摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第18-36页 |
1.1 DNA纳米技术 | 第19-21页 |
1.2 DNA分子修饰细胞膜的方法 | 第21-26页 |
1.2.1 DNA分子共价修饰细胞膜 | 第22-23页 |
1.2.2 DNA分子基于特定基团修饰细胞膜 | 第23-24页 |
1.2.3 DNA分子基于疏水相互作用修饰细胞膜 | 第24-26页 |
1.3 DNA分子功能化细胞膜 | 第26-33页 |
1.3.1 DNA分子研究细胞膜分子的相互作用 | 第26-28页 |
1.3.2 DNA分子控制细胞膜分子的相互作用 | 第28-30页 |
1.3.3 DNA分子监测细胞膜微环境 | 第30-31页 |
1.3.4 DNA分子介导细胞连接 | 第31-33页 |
1.4 本课题的设计 | 第33-36页 |
第2章 基于胆固醇—DNA的活细胞膜修饰 | 第36-48页 |
2.1 引言 | 第36-37页 |
2.2 实验部分 | 第37-39页 |
2.2.1 实验试剂与仪器 | 第37页 |
2.2.2 实验步骤 | 第37-39页 |
2.2.2.1 DNA定量 | 第37-38页 |
2.2.2.2 细胞培养 | 第38页 |
2.2.2.3 DNA修饰细胞膜 | 第38页 |
2.2.2.4 共聚焦显微镜成像 | 第38-39页 |
2.2.2.5 扫描电子显微镜成像 | 第39页 |
2.3 结果与讨论 | 第39-46页 |
2.3.1 胆固醇—DNA修饰悬浮细胞L1210 | 第39-42页 |
2.3.2 胆固醇—DNA修饰贴壁细胞PC12 | 第42-44页 |
2.3.3 细胞膜被修饰后仍具有流动性 | 第44-46页 |
2.4 结论 | 第46-48页 |
第3章 FNA监测囊泡膜融合动力学 | 第48-74页 |
3.1 引言 | 第48-50页 |
3.2 实验部分 | 第50-54页 |
3.2.1 实验试剂与仪器 | 第50-53页 |
3.2.2 实验步骤 | 第53-54页 |
3.2.2.1 FNA 的合成与 PAGE 表征 | 第53页 |
3.2.2.2 FNA 的 AFM 与 CD 表征 | 第53页 |
3.2.2.3 FNA和量子点细胞外荧光光谱表征 | 第53页 |
3.2.2.4 FNA细胞外单分子荧光表征 | 第53页 |
3.2.2.5 FNA锚定细胞膜 | 第53-54页 |
3.2.2.6 细胞胞吞摄入FNA | 第54页 |
3.2.2.7 DNA在细胞中的取代反应 | 第54页 |
3.2.2.8 囊泡动力学监测 | 第54页 |
3.3 结果与讨论 | 第54-72页 |
3.3.1 FNA在体外的表征 | 第54-61页 |
3.3.2 FNA稳定锚定在细胞膜上 | 第61-63页 |
3.3.3 FNA胞吞后定位于囊泡中 | 第63-68页 |
3.3.4 囊泡膜融合动力学的监测 | 第68-72页 |
3.4 结论 | 第72-74页 |
第4章 DNA纳米机器介导细胞膜胆固醇寡聚化和解聚化 | 第74-92页 |
4.1 引言 | 第74-75页 |
4.2 实验部分 | 第75-77页 |
4.2.1 实验试剂与仪器 | 第75-76页 |
4.2.2 实验步骤 | 第76-77页 |
4.2.2.1 DNA纳米机器的合成 | 第76-77页 |
4.2.2.2 DNA纳米机器的荧光光谱表征 | 第77页 |
4.2.2.3 DNA纳米机器锚定细胞膜 | 第77页 |
4.3 结果与讨论 | 第77-91页 |
4.3.1 DNA纳米机器锚定在细胞膜上 | 第77-80页 |
4.3.2 DNA纳米机器诱导细胞膜胆固醇寡聚化 | 第80-87页 |
4.3.3 DNA纳米机器诱导细胞膜胆固醇解聚化 | 第87-88页 |
4.3.4 胆固醇寡聚化后定位于细胞膜脂筏 | 第88-91页 |
4.4 结论 | 第91-92页 |
第5章 DNA Origami 介导的细胞连接和细胞 cluster 内通讯 | 第92-118页 |
5.1 引言 | 第92-93页 |
5.2 实验部分 | 第93-102页 |
5.2.1 实验试剂与仪器 | 第93-99页 |
5.2.2 实验步骤 | 第99-102页 |
5.2.2.1 DNA Origami 的合成 | 第99页 |
5.2.2.2 DNA 的 AFM、SEM 表征 | 第99-100页 |
5.2.2.3 DNA 与 SPDP 交联 | 第100页 |
5.2.2.4 细胞染色 | 第100页 |
5.2.2.5 细胞修饰DNA与细胞连接 | 第100-101页 |
5.2.2.6 细胞 cluster 内钙黄绿素运输 | 第101页 |
5.2.2.7 细胞 cluster 内膜泡运输 | 第101页 |
5.2.2.8 T细胞免疫 | 第101-102页 |
5.3 结果与讨论 | 第102-117页 |
5.3.1 DNA修饰细胞膜 | 第102-105页 |
5.3.2 DNA Origami 介导细胞连接 | 第105-110页 |
5.3.3 细胞 cluster 内细胞通讯 | 第110-117页 |
5.3.3.1 间隙连接通讯 | 第111-112页 |
5.3.3.2 TNT膜泡运输 | 第112-115页 |
5.3.3.3 细胞凋亡与拯救 | 第115-116页 |
5.3.3.4 细胞免疫 | 第116-117页 |
5.4 结论 | 第117-118页 |
第6章 人工构建胞体—胞体突触及突触间递质释放实时监测 | 第118-132页 |
6.1 引言 | 第118-119页 |
6.2 实验部分 | 第119-122页 |
6.2.1 实验试剂与仪器 | 第119-120页 |
6.2.2 实验步骤 | 第120-122页 |
6.2.2.1 DNA Origami 的合成与表征 | 第120页 |
6.2.2.2 细胞染色 | 第120页 |
6.2.2.3 细胞修饰DNA与细胞连接 | 第120-121页 |
6.2.2.4 碳纤维纳米电极CFNE制备与表征 | 第121页 |
6.2.2.5 突触间递质释放监测 | 第121-122页 |
6.3 结果与讨论 | 第122-131页 |
6.3.1 细胞连接形成胞体-胞体突触 | 第122-126页 |
6.3.2 碳纤维纳米电极CFNE制备与表征 | 第126-127页 |
6.3.3 碳纤维纳米电极CFNE插入胞体-胞体突触间隙 | 第127-129页 |
6.3.4 胞体-胞体突触间隙递质释放监测 | 第129-131页 |
6.4 结论 | 第131-132页 |
第7章 总结与展望 | 第132-136页 |
参考文献 | 第136-154页 |
致谢 | 第154-156页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第156页 |