摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
英文缩略词说明 | 第12-14页 |
绪论 | 第14-17页 |
第一部分 肝脂肪变性相关circRNA的筛选及生物信息学分析 | 第17-42页 |
引言 | 第17-18页 |
1.材料与方法 | 第18-28页 |
1.1 材料 | 第18-19页 |
1.1.1 实验细胞来源 | 第18页 |
1.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
1.1.3 实验仪器 | 第19页 |
1.2 实验方法 | 第19-28页 |
1.2.1 建立肝细胞脂肪变性模型 | 第19-20页 |
1.2.2 油红O染色 | 第20-21页 |
1.2.3 细胞内TG含量测定 | 第21页 |
1.2.4 检测样品蛋白含量: | 第21-23页 |
1.2.5 circRNA芯片杂交 | 第23-24页 |
1.2.6 real-time PCR验证差异表达circRNAs | 第24-27页 |
1.2.7 主成分分析 | 第27页 |
1.2.8 GO分析和信号通路注释 | 第27-28页 |
1.2.9 构建circRNA调控网络 | 第28页 |
1.2.10 统计学分析 | 第28页 |
2.结果 | 第28-39页 |
2.1 高脂培养诱导肝细胞脂肪变性 | 第28-29页 |
2.2 肝细胞脂肪变相关的circRNA表达谱分析 | 第29-31页 |
2.3 肝细胞脂肪变相关circRNA的分层聚类分析 | 第31页 |
2.4 差异表达circRNA的 real-time PCR验证 | 第31-33页 |
2.5 肝细胞脂肪变相关circRNA具有转录调控作用 | 第33-36页 |
2.6 circRNA_021412-miR-1972-LPIN1调控网络揭示了脂肪变性相关circRNAs的潜在调控机制 | 第36-39页 |
3.讨论 | 第39-42页 |
第二部分 人环状RNA-0046367 调节肝细胞脂肪变性的分子机制研究 | 第42-71页 |
引言 | 第42-43页 |
1.材料与方法 | 第43-56页 |
1.1 材料 | 第43-45页 |
1.1.1 实验细胞来源 | 第43页 |
1.1.2 实验试剂 | 第43-44页 |
1.1.3 实验仪器 | 第44-45页 |
1.2 方法 | 第45-56页 |
1.2.1 肝细胞脂肪变性模型建立 | 第45页 |
1.2.2 油红O染色 | 第45页 |
1.2.3 TG含量测定 | 第45页 |
1.2.4 检测样品蛋白含量 | 第45页 |
1.2.5 MDA含量检测 | 第45-46页 |
1.2.6 SOD活力检测 | 第46-48页 |
1.2.7 MMP检测 | 第48页 |
1.2.8 载体构建 | 第48页 |
1.2.9 细胞转染 | 第48-49页 |
1.2.11 细胞凋亡率检测 | 第49-50页 |
1.2.13 real-time PCR | 第50页 |
1.2.14 Western Blot | 第50-56页 |
1.2.15 统计学分析 | 第56页 |
2.结果 | 第56-66页 |
2.1 circRNA-0046367 与肝细胞脂肪变性的相关性 | 第56-57页 |
2.2 miR-34a是 CircRNA-0046367 的直接调控靶点 | 第57-58页 |
2.3 CircRNA-0046367 上调PPARα表达水平 | 第58-59页 |
2.4 CircRNA-0046367 增加PPARα下游脂代谢相关靶基因的表达,从而改善肝脂肪变性 | 第59-62页 |
2.5 CircRNA-0046367 过表达可减轻脂质过氧化 | 第62-64页 |
2.6 CircRNA-0046367 过表达促进细胞增殖,抑制凋亡 | 第64-66页 |
3.讨论 | 第66-71页 |
研究结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-83页 |
致谢 | 第83-85页 |
研究生期间撰写和发表的论文 | 第85页 |