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TREM-1在SAP急性肺损伤时调控肺巨噬细胞表型转换的作用

摘要第5-7页
abstract第7-8页
引言第15-16页
第一章 实验材料和方法第16-30页
    1.1 实验材料第16-18页
        1.1.1 主要实验试剂第16-17页
        1.1.2 主要仪器第17-18页
    1.2 实验方法第18-29页
        1.2.1 动物分组与模型建立第18页
            1.2.1.1 动物分组第18页
            1.2.1.2 SAP模型的建立与处理第18页
        1.2.2 胰腺、肺组织病理切片制备及病理学评分第18-21页
            1.2.2.1 胰腺及肺组织标本留取第18页
            1.2.2.2 胰腺及肺苏木精—伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色实验步骤第18-20页
            1.2.2.3 病理学评分第20-21页
        1.2.3 ELISA法检测大鼠外周血IL-12、IL-10、TREM-1、CD68、iNOS及Arg-1的含量第21-22页
        1.2.4 实时定量PCR检测肺组织中IL-12、IL-10、TREM-1、NF-κB、PPAR-γ、CD68、iNOS及Arg-1mRNA的表达第22-25页
            1.2.4.1 总RNA的提取第22-23页
            1.2.4.2 第一链cDNA的合成第23页
            1.2.4.3 目的基因mRNA的检测第23-25页
        1.2.5 Western-Blot检测肺组织IL-12、IL-10、TREM-1、NF-κB、PPAR-γ、CD68、iNOS及Arg-1蛋白的表达水平第25-27页
            1.2.5.1 肺组织蛋白质的提取第25页
            1.2.5.2 蛋白浓度测定第25-26页
            1.2.5.3 SDS-PAGE电泳第26页
            1.2.5.4 转膜第26-27页
            1.2.5.5 蛋白检测第27页
        1.2.6 免疫组织化学法检测肺组织中TREM-1、NF-κB、PPAR-γ、CD68、iNOS及Arg-1蛋白表达量第27-29页
            1.2.6.1 病理切片制作第27-28页
            1.2.6.2 免疫组织化学SP法操作步骤第28-29页
            1.2.6.3 免疫组织化学评分第29页
    1.3 统计学方法第29-30页
第二章 实验结果第30-43页
    2.1 SAP大鼠模型建立成功的鉴定第30页
    2.2 胰腺和肺组织病理学观察及病理评分第30-32页
        2.2.1 胰腺组织病理变化第30-31页
        2.2.2 肺组织病理变化第31页
        2.2.3 胰腺和肺组织病理评分第31-32页
    2.3 ELISA法检测大鼠外周血相关指标的水平第32-33页
        2.3.1 血清IL-12、IL-10和TREM-1的水平第32页
        2.3.2 血清CD68、iNOS和Arg-1的水平第32-33页
    2.4 Real-timePCR检测肺组织中相关基因mRNA的表达水平第33-34页
        2.4.1 肺组织中IL-12、IL-10和TREM-1mRNA的表达水平第33页
        2.4.2 肺组织中CD68、iNOS和Arg-1mRNA的表达水平第33-34页
        2.4.3 肺组织中NF-κB及PPAR-γmRNA的表达水平第34页
    2.5 WesternBlot检测肺组织中相关蛋白的表达水平第34-37页
        2.5.1 肺组织中TREM-1、NF-κB和及PPAR-γ蛋白的表达水平第34-36页
        2.5.2 肺组织中CD68、iNOS及Arg-1蛋白的表达水平第36-37页
    2.6 免疫组化法检测肺组织中相关指标蛋白表达量及评分第37-43页
        2.6.1 肺组织中TREM-1、NF-κB及PPAR-γ蛋白表达量第37-39页
        2.6.2 肺组织中TREM-1、NF-κB及PPAR-γ免疫组化评分第39页
        2.6.3 肺组织中CD68、iNOS及Arg-1蛋白表达量第39-41页
        2.6.4 肺组织中CD68、iNOS及Arg-1的免疫组化评分第41-43页
第三章 讨论第43-46页
    3.1 SAP大鼠模型的鉴定及ALI肺组织的病理改变第43-44页
    3.2 SAP并发ALI时肺Mφ表面TREM-1表达水平及促/抗炎细胞因子变化与肺Mφ表型的关系第44页
    3.3 SAP并发ALI时转录因子NF-κB和PPAR-γ与肺Mφ表型转化的关系第44-45页
    3.4 SAP并发ALI时TREM-1调控肺Mφ表型转化可能的机制第45-46页
第四章 结论第46-47页
参考文献第47-50页
综述第50-65页
    参考文献第60-65页
致谢第65-66页
硕士攻读期间发表的文章第66页

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