6 免疫组织化学法检测肺组织中TREM-1、NF-κB、PPAR-γ、CD68、iNOS及Arg-1蛋白表达量 | 第27-29页 |
1.2.6.1 病理切片制作 | 第27-28页 |
1.2.6.2 免疫组织化学SP法操作步骤 | 第28-29页 |
1.2.6.3 免疫组织化学评分 | 第29页 |
1.3 统计学方法 | 第29-30页 |
第二章 实验结果 | 第30-43页 |
2.1 SAP大鼠模型建立成功的鉴定 | 第30页 |
2.2 胰腺和肺组织病理学观察及病理评分 | 第30-32页 |
2.2.1 胰腺组织病理变化 | 第30-31页 |
2.2.2 肺组织病理变化 | 第31页 |
2.2.3 胰腺和肺组织病理评分 | 第31-32页 |
2.3 ELISA法检测大鼠外周血相关指标的水平 | 第32-33页 |
2.3.1 血清IL-12、IL-10和TREM-1的水平 | 第32页 |
2.3.2 血清CD68、iNOS和Arg-1的水平 | 第32-33页 |
2.4 Real-timePCR检测肺组织中相关基因mRNA的表达水平 | 第33-34页 |
2.4.1 肺组织中IL-12、IL-10和TREM-1mRNA的表达水平 | 第33页 |
2.4.2 肺组织中CD68、iNOS和Arg-1mRNA的表达水平 | 第33-34页 |
2.4.3 肺组织中NF-κB及PPAR-γmRNA的表达水平 | 第34页 |
2.5 WesternBlot检测肺组织中相关蛋白的表达水平 | 第34-37页 |
2.5.1 肺组织中TREM-1、NF-κB和及PPAR-γ蛋白的表达水平 | 第34-36页 |
2.5.2 肺组织中CD68、iNOS及Arg-1蛋白的表达水平 | 第36-37页 |
2.6 免疫组化法检测肺组织中相关指标蛋白表达量及评分 | 第37-43页 |
2.6.1 肺组织中TREM-1、NF-κB及PPAR-γ蛋白表达量 | 第37-39页 |
2.6.2 肺组织中TREM-1、NF-κB及PPAR-γ免疫组化评分 | 第39页 |
2.6.3 肺组织中CD68、iNOS及Arg-1蛋白表达量 | 第39-41页 |
2.6.4 肺组织中CD68、iNOS及Arg-1的免疫组化评分 | 第41-43页 |
第三章 讨论 | 第43-46页 |
3.1 SAP大鼠模型的鉴定及ALI肺组织的病理改变 | 第43-44页 |
3.2 SAP并发ALI时肺Mφ表面TREM-1表达水平及促/抗炎细胞因子变化与肺Mφ表型的关系 | 第44页 |
3.3 SAP并发ALI时转录因子NF-κB和PPAR-γ与肺Mφ表型转化的关系 | 第44-45页 |
3.4 SAP并发ALI时TREM-1调控肺Mφ表型转化可能的机制 | 第45-46页 |
第四章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
综述 | 第50-65页 |
参考文献 | 第60-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
硕士攻读期间发表的文章 | 第66页 |