| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语 | 第13-14页 |
| 绪论 | 第14-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-39页 |
| 第一章 日本脑炎病毒生物学特性与疫苗研究进展 | 第15-39页 |
| 1 日本乙型脑炎的流行特征 | 第15-17页 |
| 2 日本脑炎病毒 | 第17-24页 |
| 2.1 JEV病毒粒子的性质 | 第17-18页 |
| 2.2 乙脑病毒的增殖特性 | 第18页 |
| 2.3 JEV的基因结构 | 第18-19页 |
| 2.4 JEV结构蛋白特征 | 第19-23页 |
| 2.5 JEV非结构蛋白特征 | 第23-24页 |
| 3 JEV的传播特征 | 第24-25页 |
| 4 JEV的致病过程 | 第25-26页 |
| 5 JE的防控 | 第26-29页 |
| 5.1 灭活疫苗 | 第26-27页 |
| 5.2 细胞培养的弱毒活疫苗 | 第27页 |
| 5.3 基因工程疫苗 | 第27-28页 |
| 5.4 重组蛋白亚单位疫苗 | 第28-29页 |
| 6 JEV的常规分离与鉴定 | 第29-30页 |
| 7 JEV疫苗的交叉保护作用 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-39页 |
| 第二篇 实验研究 | 第39-97页 |
| 第二章 毕赤酵母表达JEV基因Ⅲ型prME蛋白及其组装成病毒样颗粒的研究 | 第39-61页 |
| 1 试验材料 | 第44页 |
| 1.1 试验菌株、质粒和细胞 | 第44页 |
| 1.2 主要试剂、耗材 | 第44页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第44页 |
| 2 试验方法 | 第44-53页 |
| 2.1 试验质粒构建 | 第44-49页 |
| 2.2 重组质粒表达鉴定 | 第49-53页 |
| 3 实验结果 | 第53-57页 |
| 3.1 JEV Ⅲ型prME表达载体双酶切及转化酵母阳性克隆的鉴定 | 第53-54页 |
| 3.2 JEV Ⅲ型prME基因转化阳性毕赤酵母菌株的诱导表达鉴定 | 第54-55页 |
| 3.3 毕赤酵母分泌表达JEV Ⅲ型prME蛋白的层析纯化与鉴定 | 第55-56页 |
| 3.4 毕赤酵母分泌表达JEV Ⅲ型prME蛋白透射电镜观察结果 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 第三章 JEV Ⅲ型病毒样颗粒免疫效果的鉴定 | 第61-77页 |
| 1 实验材料 | 第65-66页 |
| 2 实验方法 | 第66-69页 |
| 2.1 阳性毕赤酵母表达上清与弗氏佐剂配伍免疫小鼠 | 第66页 |
| 2.2 纯化后的JEV Ⅲ型VLPs与弗氏佐剂配伍免疫小鼠 | 第66-67页 |
| 2.3 纯化后的JEV Ⅲ型VLPs与核酸佐剂配伍免疫小鼠 | 第67页 |
| 2.4 ELISA检测被免小鼠血清中JEV特异性抗体 | 第67-68页 |
| 2.5 JEV NJ08毒株的扩增 | 第68页 |
| 2.6 测定扩增和制备JEV NJ08病毒液的滴度 | 第68-69页 |
| 2.7 微量空斑减少试验测定小鼠血清抗体中和效价 | 第69页 |
| 3 实验结果 | 第69-73页 |
| 3.1 未纯化的JEV Ⅲ型prME蛋白配伍弗氏佐剂的免疫效果 | 第69-70页 |
| 3.2 纯化的JEV Ⅲ型prME蛋白配伍弗氏佐剂的免疫效果 | 第70-71页 |
| 3.3 纯化的JEV Ⅲ型prME蛋白配伍核酸佐剂的免疫效果 | 第71-72页 |
| 3.4 被免小鼠血清中和效价的测定 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 第四章 毕赤酵母表达JEV基因Ⅰ、Ⅴ型prME蛋白 | 第77-97页 |
| 1 试验材料 | 第81-82页 |
| 1.1 试验菌株、质粒 | 第81页 |
| 1.2 主要试剂、耗材 | 第81-82页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第82页 |
| 2 试验方法 | 第82-88页 |
| 2.1 试验质粒构建 | 第82-85页 |
| 2.2 重组质粒表达鉴定 | 第85-88页 |
| 3 实验结果 | 第88-92页 |
| 3.1 JEV Ⅰ、Ⅴ型prME基因扩增及酵母表达载体构建 | 第88-89页 |
| 3.2 酵母表达载体线性化及阳性克隆鉴定 | 第89-90页 |
| 3.3 SDS-PAGE鉴定酵母表达目的蛋白 | 第90-91页 |
| 3.4 Western blot鉴定酵母表达目的蛋白 | 第91-92页 |
| 4 讨论 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-97页 |
| 全文总结 | 第97-99页 |
| 附录 常用试剂的配制 | 第99-101页 |
| 个人简历、在读期间发表论文 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
