| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 霍乱弧菌流行概况 | 第11页 |
| 1.2 霍乱弧菌的生物学特性及危害 | 第11页 |
| 1.3 霍乱弧菌的生存策略 | 第11-12页 |
| 1.4 霍乱弧菌IV型菌毛 | 第12-14页 |
| 1.4.1 毒素协同菌毛（TCP） | 第12-13页 |
| 1.4.2 甘露糖敏感型血凝素菌毛（MSHA） | 第13-14页 |
| 1.5 霍乱弧菌生物被膜 | 第14-15页 |
| 1.6 影响生物膜形成的相关因素 | 第15-18页 |
| 1.6.1 MshA菌毛在生物膜形成中的作用 | 第15页 |
| 1.6.2 C-di-GMP在生物膜形成中的作用 | 第15-16页 |
| 1.6.3 VPS在生物膜形成中的作用 | 第16-17页 |
| 1.6.4 基质蛋白在生物膜形成中的作用 | 第17页 |
| 1.6.5 细胞外DNA在生物膜形成中的作用 | 第17-18页 |
| 第二章 霍乱弧菌基因组文库的构建 | 第18-29页 |
| 2.1 试验材料及仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 相关试剂及试剂盒 | 第18页 |
| 2.1.3 相关溶液配制 | 第18-19页 |
| 2.1.4 相关试验仪器 | 第19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 目的片段的准备 | 第19-21页 |
| 2.2.2 载体质粒的准备 | 第21-23页 |
| 2.2.3 大肠杆菌XL1Blue感受态的制备及验证 | 第23-24页 |
| 2.2.4 目的片段与载体的酶连及转化 | 第24-25页 |
| 2.2.5 基因文库阳性克隆验证 | 第25-26页 |
| 2.2.6 收集基因文库并保存 | 第26页 |
| 2.3 试验结果与分析 | 第26-27页 |
| 2.3.1 霍乱弧菌酶切验证及载体酶切验证 | 第26-27页 |
| 2.3.2 霍乱弧菌基因文库的阳性克隆验证 | 第27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 霍乱弧菌基因组文库中调控因子的筛选及鉴定 | 第29-39页 |
| 3.1 试验材料及仪器 | 第29页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第29页 |
| 3.1.2 相关试剂及试剂盒 | 第29页 |
| 3.1.3 相关溶液配制 | 第29页 |
| 3.1.4 相关试验仪器 | 第29页 |
| 3.2 试验方法 | 第29-35页 |
| 3.2.1 PmshH调控基因的筛选 | 第29-30页 |
| 3.2.2 PmshH调控因子的鉴定 | 第30-35页 |
| 3.3 试验结果与分析 | 第35-37页 |
| 3.3.1 PmshH调控因子的筛选结果分析 | 第35-36页 |
| 3.3.2 PmshH调控因子的鉴定结果分析 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 VC1371体外与mshH启动子序列的互作分析 | 第39-47页 |
| 4.1 试验材料及仪器 | 第39-41页 |
| 4.1.1 菌株与质粒 | 第39页 |
| 4.1.2 相关试剂及试剂盒 | 第39页 |
| 4.1.3 相关溶液配制 | 第39-40页 |
| 4.1.4 相关试验仪器 | 第40-41页 |
| 4.2 试验方法 | 第41-44页 |
| 4.2.1 霍乱弧菌VC1371原核表达载体的构建 | 第41页 |
| 4.2.2 霍乱弧菌VC1371蛋白的表达与纯化 | 第41-43页 |
| 4.2.3 PmshH启动子DNA的获取 | 第43-44页 |
| 4.2.4 凝胶电泳迁移率实验（EMSA） | 第44页 |
| 4.3 试验结果与分析 | 第44-46页 |
| 4.3.1 VC1371原核表达载体构建结果分析 | 第44页 |
| 4.3.2 VC1371蛋白的表达及纯化结果分析 | 第44-45页 |
| 4.3.3 PmshH启动子DNA扩增结果分析 | 第45页 |
| 4.3.4 EMSA实验结果分析 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-47页 |
| 第五章 VC1371在霍乱弧菌中的功能分析 | 第47-65页 |
| 5.1 试验材料及仪器 | 第47-48页 |
| 5.1.1 菌株与质粒 | 第47页 |
| 5.1.2 相关试剂及试剂盒 | 第47页 |
| 5.1.3 相关溶液配制 | 第47-48页 |
| 5.1.4 相关试验仪器 | 第48页 |
| 5.2 试验方法 | 第48-57页 |
| 5.2.1 VC1371缺失株的构建及PmshH表达结果分析 | 第48-52页 |
| 5.2.2 VC0409缺失株的构建 | 第52页 |
| 5.2.3 生物膜形成情况分析 | 第52页 |
| 5.2.4 MshA的原核表达纯化及多克隆抗体的制备 | 第52-56页 |
| 5.2.5 Western Blot验证MshA在不同菌株中的表达 | 第56页 |
| 5.2.6 鼠肠道竞争定殖实验 | 第56-57页 |
| 5.3 试验结果与分析 | 第57-63页 |
| 5.3.1 VC1371缺失株的构建及PmshH荧光素酶报告基因的表达分析 | 第57-58页 |
| 5.3.2 VC0409缺失株的构建 | 第58-59页 |
| 5.3.3 生物膜形成情况分析 | 第59页 |
| 5.3.4 MshA的原核表达纯化及多克隆抗体的制备 | 第59-60页 |
| 5.3.5 Western Blot验证MshA在不同菌株中的表达 | 第60-61页 |
| 5.3.6 鼠肠道竞争定殖实验结果分析 | 第61-63页 |
| 5.4 讨论 | 第63-65页 |
| 全文总结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 缩略词 | 第74-75页 |
| 个人简介 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
