| 英文缩略对照表 | 第10-12页 |
| 摘要 | 第12-13页 |
| Abstract | 第13页 |
| 第一章 前言 | 第14-29页 |
| 1.1 癌症的治疗现状和困境 | 第14-16页 |
| 1.1.1 癌症的危害和治疗手段 | 第14-15页 |
| 1.1.2 化疗药物分类及作用机制 | 第15页 |
| 1.1.3 化疗药物Doxorubicin对于癌症的治疗和细胞毒性 | 第15-16页 |
| 1.1.3.1 化疗药物Doxorubicin治疗癌症的机制 | 第15页 |
| 1.1.3.2 化疗药物Doxorubicin的心肌毒性 | 第15-16页 |
| 1.2 基因转录的调控机制 | 第16-18页 |
| 1.2.1 转录因子P-TEFb功能概述 | 第16页 |
| 1.2.2 P-TEFb的活性调控 | 第16-18页 |
| 1.3 BET家族蛋白的结构、功能及Brd4活性调控的机制 | 第18-25页 |
| 1.3.1 BET家族蛋白结构和功能 | 第18-22页 |
| 1.3.1.1 BD、ET和CTM结构域的组成和功能 | 第19-21页 |
| 1.3.1.2 BET家族蛋白的功能 | 第21-22页 |
| 1.3.2 Brd4的活性调控 | 第22-23页 |
| 1.3.3 BET家族与疾病的调控 | 第23-25页 |
| 1.3.3.1 BET家族在肿瘤中的作用 | 第23-24页 |
| 1.3.3.2 Brd4和炎症反应 | 第24页 |
| 1.3.3.3 Brd4和急性骨髓白血病(AML) | 第24页 |
| 1.3.3.4 BET家族蛋白是治疗癌症的潜在靶点 | 第24-25页 |
| 1.4 p53与调控细胞凋亡 | 第25-28页 |
| 1.4.1 p53活性的调控 | 第25-26页 |
| 1.4.2 p53调控细胞凋亡 | 第26-28页 |
| 1.5 研究内容和意义 | 第28-29页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第28页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第28-29页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第29-51页 |
| 2.1 实验药品、试剂与仪器 | 第29-32页 |
| 2.1.1 细胞株、菌株和质粒资源 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂和材料 | 第29-31页 |
| 2.1.3 主要实验仪器和耗材 | 第31-32页 |
| 2.2 常用溶液配方 | 第32-36页 |
| 2.2.1 质粒转化及挑取单克隆相关溶液 | 第32-33页 |
| 2.2.2 质粒DNA制备及克隆相关溶液 | 第33-34页 |
| 2.2.3 细胞培养、转染及感染相关溶液 | 第34-35页 |
| 2.2.4 生化实验相关溶液 | 第35页 |
| 2.2.5 Western blot相关溶液 | 第35-36页 |
| 2.2.6 流式细胞相关溶液配方 | 第36页 |
| 2.3 实验方法 | 第36-51页 |
| 2.3.1 质粒转化 | 第36-37页 |
| 2.3.2 质粒DNA小量提取(碱裂解法) | 第37页 |
| 2.3.3 质粒中量提取 | 第37-38页 |
| 2.3.4 DNA限制性内切酶酶切 | 第38-39页 |
| 2.3.5 DNA样品琼脂糖凝胶电泳 | 第39-40页 |
| 2.3.6 琼脂糖凝胶回收DNA片段(实验室自制glass milk法) | 第40-41页 |
| 2.3.7 DNA的连接 | 第41页 |
| 2.3.8 PCR反应 | 第41-42页 |
| 2.3.9 特异性shRNA的构建 | 第42-43页 |
| 2.3.10 细胞培养 | 第43页 |
| 2.3.11 细胞瞬时转染(PEI脂质体转染法) | 第43-44页 |
| 2.3.12 病毒包装感染 | 第44-45页 |
| 2.3.13 细胞的药物处理 | 第45页 |
| 2.3.14 核分级分离(Nucleic fractionation) | 第45-46页 |
| 2.3.15 SDS-PAGE蛋白电泳 | 第46页 |
| 2.3.16 免疫印记实验(Western blot) | 第46-47页 |
| 2.3.17 流式细胞实验 | 第47页 |
| 2.3.18 CCK8试剂盒检测细胞活性 | 第47-48页 |
| 2.3.19 总RNA的提取 | 第48-49页 |
| 2.3.20 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第49-51页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第51-66页 |
| 3.1 Brd4的应激活化是细胞用来抵抗DOX杀伤作用的一种手段 | 第51-52页 |
| 3.2 组蛋白去乙酰化酶HDAC1/2/3的抑制剂MS275能增加DOX对肿瘤细胞的杀伤效应 | 第52-54页 |
| 3.3 BET家族抑制剂JQ1能增加DOX对肿瘤细胞的杀伤效应 | 第54-55页 |
| 3.4 DOX能阻断p53的降解促进p53的积累和入核,JQ1对p53的表达水平没有影响 | 第55-57页 |
| 3.5 JQ1与DOX协同诱导的细胞凋亡是p53依赖性的 | 第57-59页 |
| 3.6 JQ1调控抗凋亡基因Bcl-XL、Bcl-2下调且p53调控促凋亡基因PUMA上调协同导致了JQ1与DOX诱导的p53依赖性细胞凋亡 | 第59-61页 |
| 3.7 JQ1抑制c-MYC的表达与JQ1和DOX协同诱导的p53依赖性的细胞凋亡没有直接关系 | 第61-63页 |
| 3.8 讨论与展望 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
