缩略语表 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
Abstract | 第13-17页 |
前言 | 第18-19页 |
文献回顾 | 第19-28页 |
第一部分 体外研究骨相关间充质基质细胞中NLRP3和Caspase-11炎症小体 | 第28-60页 |
1 材料 | 第28-33页 |
1.1 主要仪器设备 | 第28-29页 |
1.2 主要实验试剂 | 第29-31页 |
1.3 实验小鼠 | 第31页 |
1.4 主要缓冲液 | 第31-33页 |
2 方法 | 第33-40页 |
2.1 BA-MSCs的收集、纯化及鉴定 | 第33-34页 |
2.2 BA-MSCs的培养及刺激 | 第34页 |
2.3 PI染色检测细胞存活率 | 第34页 |
2.4 qRT-PCR | 第34-36页 |
2.5 ELISA实验 | 第36-37页 |
2.6 免疫印迹实验 | 第37-39页 |
2.7 细胞免疫荧光实验 | 第39-40页 |
2.8 扫描电镜 | 第40页 |
2.9 统计学分析 | 第40页 |
3 结果 | 第40-58页 |
3.1 骨相关MSCs的表面标记 | 第40-41页 |
3.2 野生型BA-MSCs对炎症刺激的应答 | 第41-47页 |
3.3 NLRP3基因缺失BA-MSCs对炎症刺激的应答 | 第47-52页 |
3.4 Caspase-11和Caspase-1/11基因敲除BA-MSCs对炎症刺激的应答 | 第52-58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
第二部分 体内研究骨相关间充质基质细胞中NLRP3和Caspase-11炎症小体 | 第60-76页 |
1 材料 | 第60-62页 |
1.1 主要仪器设备 | 第60-61页 |
1.2 主要实验试剂 | 第61页 |
1.3 实验菌株与小鼠 | 第61页 |
1.4 常用缓冲液的配制 | 第61-62页 |
2 方法 | 第62-64页 |
2.1 细菌感染小鼠模型的建立 | 第62页 |
2.2 炎性肠病IBD模型小鼠的建立 | 第62-63页 |
2.3 BA-MSCs的获取 | 第63页 |
2.4 免疫印迹实验 | 第63页 |
2.5 长骨冰冻切片组织学分析 | 第63页 |
2.6 结肠组织学分析 | 第63页 |
2.7 BA-MSCs移植 | 第63-64页 |
2.8 统计学方法 | 第64页 |
3 结果 | 第64-74页 |
3.1 细菌感染小鼠模型的建立 | 第64-65页 |
3.2 细菌感染小鼠模型体内炎症小体的检测 | 第65-67页 |
3.3 炎症性肠病小鼠模型的建立 | 第67-69页 |
3.4 炎症性肠病小鼠模型体内炎症小体的检测 | 第69-71页 |
3.5 抑制BA-MSCs中NLRP3炎症小体可提高其治疗IBD的疗效 | 第71-74页 |
4 讨论 | 第74-76页 |
第三部分 新型小分子化合物可抑制BA-MSCs中炎症小体 | 第76-92页 |
1 材料 | 第76-77页 |
1.1 主要仪器设备 | 第76页 |
1.2 主要实验试剂 | 第76页 |
1.3 实验小鼠 | 第76页 |
1.4 主要缓冲液的配置 | 第76-77页 |
2 方法 | 第77-78页 |
2.1 BA-MSCs的获取、纯化 | 第77页 |
2.2 BA-MSCs的培养及刺激 | 第77页 |
2.3 PI染色检测细胞存活率 | 第77页 |
2.4 qRT-PCR | 第77页 |
2.5 ELISA实验 | 第77页 |
2.6 免疫印迹实验 | 第77页 |
2.7 细胞免疫荧光实验 | 第77页 |
2.8 扫描电镜检测 | 第77页 |
2.9 IBD小鼠模型的制备 | 第77页 |
2.10 66PR处理IBD小鼠 | 第77-78页 |
2.11 结肠组织学分析 | 第78页 |
2.12 MSCs细胞移植 | 第78页 |
2.13 统计学方法 | 第78页 |
3 结果 | 第78-90页 |
3.1 小分子化合物的结构 | 第78-79页 |
3.2 66PR对BA-MSCs中炎症小体的体外抑制作用 | 第79-84页 |
3.3 检测66PR对BA-MSCs中炎症小体的体内抑制作用 | 第84-87页 |
3.4 66PR预处理BA-MSCs可提高其临床疗效 | 第87-90页 |
4 讨论 | 第90-92页 |
小结 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-102页 |
个人简历和研究成果 | 第102-103页 |
致谢 | 第103页 |