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不同表达系统对AMP脱氨酶表达的影响

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 绪论第11-19页
    1.1 AMP脱氨酶概述第11-12页
    1.2 AMP脱氨酶应用第12-13页
        1.2.1 AMP脱氨酶在食品中的应用第12页
        1.2.2 AMP脱氨酶的其他应用第12-13页
    1.3 呈味核苷酸及AMP脱氨酶生产开发现状第13-15页
    1.4 外源基因表达系统研究进展第15-17页
    1.5 研究内容、目的、意义第17-18页
        1.5.1 研究内容第17页
        1.5.2 目的与意义第17-18页
    1.6 创新性分析第18-19页
第二章 材料与方法第19-40页
    2.1 实验材料第19-21页
        2.1.1 菌株及质粒第19页
        2.1.2 主要药品和试剂第19-20页
        2.1.3 溶液及缓冲液配置第20页
        2.1.4 主要仪器第20页
        2.1.5 培养基第20-21页
    2.2 实验方法与步骤第21-40页
        2.2.1 米曲霉AMP脱氨酶基因的克隆第21-24页
        2.2.2 重组质粒构建第24-28页
        2.2.3 重组载体转化E.coli DH5α感受态第28页
        2.2.4 重组菌的筛选第28-30页
        2.2.5 AMP脱氨酶基因在大肠杆菌中的表达第30-33页
        2.2.6 AMP脱氨酶基因在毕赤酵母中的表达第33-36页
        2.2.7 AMP脱氨酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达第36-37页
        2.2.8 AMP脱氨酶纯化第37-38页
        2.2.9 重组AMP脱氨酶酶学性质第38-40页
第三章 结果与讨论第40-64页
    3.1 米曲霉3811总RNA提取第40页
    3.2 RNA浓度与质量检测第40页
    3.3 AMP脱氨酶基因的克隆及测序第40-41页
    3.4 米曲霉AMP脱氨酶基因的生物信息学分析第41-44页
        3.4.1 AMP脱氨酶基因的氨基酸序列分析第41-43页
        3.4.2 AMP脱氨酶基因系统发育树分析第43-44页
    3.5 重组表达载体的构建与鉴定第44-48页
        3.5.1 重组大肠杆菌表达载体构建与鉴定第44-45页
        3.5.2 重组毕赤酵母表达载体构建与鉴定第45-46页
        3.5.3 枯草芽孢杆菌表达载体构建与鉴定第46-48页
    3.6 重组菌构建第48-50页
        3.6.1 重组大肠杆菌的构建第48页
        3.6.2 重组毕赤酵母的构建第48-50页
        3.6.3 重组枯草芽孢杆菌的构建第50页
    3.7 重组菌诱导表达及条件优化第50-58页
        3.7.1 重组大肠杆菌诱导表达条件优化第50-54页
        3.7.2 重组毕赤酵母诱导条件优化第54-56页
        3.7.3 重组枯草芽孢杆菌的表达及活性鉴定第56-58页
    3.8 重组蛋白纯化第58-59页
    3.9 AMP脱氨酶的酶学性质研究第59-64页
        3.9.1 最适温度的测定第59-60页
        3.9.2 AMP脱氨酶的温度稳定性第60页
        3.9.3 最适pH的测定第60-61页
        3.9.4 AMP脱氨酶的pH稳定性第61页
        3.9.5 金属离子对AMP脱氨酶的影响第61-64页
第四章 总结与展望第64-66页
    4.1 总结第64-65页
    4.2 展望第65-66页
参考文献第66-72页
附录1 主要药品和试剂第72-74页
附录2 主要仪器和设备第74-75页
附录3 溶液及缓冲液配置第75-77页
附录4 AMP脱氨酶基因序列第77-79页
致谢第79-80页
在读期间发表论文及科研成果情况第80页

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