| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第13-64页 |
| 1.1 前言 | 第13-14页 |
| 1.2 病原体 | 第14-19页 |
| 1.2.1 伪狂犬病毒 | 第15-17页 |
| 1.2.2 炭疽杆菌 | 第17-19页 |
| 1.3 单颗粒/单分子示踪技术 | 第19-28页 |
| 1.3.1 成像装置 | 第19-24页 |
| 1.3.2 图像传感器 | 第24-25页 |
| 1.3.3 数据处理 | 第25-28页 |
| 1.4 标记策略 | 第28-46页 |
| 1.4.1 荧光标记物 | 第28-40页 |
| 1.4.2 标记方法 | 第40-46页 |
| 1.5 本论文的立题思想和主要工作 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-64页 |
| 第2章 衣壳定点表达HaloTag的重组伪狂犬病毒的构建及表征 | 第64-105页 |
| 2.1 前言 | 第64-66页 |
| 2.2 实验部分 | 第66-81页 |
| 2.2.1 材料与仪器 | 第66-70页 |
| 2.2.2 重组伪狂犬病毒的构建——转座法 | 第70-77页 |
| 2.2.3 重组伪狂犬病毒的表征 | 第77-81页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第81-99页 |
| 2.3.1 pGEM-T_HaloTag和pGEM-T_UL35质粒的构建 | 第84-86页 |
| 2.3.2 pGS(pUC)载体的构建 | 第86-88页 |
| 2.3.3 pFBDual-CMV-Eflα_UL35-HaloTag供体质粒的构建 | 第88-89页 |
| 2.3.4 pBeZF1_UL35-HaloTag质粒的构建 | 第89-90页 |
| 2.3.5 重组伪狂犬病毒rPrV_VP26-HaloTag的构建 | 第90-91页 |
| 2.3.6 重组伪狂犬病毒rPrV_VP26-HaloTag的表征 | 第91-99页 |
| 2.4 总结 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-105页 |
| 第3章 单颗粒示踪技术研究伪狂犬病毒的生命周期 | 第105-131页 |
| 3.1 前言 | 第105-106页 |
| 3.2 实验部分 | 第106-109页 |
| 3.2.1 材料与仪器 | 第106-107页 |
| 3.2.2 细胞微管的标记 | 第107页 |
| 3.2.3 电镜超薄切片 | 第107页 |
| 3.2.4 超薄冷冻切片 | 第107-108页 |
| 3.2.5 免疫荧光 | 第108页 |
| 3.2.6 伪狂犬病毒包膜的标记 | 第108-109页 |
| 3.2.7 共聚焦显微镜成像 | 第109页 |
| 3.2.8 数据处理 | 第109页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第109-126页 |
| 3.3.1 伪狂犬病毒的time-lapse单颗粒示踪 | 第110-112页 |
| 3.3.2 伪狂犬病毒入胞 | 第112-114页 |
| 3.3.3 伪狂犬病毒衣壳在细胞内的转运 | 第114-118页 |
| 3.3.4 伪狂犬病毒衣壳锚定在细胞核 | 第118-119页 |
| 3.3.5 伪狂犬病毒衣壳在细胞核的运动行为 | 第119-121页 |
| 3.3.6 伪狂犬病毒衣壳在细胞质中的转运 | 第121-122页 |
| 3.3.7 伪狂犬病毒在不同细胞系中的入胞途径初探 | 第122-126页 |
| 3.4 总结 | 第126页 |
| 参考文献 | 第126-131页 |
| 第4章 单分子示踪技术研究炭疽毒素的入胞机制 | 第131-161页 |
| 4.1 前言 | 第131-132页 |
| 4.2 实验部分 | 第132-140页 |
| 4.2.1 材料与仪器 | 第132-135页 |
| 4.2.2 细胞培养 | 第135页 |
| 4.2.3 PA83的荧光标记 | 第135-136页 |
| 4.2.4 PA63的制备 | 第136-137页 |
| 4.2.5 ATTO594-PA63入胞能力的考察 | 第137页 |
| 4.2.6 ATTO594-PA63在细胞表面形成寡聚体 | 第137-138页 |
| 4.2.7 荧光分子的多步漂白 | 第138页 |
| 4.2.8 ATTO488-PA63与神经节苷脂的双色-单分子示踪 | 第138-139页 |
| 4.2.9 药物抑制试验 | 第139页 |
| 4.2.10 单分子成像的数据处理 | 第139页 |
| 4.2.11 免疫荧光 | 第139-140页 |
| 4.2.12 细胞电转染 | 第140页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第140-158页 |
| 4.3.1 PA83的荧光标记 | 第141-143页 |
| 4.3.2 荧光标记不影响PA63的入胞 | 第143页 |
| 4.3.3 PA63在细胞表面形成寡聚体 | 第143-146页 |
| 4.3.4 PA寡聚体所包含PA分子数目的计算 | 第146-149页 |
| 4.3.5 PA63在细胞表面的寡聚化与脂筏相关 | 第149-154页 |
| 4.3.6 PA63在细胞表面的运动行为与微丝相关 | 第154-158页 |
| 4.4 总结 | 第158-159页 |
| 参考文献 | 第159-161页 |
| 第5章 总结与展望 | 第161-164页 |
| 5.1 总结 | 第161-162页 |
| 5.2 展望 | 第162-164页 |
| 附录：攻读博士学位期间已发表及待发表的科研成果 | 第164-167页 |
| 致谢 | 第167-168页 |
