| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 斑马鱼 | 第12页 |
| 1.2 斑马鱼造血过程 | 第12-13页 |
| 1.3 炎症反应 | 第13-14页 |
| 1.4 高通量测序 | 第14-16页 |
| 1.5 PU.1调控髓系细胞发育的研究进展 | 第16-18页 |
| 第二部分 材料和方法 | 第18-34页 |
| 2.1 实验动物 | 第18页 |
| 2.2 试剂、耗材和仪器 | 第18-20页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.2 主要耗材 | 第19页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.3 试剂配制 | 第20-22页 |
| 2.3.1 LB固体培养基和液体培养基 | 第20页 |
| 2.3.2 原位杂交有关试剂 | 第20-21页 |
| 2.3.3 抗生素溶液 | 第21-22页 |
| 2.3.4 大肠杆菌E.coli化学感受态细胞的制备相关试剂 | 第22页 |
| 2.3.5 其他溶液 | 第22页 |
| 2.4 显微注射 | 第22-23页 |
| 2.4.1 配鱼 | 第22页 |
| 2.4.2 摇菌 | 第22页 |
| 2.4.3 收鱼 | 第22页 |
| 2.4.4 换PTUeggwater | 第22页 |
| 2.4.5 注射平板准备 | 第22页 |
| 2.4.6 注射 | 第22-23页 |
| 2.4.7 观察以及后续实验 | 第23页 |
| 2.5 提取mRNA | 第23页 |
| 2.6 RT-PCR | 第23-25页 |
| 2.6.1 逆转录为cDNA | 第23-24页 |
| 2.6.2 RT-PCR | 第24-25页 |
| 2.7 全胚基因组DNA提取 | 第25页 |
| 2.8 PCR产物纯化 | 第25-26页 |
| 2.9 大肠杆菌化学感受态细胞的制备 | 第26页 |
| 2.10 质粒转化与扩增 | 第26-27页 |
| 2.11 体外合成mRNA | 第27-28页 |
| 2.12 RNA探针的制备 | 第28-29页 |
| 2.12.1 线性化模板 | 第28页 |
| 2.12.2 反义RNA探针的合成和纯化 | 第28-29页 |
| 2.13 整体原位杂交 | 第29-30页 |
| 2.14 苏丹黑染色 | 第30页 |
| 2.15 TUNEL与抗体共染 | 第30-31页 |
| 2.16 PH3实验 | 第31-32页 |
| 2.17 荧光原位杂交和荧光免疫组化共染 | 第32-34页 |
| 第三部分 实验结果 | 第34-48页 |
| 3.1 髓系吞噬细胞应对细菌感染时的反应 | 第34-39页 |
| 3.1.1 注射细菌浓度的摸索及初步观察幼鱼清除细菌的过程 | 第34-35页 |
| 3.1.2 巨噬细胞和粒细胞应对细菌感染时的反应 | 第35页 |
| 3.1.3 巨噬细胞和粒细胞应对细菌感染时的数目变化 | 第35-37页 |
| 3.1.4 细菌感染时斑马鱼红系和淋系的数目变化 | 第37-38页 |
| 3.1.5 髓系前体细胞应对细菌感染时的反应 | 第38-39页 |
| 3.2 HSPC应对不同浓度细菌感染时的不同反应 | 第39-40页 |
| 3.3 免疫反应及造血相关因子转录水平发生显著变化 | 第40-42页 |
| 3.3.1 转录组数据差异表达基因GO富集分析 | 第40-41页 |
| 3.3.2 转录组数据差异表达基因聚类分析 | 第41-42页 |
| 3.4 Pu.1对髓系应急性造血不是必需因子 | 第42-44页 |
| 3.5 Pu.1对维持HSPC的体内平衡至关重要 | 第44-48页 |
| 3.5.1 Pu.1对维持HSPC的体内平衡至关重要 | 第44-45页 |
| 3.5.2 细菌感染对HSPC和髓系前体细胞分别产生影响 | 第45-48页 |
| 第四部分 讨论与分析 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 硕士在读期间发表论文及科研工作 | 第57页 |
