| 部分英文缩写解释 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10页 |
| 第1章 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 木聚糖和木聚糖酶 | 第11-13页 |
| 1.1.1 木聚糖 | 第11页 |
| 1.1.2 木聚糖酶 | 第11-13页 |
| 1.2 耐热木聚糖酶 | 第13-19页 |
| 1.2.1 耐热木聚糖酶的优势 | 第13-14页 |
| 1.2.2 耐热木聚糖酶的来源 | 第14-16页 |
| 1.2.3 耐热机制 | 第16-18页 |
| 1.2.4 提高耐热性的技术手段 | 第18-19页 |
| 1.3 离子液体概述 | 第19-20页 |
| 1.4 木聚糖酶的应用现状 | 第20-22页 |
| 1.4.1 饲料工业 | 第20页 |
| 1.4.2 食品工业 | 第20-21页 |
| 1.4.3 造纸工业 | 第21页 |
| 1.4.4 生物能源 | 第21-22页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 第2章 木聚糖酶XYNH在大肠杆菌和毕赤酵母中表达 | 第23-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 试剂盒、工具酶和生化试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第23页 |
| 2.1.4 培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.5 常用试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 木聚糖酶XYNH原核表达菌株构建 | 第25-29页 |
| 2.2.1 大肠杆菌BL21感受态制备 | 第25-26页 |
| 2.2.2 提取目的基因的重组质粒 | 第26-27页 |
| 2.2.3 转化大肠杆菌宿主细胞BL21 | 第27页 |
| 2.2.4 阳性克隆子筛选 | 第27-29页 |
| 2.3 木聚糖酶XYNH真核表达菌株构建 | 第29-31页 |
| 2.3.1 毕赤酵母GS115感受态制备 | 第29页 |
| 2.3.2 重组表达载体线性化 | 第29-30页 |
| 2.3.3 电击转化 | 第30页 |
| 2.3.4 转化子的筛选 | 第30-31页 |
| 2.4 木聚糖酶XYNH的诱导表达 | 第31-32页 |
| 2.4.1 大肠杆菌诱导表达 | 第31页 |
| 2.4.2 毕赤酵母诱导表达 | 第31页 |
| 2.4.3 XYNH比活力的测定 | 第31-32页 |
| 2.5 原核表达XYNH的纯化 | 第32页 |
| 2.5.1 硫酸铵沉淀 | 第32页 |
| 2.5.2 Ni柱纯化原核表达XYNH | 第32页 |
| 2.6 真核表达XYNH的浓缩和脱糖基化 | 第32-33页 |
| 2.7 木聚糖酶XYNH的SDS-PAGE分析 | 第33-35页 |
| 2.7.1 电泳样品制备 | 第33页 |
| 2.7.2 制胶 | 第33-34页 |
| 2.7.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第34-35页 |
| 2.8 结果与分析 | 第35-37页 |
| 2.8.1 木聚糖酶XYNH两种表达菌株构建 | 第35-36页 |
| 2.8.2 木聚糖酶XYNH的SDS-PAGE分析 | 第36-37页 |
| 2.9 小结 | 第37-38页 |
| 第3章 木聚糖酶XYNH酶学性质研究 | 第38-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 菌种和质粒 | 第38页 |
| 3.1.2 工具酶和生化试剂 | 第38页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第38-39页 |
| 3.1.4 培养基和常用溶液 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 3.2.1 木聚糖酶XYNH的最适反应温度检测 | 第39页 |
| 3.2.2 木聚糖酶XYNH的最适反应pH检测 | 第39页 |
| 3.2.3 木聚糖酶XYNH的 100°C半衰期检测 | 第39-40页 |
| 3.2.4 木聚糖酶XYNH的pH稳定性检测 | 第40页 |
| 3.2.5 木聚糖酶XYNH耐受NaCl检测 | 第40页 |
| 3.3 结果分析 | 第40-46页 |
| 3.3.1 XYNH的三维结构 | 第40-41页 |
| 3.3.2 XYNH的酶学特性鉴定 | 第41-46页 |
| 3.4 小结 | 第46-48页 |
| 第4章 离子液体对木聚糖酶XYNH的影响研究 | 第48-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第48页 |
| 4.1.1 菌株 | 第48页 |
| 4.1.2 生化试剂 | 第48页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第48页 |
| 4.1.4 常用溶液和培养基 | 第48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-49页 |
| 4.2.1 离子液体[EMIM]OAc对木聚糖酶XYNH热稳定性影响 | 第48-49页 |
| 4.2.2 离子液体[EMIM]OAc对XYNH的酶活力响 | 第49页 |
| 4.2.3 不同浓度[EMIM]OAc条件反应Arrhenius活化能计算 | 第49页 |
| 4.3 结果分析 | 第49-52页 |
| 4.3.1 离子液体[EMIM]OAc木聚糖酶XYNH的热稳定性影响 | 第49-50页 |
| 4.3.2 离子液体[EMIM]OAc对XYNH的酶活力影响 | 第50-51页 |
| 4.3.3 不同浓度[EMIM]OAc条件反应Arrhenius活化能计算 | 第51-52页 |
| 4.4 小结 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录A 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第62-63页 |
| 附录B XYNH基因全序列 | 第63页 |
